雪豹保护遗传学和基因组学研究进展

雪豹 (Panthera uncia) 隶属于食肉目猫科豹属,是生活在青藏高原及其周边地区的旗舰物种。随着分子生物学和高通量测序技术的发展,雪豹保护遗传学和保护基因组学研究得到快速的发展,其中非损伤性遗传取样法显著推动了雪豹保护遗传学研究。本文综述了非损伤性遗传取样法在雪豹物种鉴定、个体识别和性别鉴定等研究中的应用,雪豹的系统发生地位、系统地理格局和种群遗传结构及其亚种争议、演化历史、适应性演化和基因组特征等保护遗传学和基因组学方面的研究现状和进展,并对雪豹保护遗传学和基因组学未来发展趋势进行了展望,以期促进雪豹保护生物学研究和保护对策的科学制定。     

中国部分地区种子植物区系亲缘关系的研究

以植物属分布区类型的百分比为指标,分别采用系统聚类分析的最短距离法、最长距离法、中间距离法、重心法、离差平方和法、类平均法和可变法等7种方法,对中国46个地区的植物区系进行了分析研究,给出了其种子植物属的分布区类型的树状聚类图,求得各地区植物区系之间的亲缘关系。结果表明：在一定的经度范围内(中国东半部地区),两个地区植物区系之间的亲缘关系与其所处的纬度相关,即纬度相近其亲缘关系也相近,反之即疏远。运用系统聚类分析方法所得到的中国46个地区植物区系之间亲缘关系的结果与经典的理论基本吻合。     

麦迪霉素产生菌具有启动功能的DNA片段的克隆和分析

利用启动子探针质粒载体pIJ486从麦迪霉素产生菌总DNA中克隆得到了一段具有启动功能的DNA片段.通过限制性酶酶切分析,测定插入DNA片段大小为2.3kb.又利用载体pIJ486和pIJ487的新霉素抗性结构基因上游有多酶切点方向相反的性质,分析了插入片段在两个不同方向上的启动能力.结果表明,在两个方向上均有启动功能,但强弱相差六倍.其中在XbaI-HindIII方向上具有较强的启动能力,在变铅青链霉菌中新霉素抗性水平可达20mg/ml以上.进一步对插入片段的三个BamHI小片段进行分析的结果表明,较强启动子区域集中在BamHI-BamHI 0.79kb DNA片段上.     

固定化犁头霉菌在含有丙二醇的体系中转化RSA为皮质醇

皮质醇是重要的甾体激素类药物之一,目前国内采用的紫色犁头霉菌（Absidia orchidis）催化11-脱氧皮质醇醋酸酯（RSA）生成皮质醇。RSA着先转化为中间体11-脱氧皮质醇（RS）,在11-位羟化酶作用下生成皮质醇（β体）和表皮质醇异构体（a体）及少量副产物,其中β体为目的的产物。反应是在水相中进行的,存在着反应底物浓度低,皮质醇产率低,仅为45%~50%,β体与a体的比值（β/a）为0.9-1.2且不能连续生产等问题^[1].有文献报道^[2-3],在反应体系中加入有机溶剂可影响酶催化的立体选择性。为此本文采用固定化细胞,在反应体系中添加一定量1.2-丙二醇,以增加底物（RSA）的溶解性,并试图提高产物中β/a值,提高β体的产率。     

谭清苏铁性别相关的RAPD标记研究

以谭清苏铁(Cycas tanqingii D.Y.Wang)雌雄植株半年生羽叶为材料,用优化的CTAB法分别提取其全基因组DNA,进行RAPD单因子梯度实验和正交实验以优化扩增条件。应用160个RAPD随机引物检测基因组DNA,雌雄植株均扩增出1450多条带,其中引物S0465扩增出与谭清苏铁雌株高度相关的RAPD标记,其大小约为500bp,该标记与雄株没有关联。     

异型流感病毒感染相关T淋巴细胞增殖活性及IFN-γ阳性Ｔ淋巴细胞水平研究

为探讨机体异型流感病毒间交叉保护作用机制,将实验动物随机分成实验组和对照组,测定异型流感病毒感染后病毒载量,T淋巴细胞增殖活性和IFN-γ阳性CD3＋CD8＋及CD3＋CD4＋淋巴细胞水平的变化。结果显示,异型流感病毒感染后产生的交叉免疫应答反应可能与T淋巴细胞增殖有关;与CTL及Th1类淋巴细胞水平相关,并有时间限制性;IL-2可以加强异型流感病毒感染后IFN-γ阳性CD3＋CD8＋淋巴细胞水平。本研究为制备能够抵御变异流感病毒感染的疫苗提供了理论基础。     

巨细胞病毒肝炎患儿gB基因型分析及细胞因子水平测定

探讨新生儿肝炎患儿CMVgB基因型分布,研究不同gB基因型致病性的差异。采用巢式聚合酶链反应(nested PCR),限制性片段长度多态性(RFLP)分析技术等测定45例新生儿肝炎患儿尿中巨细胞病毒gB基因型,并分析gB基因型与其临床症状的关系。并用ELISA方法测定患儿血清TNF-α和IFN-γ水平。结果显示,新生儿肝炎在gB1~4型中均可发生,以gB1型为主。病理性黄疸为惟一症状的患儿只在gB1型和gB3型中出现,且预后较好。新生儿肝炎患儿血清TNF-α和IFN-γ皆高于对照组,可能与CMV肝炎的病理变化和病损程度有密切的关系。     

鸡痘病毒表达载体的构建Ⅰ、鸡痘病毒282E_4株基因组PstⅠ、HindⅢ酶切片段的克隆及酶切分析

本文介绍了鸡痘病毒２８２Ｅ４株基团组ＰｓｔⅠ片段、ＨｉｎｄⅢ片段的克隆和鉴定,以及部分克隆的限制性内切酶分析。鸡痘病毒基因组经酶切、克隆分别得到３４９个、２７７个白色菌落,经质粒电泳、菌落杂交筛选分别得到２８６、２３４个重组菌落,再经酶切、斑卢、杂交鉴定,证明了所克隆的确为鸡痘病毒的ＰｓｔⅠ、ＨｉｎｄⅢ片段。最后经单、双酶切分析,得到了５个ｐＦＰ、５个ｐＦＨ克隆的物理图谱。     

沿海都市型农业院校生物化学新课程体系的建设

天津沿海都市型农业的特点对人才培养提出了高素质、复合型、创新型的需要,生物化学作为重要的专业基础课,建立新的课程体系势在必行。结合自身优势特点,我们从多层面、多角度进行课程改革,形成了教学层次多样化的新课程体系、进行了立体化系列教材的建设、创建了新形势下的实验教学体系和双语教学模式。经过多年的教学实践,这些教学模式对培养高素质、复合型的人才起到了重要作用。     

番茄碱对人红细胞膜Na+-K+-ATPase活性影响的研究

以低渗法从新鲜健康人红细胞中制得膜Na^ -K^ -ATPase,研究了番茄碱(tomatine)X~人红细胞膜Na^ -K^ -ATPase活性的影响。实验结果表明,反应体系中的tomatine浓度低于1mmol／L时,对不依赖钙调蛋白(CAM)激活的Na^ -K^ -ATPase(称之为基本酶活)影响不大,浓度达1mmol／L时,该酶活性仍保持在95％左右;而在此浓度范围内,tomatine对依赖CaM的Na^ -K^ -ATPase有明显的抑制作用,其IC50值为0．16mmol／L．说明tomatine对膜酶Na^ -K^ -ATPase活性的影响可能是通过阻断CaM激活的途径而起作用,从而为进一步研究番茄碱的作用机制奠定了基础。