海岛棉GbTCP5基因的克隆与表达分析

该研究根据前期海岛棉的转录组数据,通过PCR技术从海岛棉‘新海21’中克隆1个TCP基因,命名为GbTCP5,其开放阅读框945bp,编码314个氨基酸,预测分子量约34.95kD,等电点8.41;多序列比对结果表明,GbTCP5蛋白含有特征性的TCP保守结构域;进化树分析表明,GbTCP5基因与GhTCP17基因在同一分支。qPCR实验结果表明,GbTCP5基因在35d纤维中表达量较高,暗示其可能参与棉花纤维的次生壁合成。酵母单杂交实验表明,GbTCP5在SD-Trp-His-Ade缺陷培养基上生长并且X-gal检验显蓝色,说明该基因在酵母体内具有转录激活功能。     

线粒体动力学与细胞凋亡

线粒体是普遍存在于真核细胞中的双层膜细胞器,通过氧化磷酸化为细胞提供能量。线粒体是高度动态的细胞器,通过持续的融合和分裂改变自身形态来适应各种应激条件以满足细胞的能量代谢及其他生物学需求,这种生物学过程被称为线粒体动力学。细胞凋亡是细胞程序性的死亡方式,而线粒体在内源性细胞凋亡途径中扮演着重要的角色。在受到细胞内部(DNA突变)或者外部刺激时,线粒体外膜通透性改变并释放凋亡因子,如细胞色素C、Smac、AIF等,进而激活细胞凋亡信号通路,促进细胞凋亡。细胞凋亡过程中线粒体形态发生改变,可从管状向颗粒状转变,并伴随着线粒体嵴重构。线粒体形态是由Mfn1、Mfn2、OPA1、Drp1等多种GTP蛋白调控,这些蛋白同时也参与细胞凋亡调控。此外,细胞凋亡调控蛋白如Bax、Bak、Bcl-2等蛋白也可调控线粒体形态。该文主要回顾和阐述细胞凋亡与线粒体动力学的发展历程、基本知识以及它们之间的内在联系。     

干细胞复合生物纳米人工气管支气管移植

长久以来,人造器官一直是医生与患者的共同梦想。2011年7月,瑞典卡罗林斯卡大学医院（Karolinska University Hospital）的胸外科医生保罗·麦斯尔尼（Paolo Macchiarini）等团队完成世界上首例自体干细胞复合生物纳米人工气管移植手术,     

一种改进的图象模糊增强技术

本文简要地讨论了传统模糊增强算法的原理,并详细讨论了这种算法所存在的缺陷。针对传统模糊增强算法的缺陷,本文提出了一种改进的模糊增强算法。实验证明,改进的的算法在图象的处理质量上得到了提高。     

HPLC法测定羚黄氨咖敏片中马来酸氯苯那敏的含量

建立HPLC法测定羚黄氨咖敏片中马来酸氯苯那敏含量的分析方法。采用KromasilC18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱;以0.3%十二烷基硫酸钠溶液(取十二烷基硫酸钠,加水500mL,加磷酸0.25mL,用三乙胺调节pH值3.3±0.1)-乙腈(55∶45)为流动相;流速1.0mL/min;检测波长261nm;柱温:室温,进样量:20μL。马来酸氯苯那敏浓度在2.5～75μg/mL范围内呈良好的线性关系,(r=0.9999,n=6)。高、中、低3种浓度的平均回收率为100.15%。RSD平均值为0.77%(n=9)。HPLC法简便、准确,专属性强,灵敏度高,可有效控制羚黄氨咖敏片中马来酸氯苯那敏的含量。     

海岛棉GbTCP15基因的克隆与表达分析

根据陆地棉GhTCP15基因序列,设计1对引物,通过PCR技术从海岛棉品种‘新海21号’中克隆一个同源基因,命名为GbTCP15。海岛棉GbTCP15基因具有一个1 056 bp开放阅读框,编码351个氨基酸,预测分子量约为38 057.4 kD,等电点为9.01,序列中含有一个高度保守的TCP结构域。氨基酸序列对比表明,海岛棉GbTCP15蛋白与其他植物中的TCP蛋白有较高的一致性,说明该基因在进化过程中是相当保守的。亚细胞定位结果显示,GbTCP15主要分布在细胞核上,推测GbTCP15在复制和转录的过程中发挥着信号转导以及转录调控等作用。进化树分析表明,海岛棉GbTCP15基因与雷蒙德氏棉GrTCP15基因分布在同一分支上。实时荧光定量PCR表明,海岛棉GbTCP15基因在茎部和15 d纤维中表达量较高。研究表明,GbTCP15转录因子可能参与棉花纤维以及表皮毛的发育。     

海岛棉GbHCT13基因的功能验证

该研究利用海岛棉‘新海21’和陆地棉ND203以及模式植物拟南芥,通过转基因及荧光定量检测等方法探究海岛棉GbHCT13基因(GenBank 登录号MW048849)在纤维发育中的功能。结果显示：(1)成功构建重组载体pCAMBIA3301 GbHCT13,经农杆菌介导法转化、除草剂抗性基因筛选、荧光定量检测方法鉴定获得转GbHCT13基因拟南芥T₃代植株4株;qRT PCR检测表明,转基因植株中GbHCT13基因表达量较野生型极显著增加。(2)转基因拟南芥过表达GbHCT13基因使植株同一时期的生长较野生型旺盛,株形、叶片数、抽薹数和茎秆表皮毛数量均与野生型存在差异;组织化学分析发现,转GbHCT13基因的拟南芥较野生型茎秆初生木质部生长活跃,导管增粗,次生木质部导管细胞壁横截面积变大,但髓质细胞无明显变化;过表达GbHCT13使拟南芥中木质素合成途径基因发生不同程度改变,其中CAD、CCoAOMT、PAL和4CL与GbHCT13基因的表达呈正相关。(3)经大田筛选、分子鉴定,成功获得转GbHCT13基因棉花植株3株;转GbHCT13基因棉花的棉纤维伸长率增加,纤维强度增大;沉默GbHCT13基因使棉花植株木质素含量降低,茎秆表皮毛数量减少,木质部导管细胞数量减少,导管细胞壁中木质素沉积量降低,而棉株并未发生株高上的明显矮化现象,且木质素合成通路中的CAD、CCoAOMT、CCR、PAL 4个基因的表达均呈降低趋势,说明抑制GbHCT13使得棉花生长代谢受阻,影响纤维发育起始。研究表明,GbHCT13基因能影响棉花植株中木质素合成从而调控纤维的生长发育,其功能与GbHCT13基因在模式植物拟南芥中的基本一致。     

模拟N沉降下三种林分土壤营养动态分析

通过模拟N沉降实验,设置对照(CK,0 g N m~(-2)a~(-1));低氮(LN,5 g N m~(-2)a~(-1));中氮(MN,10 g N m~(-2)a~(-1));高氮(HN,15 g N m~(-2)a~(-1))4种N处理,以NH_4NO_3为外源N来研究福建省三明格氏栲自然保护区内板栗人工林、观光木人工林及米槠天然林0—10 cm土层养分变化动态。结果表明:N沉降会使板栗人工林土壤显著酸化,P含量降低,在一些时间段内,中高水平的N沉降会显著降低有机C、全N和速效N含量,中或低水平N沉降会显著降低土壤全P和速效P含量,而从第6个月起只有LN处理会显著降低土壤K含量。N沉降总体上会不同程度地提高观光木人工林土壤p H值、有机C、全N和速效N含量,有时影响会达显著或极显著水平;比较而言,LN和HN处理更会造成土壤全P的富集,而MN处理对速效P的影响更显著;LN和HN处理也会显著增加K含量,且以LN处理的效果更稳定。总体上N沉降量越大米槠天然林土壤酸化越显著;N沉降会使其有机C和速效P量显著波动;实验期间,HN处理会显著降低土壤全N和速效N量,而LN与MN处理则会使速效N和K含量增加;在4种处理下全P含量会呈相同趋势波动,差异不显著。     

影响新生儿肠道细菌定植相关因素的研究进展

胃肠道内源菌群组成了人体内最大的微生物环境,它构成复杂,种类繁多,并且与人类的疾病和健康息息相关。同时新生儿阶段是建立肠道微生态系统的关键时期。对于新生儿来讲,肠道细菌定植过程中发生的异常可以提高许多疾病的发病风险。近年来国内外学者对新生儿肠道细菌定植状况及其影响因素进行了深入的临床和基础研究并取得了一定的进展。本文对影响生命早期肠道微生态系统建立和发展的主要因素进行系统地阐述,这些影响因素包括孕妇的口腔卫生、分娩时间、喂养方式、分娩方式、抗生素的使用以及益生菌的应用等。     

高效液相法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林含量

建立阿司匹林片HPLC含量测定方法。采用Kromasil（C18 150mm×4．6mm,5u）色谱柱,以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（23：5：5：61）为流动相;检测波长为280nm;流速1．0mL／min;进样量20uL,柱温：室温。阿司匹林在12．5～250ug／mL范围内有良好的线性关系。平均回收率100.22％,RSD为1．2％。本法操作简便、快速、结果准确、专属性强。