牦牛乳酸脱氢酶B基因突变体的克隆鉴定研究

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析证实牦牛（Bos grunniens）乳酸脱氢酶存在两种类型，根据LDH同工酶谱的特点推测牦牛LDH多态是由B基因变异所致，并由此将凝胶电泳中迁移率快的LDH同工酶谱带称为LDH－Bf类型，迁移率慢的称为LDH－Bs类型．为阐明牦牛LDH变异体的分子机制，实验从牦牛心脏组织中提取总RNA，采用RT-PCR方法分别克隆了LDH－Bf和LDH-Bs两种类型的B基因cDNA全长序列；序列比对分析发现LDH-Bf和LDH-Bs基因存在4个碱基差异；依据cDNA序列推导的氨基酸序列的比对分析，发现两者之间存在两个氨基酸差异；利用Deepview分子建模软件进行的牦牛H亚基及LDH1突变体的高级结构预测，发现突变的两个氨基酸都能产生新的H键，影响整个蛋白分子的H键网络，并进一步导致蛋白分子空间结构的变化．     

Asia-Ⅰ口蹄疫病毒P1-2A基因真核表达质粒的构建及小鼠免疫试验

目的 构建含有Asia-Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A 基因的真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A，并用pVAXⅠ-P1-2A免疫小鼠，评价其体液免疫和细胞免疫水平。方法 通过RT-PCR 方法扩增得到含有FMDV P1-2A编码区的目的基因，并将其克隆到pMD18-T载体上。将pMD18-T-P1-2A和 pVAXⅠ分别经EcoRⅤ和XbaⅠ双酶切后连接构建真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A。将酶切鉴定正确后的重组质粒转染HeLa细胞进行IFA检测。再进行小鼠血清特异性抗体试验、小鼠T淋巴细胞增殖试验和IFN-γ ELISPOT试验。结果 酶切结果与预期目的条带大小相符；荧光结果表明经pVAXⅠ-P1-2A转染的细胞有明显的黄绿色荧光，说明P1-2A基因在HeLa细胞中得到了表达；小鼠免疫结果表明，用免疫的小鼠都产生了较强的体液免疫和细胞免疫，并且T淋巴细胞增殖数和产生IFN-γ的细胞数和对照组相比显著提高(P<0.05)。间接ELISA试验表明，在免疫第14天抗体水平比对照组明显增高(P<0.05)。结论 成功构建了真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A,并通过小鼠免疫试验发现重组质粒试验组能够诱导产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答。     

大黄鱼肌肉生长抑制素基因微卫星序列多态性分析

肌肉生长抑制素(myostatin，MSTN)参与肌肉生长和脂肪发生的调节．本研究在克隆大黄鱼MSTN cDNA的基础上，对3′端非编码区微卫星序列的多态性及其与体长、体重和肌肉脂肪含量的关系进行了分析．结果表明，获得的cDNA长1 886 bp，在3′端非编码区存在微卫星序列（CA）_n．在受检的52个个体中，微卫星序列长度在64～126 bp之间.大部分个体的微卫星序列内存在碱基替换，最常见的碱基替换形式是C→T，属于非完美型微卫星序列．根据该位点微卫星序列长度，在实验群体中共检测到23个等位基因，其中频率为0.019 2的等位基因11个，0.038 5的5个, 0.076 9的3个，0.057 7的2个，0.115 4和0.134 6的各1个．该基因位点的群体杂合度为0.932 7，多态信息含量为0.928 8．微卫星序列长度与大黄鱼体长、体重和肌肉脂肪含量之间的相关系数分别为0.409、0.435和-0.026，P值分别为0.021、0.016和0.878．碱基替换对大黄鱼生长及肌肉脂肪含量均无显著影响．     

江西修水县发出通告保护蛇类资源

为保护蛇类资源,江西修水县工商局和农牧渔业局最近联合发出公告,严禁捕捉、收购、买卖菜花蛇、黑乌蛇、灰鼠蛇等,违者将处以     

应用聚类分析研究十字珊瑚亚科的分类并探讨其起源与演化

提要具分裂繁殖的十字珊瑚类在我国扬子区兰多维列统（Llandovery）分布广泛，属种繁多，有重要的地层意义．但长期以来关于该类群的分类位置及各属的定义和范围各家意见不一。文章应用Q型聚类分析研究十字珊瑚类的分类．提出十字珊瑚亚科可分为7属．即：Stauria Milne-Edwards et Haime, Cystostauria He et Li, Ceriaster Lindstrom. Eostauria He et Li. Paraceriaster Y. X. He. Parastauria He et Li. Massparaseriaster nora. provis. 对7个属分别给予简要定义。文中对十字珊瑚亚科的起源、演化及扩散进行探讨．并分析各属可能的演化亲缘关系。资料表明．最原始最早期的Eostauria属很可能起源于澳大利亚的新南威尔士晚奥陶世的Palaeophyllum的某一种群．后在早兰多维列世晚期扩散到扬子区．在中兰多维列世的爱隆期（Aeronian）迅速繁衍，产生许多新属种，因而扬子区在兰多维列世是十字珊瑚类的演化中心。除少数类群，如：Eostauria，Ceriaster．Stauria在晚兰多维列世或文洛克世（Wenlock）早期分别迁移到中亚地区和欧洲，多数类群在扬子区晚兰多维列世的早、中期因不适应环境巨变而快速衰亡。     

感染耐亚胺培南鲍曼不动杆菌临床分布情况及耐药性分析

目的:探讨感染耐亚胺培南(IPM)鲍曼不动杆菌临床分布情况及耐药性。方法:回顾性分析2013~2015年榆林市中医院患者感染鲍曼不动杆菌的临床分布,并对耐亚胺培南鲍曼不动杆菌进行培养、鉴定及药敏试验,分析其耐药情况。结果:2013~2015年我院共分离培养出鲍曼不动杆菌185株,其中IPM耐药99株(53.51%),IPM敏感86株(46.49%)。绝大部分菌株分离自痰液标本(138株,74.59%),其次是血液标本(14株,7.57%)与尿液标本(12株,6.49%);来自ICU送检标本菌株数量最多(84株,45.41%),其次是呼吸内科标本(53株,28.65%)与神经内科标本(30株,16.22%)。不同标本类型及科室中IPM耐药及IPM敏感鲍曼不动杆菌占比无显著差异(P0.05)。IPM耐药鲍曼不动杆菌对抗菌药物耐药性均较高,其中以头孢哌酮/舒巴坦(CSL)敏感性最高(50.51%);IPM敏感鲍曼不动杆菌对部分抗菌药物耐药性尚可,其中以IPM敏感性最高(93.02%)。结论:耐亚胺培南鲍曼不动杆菌临床分布广泛,多重耐药性严重甚至出现泛耐药,应当对患者进行药敏试验,以药敏结果选择合适的抗菌药物进行使用。     

一种能简化精制过程降低成本的蛋白质生产新方法

美国亚利桑那州特斯康的Research Corp.Technologies(RCT)是一家从事非营利性技术转让的机构。它开发了一项从哺乳动物细胞生产蛋白质的新rDNA技术,名为“逆”分泌技术。据称,用此技术比用其它技术成本低,又省事。 RCT的这项技术利用了劳氏肉瘤病毒的逆转录病毒基因gag,它有联结哺乳动物异种蛋白并将这些蛋白包裹在泡囊内的能力。gag基因与蛋白质联结后,即引导蛋白质至寄主细胞的表面,并开始在该处“出芽(bud)”。在出芽过程中,蛋白质被包在泡囊内并被释放至生长培养基中。将蛋白质离心,蛋白质即被纯化。由于这方法只利用这种逆转录病     

扬子区志留纪十字珊瑚类属种的修订及其新资料

以萼内分裂繁殖为主的十字珊瑚类在我国扬子区广泛分布于志留系兰多维列统的香树园组、雷家屯组、石牛栏组及宁强组等，层位稳定，演化迅速，具有重要的地层意义。文章对我国扬子区发表的志留纪十字珊瑚类属种进行系统整理和修订，十字珊瑚亚科（Stauriinae）分为7属：Ceriaster Lindstr6m，1883，Eostauria Heet Li，1983，Massparaceriaster Tanggen．nov．，ParaceriasterY．X．He，1980，Stauria Edwards et Haime，1850，Cystostauria He et Li，1983和Parastauria He et Li，1974，同时讨论7属的属征，并对一些种群进行归并。此外，描述采自扬子区志留系兰多维列统的十字珊瑚6属8种，其中1新属，3个新种，它们是：Massparaceriaster Tanggen．nov．，Eostauriastauriata Tangsp．nov．，Paraceriastermicropora Tangsp．nov．和Paraceriasterbaishaensis Tangsp．nov．。     

蛇毒制剂治疗肺心病有效

肺原性心脏病(简称肺心病)是常见的急诊急症之一,在我国东北地区发病率高,约90％以上的肺心病是由慢性支气管炎肺气肿发展而来,该病到了晚期由于红细胞增多,血液粘稠,流动缓慢,肺循环中血流郁滞,致使肺小血管微血栓形成,加重了肺的通气换气功能障碍,使得病人体内严重缺氧并二氧化碳潴留并危及生命,一直来治疗非常辣手,效果很不理想。我们使用蛇毒制剂——清栓酶治疗肺心病是最近几个月的事情。病员李志华是吉林省梨树县小城子镇江东道村农民,今年43岁。她患肺心病已经11年了,这次是咳嗽,呼吸困难,心悸,不能平卧,全身水肿,病情危重于1988年12月16日来我院治疗的。     

药物对实验血吸虫病 家兔机体反应的影响

(一)本文报告了药物对于血吸虫病病兔及正常家兔的红血球沉降率,血浆纤维蛋白,丙种球蛋白,凝血酶元时值及体重的影响。(二)酒石酸锑钾的治疗,无论在家兔患病的早期或后期,均可抑制其血沉的加速,而以早期治疗的抑制作用更为显著。同时这个抑制血沉的作用与治疗后的成虫发育率是符合的。因此利用这种方法,可以考虑作为研究一些治疗血吸虫病药物的疗效指标。(三)酒石酸锑钾及士的宁本身对正常家兔的血沉并不引起改变,士的宁对于病兔的血沉也无明显作用,但士的宁可以影响酒石酸锑钾对病兔血沉的抑制作用。 (四)半疗程剂量酒石酸锑钾并用士的宁之疗效较单独应用半疗程剂量酒石酸锑钾者为高(10—20%),而单独应用士的宁并无任何疗效,轻度激动量士的宁也不增加酒石酸锑钾的毒性。(五)酒石酸锑钾的治疗剂量对于正常家兔之血浆纤维蛋白元无明显影响,但能使病兔增高之血浆纤维蛋白元回复正常。(六)酒石酸锑钾的治疗可以使病兔的丙种球蛋白在一定时期内保持在接近正常值范围内,这一抑制作用与感染对照组相比,甚为明显,而氨苯氧烷却无此作用,这一点可能与疗效是有关系的。(七)酒石酸锑钾治疗后的病兔之体重较感染对照组病兔显著增高,而经氨苯氧烷治疗后之病兔,其体重仍日见减轻。(八)氨苯氧烷有较高的毒性,但疗效甚低,它对病兔的血沉及纤维蛋白元所出现的抑制作用,究竟属于对血吸虫或其虫卵的作用,抑系对于病兔机体的毒性作用,目前还不能肯定。