银杏叶提取物促进脑缺血半暗带神经元自噬提高神经保护作用

银杏叶提取物(ginkgo biloba extract-761,EGb-761)注射液在中国常作为辅助药物被用于治疗脑卒中,但是,其潜在的细胞和药理机制尚未完全了解。该研究旨在探讨EGb-761是否通过调节缺血性脑卒中半暗带神经元的自噬从而发挥保护作用。采用雄性SD大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型,将MCAO大鼠随机分为5组,分别为Sham组、MCAO+saline组、MCAO+EGb组、MCAO+EGb+3-MA组和MCAO+3-MA组。脑缺血大鼠用EGb-761药物腹腔注射7天后,并使用自噬抑制剂3-MA侧脑室注射进行干预,分别通过蛋白免疫印迹法(WB)、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和免疫荧光检测缺血半暗带的脑组织,以检测自噬的表达。另外,根据脑梗死体积、神经功能缺损和TUNEL检测神经元凋亡水平,以评估治疗效果。结果表明,与MCAO+saline相比,MCAO+EGb组的EGb-761显著提高了神经元自噬水平,同时,明显减轻了神经功能缺损、脑梗死面积和神经元凋亡。此外,相对于MCAO+EGb组,MCAO+EGb+3-MA组中的3-MA抵消了EGb增强神经元自噬的功效,并且仅使用3-MA继续加重了神经损伤。因此,EGB-761通过特异性促进脑缺血半暗带神经元自噬发挥神经保护作用。     

脱细胞神经移植物对骨髓间充质干细胞的诱导分化

目的探讨脱细胞神经移植物诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为施旺细胞样细胞的可行性。方法将分离纯化的SD大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养扩增,行表型鉴定后,取第5代细胞,诱导组采用脱细胞神经移植物匀浆进行诱导,非诱导组加入等量无血清培养基,倒置相差显微镜观察诱导后细胞形态变化,免疫细胞化学染色检测诱导后细胞S-100,神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein GFAP)的表达情况。结果BMSCs表型鉴定为CD44+、CD54+、CD34-,免疫细胞化学染色GFAP、S-100的阳性表达率分别为为(42±4)%和(64±5)%。结果 脱细胞神经移植物可诱导骨髓间充质干细胞分化为施旺细胞样细胞。     

基于自噬溶酶体形成机制调控缺血性脑卒中后神经元自噬流

脑卒中是由脑血管阻塞或出血引发的急性脑血管病，约84%的临床脑卒中患者由脑缺血引起。研究表明，自噬广泛参与并显著影响脑卒中病理生理进程。自噬是一个将陈旧蛋白质、损伤细胞器及多余胞质组分等呈递给溶酶体进行降解的代谢过程，其包括自噬的激活、自噬体的形成和成熟、自噬体与溶酶体融合、自噬产物在自噬溶酶体内消化和降解等过程。自噬流通常被定义为自噬/溶酶体信号机制。最近发现，自噬流障碍是导致缺血性脑卒中后神经元损伤的重要原因，而在自噬过程中任一步骤发生障碍均可导致自噬流损伤。本文重点对自噬体-溶酶体融合的机制，以及该机制在缺血性脑卒中后发生障碍的致病机理进行详细阐述，以期基于自噬体-溶酶体融合机制对神经元自噬流进行调节，进而诱导缺血性脑卒中后的神经保护。本文可为脑卒中病理机制研究指明方向，为脑卒中治疗探寻新的线索。