从肠道菌群角度认识阿尔茨海默病的潜在发病机制

过去10年中,人们逐渐认识到肠道微生物群的多样性及菌群平衡在维护宿主健康中发挥的作用。肠道微生物及其代谢产物通过一系列的生化、免疫和生理功能环节与宿主进行交流,从而影响宿主的稳态和健康。阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种复杂的神经退行性疾病,其易感性和发展过程受年龄、遗传和表观遗传等因素的影响。研究发现,肠道微生物群的紊乱(组成改变和易位)与神经系统疾病(AD)有关,胃肠道通过肠脑轴与中枢神经系统进行沟通,包括对神经的直接作用、内分泌途径和免疫调控方式。动物模型、粪便菌群移植及益生菌干预为肠道菌群与AD的相关性提供了证据。外漏的细菌代谢产物可能直接损害神经元功能,也可能诱发神经炎症,促进AD的发病。本文主要综述了肠道微生物群与AD的关联和作用机制,以期为通过改善肠道菌群结构预防AD的可能干预措施提供依据。     

江苏金坛盐矿形成时期盐湖水体成分:来自石盐包裹体的证据

我国白垩纪晚期-古近纪由于燕山运动和喜马拉雅运动,形成了一系列的断陷盆地,金坛盐矿就是该时期始新世中晚期的盐湖沉积.本次研究首次在国内半定量的进行了石盐原生包裹体的分析,发现其中Ca2+缺失而富含SO2-4,原始卤水成分为Na-Mg-K-Ca-C1-SO4体系.     

RPN2与肝癌患者预后及对肝癌细胞生长的作用

目的:探讨核糖蛋白2(ribophorin II,RPN2)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达和对HCC患者生存的影响,同时分析RPN2对肝癌HepG2细胞生长和克隆形成的作用。方法:应用免疫组化方法和HCC公共芯片数据,从蛋白和m RNA水平检测HCC组织中RPN2的表达,同时分析RPN2与HCC患者临床参数的关系及预后相关性;进一步利用MTS法和克隆形成实验在肝癌HepG2细胞中检测RPN2对细胞生长的作用。结果:98例肝癌组织中,RPN2阳性表达率88.78%,对应癌旁肝组织中,RPN2阳性表达率74.49%;癌组织中RPN2染色评分为5.80±3.15,癌旁肝组织RPN2染色评分为2.13±1.59,肝癌组织中RPN2表达显著上调(P0.001)。3个肝癌公共芯片数据(共522例肝癌)中RPN2的m RNA表达水平同样显著升高(均P0.001)。98例肝癌患者RPN2表达水平与肿瘤直径(P=0.004)、门脉侵袭(P=0.012)和TNM分期(P=0.009)相关;RPN2高表达的患者总体生存期(OS)和无复发生存期(RFS)较RPN2低表达的患者短(OS:P=0.027;RFS:P=0.036)。肝癌HepG2细胞转染RPN2小干扰RNA后,细胞生长能力显著受抑制。结论:RPN2在肝癌中表达显著升高,RPN2的表达与肝癌的恶性进展有关,RPN2显著促进肝癌细胞生长。     

生物分离中应用超滤的若干问题

本文对超滤技术应用中普遍存在着的诸多重要因素进行了讨论。有些内容在一般教材和方面中较少详细论述。本文从应用者角度分析了产率、吸附、消毒和保存、温控、活性问题、压力和秀过速率以及技术联用应该注意的问题,并将共与膜质量参数、膜配置选择和操作模式相关联。对活性生物样品的处理,文中给予了较多的讨论,并希望结合超滤技术自身特点,在选择和配置一节中,对系统的各组成部分进行部分进行配置优化。应用中,安全性操作也     

吉兰-巴雷综合征患者远期预后不良的相关因素分析

目的:探讨吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barre syndrome,GBS)患者的各项临床参数对远期预后的影响,筛选可导致远期预后不良的危险因素。方法:收集2014年1月-2016年6月在唐都医院医治的84例GBS患者的临床资料。依据发病后1年的Hughes评分将患者分成预后良好组(≤2分)和预后不良组(≥3分)。分析性别、起病年龄、高峰期病情等级评分、自主神经功能障碍、颅神经受累、电生理分型、神经传导阻滞、空腹血糖以及血清白蛋白水平等对GBS患者远期预后的影响。结果:本研究共纳入84例GBS患者,其中预后良好组69例(82.1%),预后不良组15例(17.9%)。预后不良组在起病年龄≥50岁(80%vs 52.2%)、需机械通气辅助呼吸(33.3%vs 2.9%)、存在尿便障碍(33.3%vs 2.9%)、发病高峰时Hughes评分≥4分(100%vs 62.3%)、入院时存在低白蛋白血症(53.3%vs 13%)、延髓麻痹(46.7%vs 18.8%)、接受糖皮质激素治疗(40%vs 8.7%)等方面的患者比率显著高于预后良好组(P均0.05)。多因素Logistic回归分析显示起病年龄≥50岁(P=0.040,OR=9.020)、存在尿便功能障碍(P=0.023,OR=10.643)、入院时低白蛋白血症(P=0.003,OR=9.927)、接受糖皮质激素治疗(P=0.035,OR=8.576)是远期预后不良的高危因素。结论:晚发患者、尿便功能障碍、入院时低白蛋白血症、应用糖皮质激素是GBS远期预后不良的危险因素,临床实践中要积极加强患者营养并避免使用不恰当的免疫抑制剂治疗。     

应用iTRAQ定量蛋白质组学研究海分枝杆菌mkl的基因功能

【目的】通过分离海分枝杆菌野生株和mkl突变株的全菌蛋白,并进行差异蛋白质组分析,以期为探索分枝杆菌重要毒力基因mkl的功能提供新思路。【方法】以海分枝杆菌野生株和mkl突变株为研究材料,提取全菌蛋白,i TRAQ试剂标记后进行质谱鉴定和定量分析,并利用Uni Prot数据库对差异蛋白进行生物信息学分析。【结果】共鉴定出在野生株和mkl突变株中差异表达蛋白566个,其中在突变株中上调表达蛋白232个(比值≥1.4),下调表达蛋白334个(比值≤0.7)。生物信息学预测这些蛋白主要参与细菌脂质代谢、细胞壁和细胞进程、中间代谢、呼吸作用等生物学功能。其中Des A3下调最显著,其功能为脂肪酸去饱和酶,与油酸合成相关,进一步验证发现mkl突变株在不含油酸的固体培养基中生长受限,提示mkl可能在油酸的生物合成通路中发挥功能。【结论】通过i TRAQ分析了海分枝杆菌mkl突变株和野生株的差异表达蛋白谱,发现可能影响分枝杆菌油酸、脂质等合成代谢通路,为进一步研究mkl基因在分枝杆菌致病中发挥作用的相关机制奠定了基础。     

乙型肝炎病毒多聚酶末端蛋白的结构和功能研究

乙肝病毒蛋白结构和功能是当前研究乙肝病毒的热点之一。HBV多聚酶的末端蛋白在病毒复制过程中起重要作用,主要包括前基因组RNA包装和DNA合成的蛋白引发等,并可抑制细胞对干扰素的反应。本文综述了乙肝病毒多聚酶末端蛋白的结构和功能,还比较了乙肝病毒与逆转录病毒多聚酶结构和功能的异同。     

基于TaqMan探针多重实时荧光PCR的肠道特殊菌群绝对定量方法的建立

本研究旨在建立对肠道主要共生菌的快速定量方法。根据细菌16S rRNA基因的保守序列并参考相关研究,设计针对总肠道菌群的通用引物和探针,以及针对双歧杆菌属、肠球菌属和肠杆菌科的特异性引物和探针,采用引物设计工具(Primer-BLAST) 以及聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增以验证引物和探针的特异性。通过分子克隆技术,构建各目标菌属目的基因的重组质粒作为qPCR检测的标准模板,选择标准模板进行重复性实验,并计算组内和组间重复变异系数。用所建立的方法对不同年龄段的临床粪便标本进行3类细菌的检测,并初步分析这些菌群与增龄的关系。结果显示,引物和探针具有较高的特异性;各目的细菌标准曲线在一定范围内线性关系良好,总菌群或各目标菌属的线性范围分别为：总菌群2.9×10³～2.9×10¹²copies/μL、双歧杆菌3.1×10²～3.1×10⁹ copies/μL、肠球菌5.9×10²～5.9×10⁹ copies/μL、肠杆菌6.3×10²～6.3×10⁹ copies/μL,决定系数R²≥ 0.995;检测的最低拷贝数为总菌群7.5×10² copies/μL、双歧杆菌 46 copies/μL、肠球菌 37 copies/μL、肠杆菌 51 copies/μL;重复性实验变异系数在1.32%以下,具有良好的可重复性。对不同年龄段临床粪便标本检测的结果显示,肠球菌和肠杆菌含量随增龄呈增长趋势,且老年组含量显著高于青年组,但在高龄老年人中未发现肠球菌数量增加。双歧杆菌含量随增龄减少,且各组间差异显著,在高龄老年人中也未观察到双歧杆菌显著减少。结果提示,本研究建立了一种可供临床推广的菌群绝对定量方法,能够同时检测3类细菌和菌群总量,对于菌群定量研究具有实际意义。     

花粉——美丽的小精灵

正提到花粉你知道多少?朋友们的回答多是"花粉是花里边的小颗粒"、"蜜蜂采集花粉酿蜜"、"有人花粉过敏"等;对花粉长什么样儿则知之甚少。这是由于花粉太小(几微米到200多微米),很多仅与我们的头发丝直径相当的缘故。17世纪中期,意大利的马尔比基和英国的格鲁,最早通过显微镜观察花粉。花粉大多有着严格的对称性,而又形态各异:有球形、椭圆形、三角形等,外壁有孔、沟、刺和各种雕纹。其精致可谓一丝不苟,令人叹为观止。正是"世人只道花瓣美,安知内中花粉俊"!那么,花粉从何而来呢?花粉是种子植物(包括已灭绝的原始裸子植物和现生的裸子植     

肿瘤坏死因子α突变型斑马鱼在海分枝杆菌感染中的应用研究

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)作为重要的炎性细胞因子,在类风湿关节炎、感染性休克等疾病的发病中起重要作用。为探究TNF-α在宿主抵抗海分枝杆菌感染中的作用,本研究采用成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9[clustered regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9),CRISPR/Cas9]技术,使野生型斑马鱼TNF-α基因发生突变,成功构建并筛选出含有移码突变的TNF-α突变型(TNF-α-/-)斑马鱼。利用原位杂交技术,发现TNF-α-/-斑马鱼中TNF-αmRNA表达水平显著降低。与野生型斑马鱼相比,海分枝杆菌在TNF-α-/-斑马鱼体内扩散和增殖更显著。结果提示,本研究成功构建TNF-α-/-斑马鱼,有助于深入探究TNF-α在斑马鱼抵抗海分枝杆菌感染中的作用及其免疫调节机制。