黄芪甲苷促进心肌干细胞分化的作用研究

目的 探讨黄芪甲苷对心肌干细胞分化的促进作用。方法 采用磁珠分选法,分离小鼠Sca-1＋心肌干细胞,通过免疫组化方法观察黄芪甲甙处理后心肌细胞表面标志蛋白desmin、α-sarcomeric？actin和C-TnT表达的变化,以判断是否对心肌干细胞分化有促进作用。结果 250 mg/L的黄芪甲甙诱导4周后免疫组化染色显示心肌干细胞明显表达desmin、α-sarcomeric actin和C-TnT。而未诱导的细胞desmin、α-sarcomeric actin、C-TnT 均为阴性。因此黄芪甲甙可以促进小鼠Sca-1＋心肌干细胞分化为心肌样细胞,这些细胞表达心肌特异性的蛋白。结论 黄芪甲苷对心肌干细胞分化的促进作用表明其在心肌损伤性疾病的康复中有潜在的治疗价值,值得进一步研究。     

放射诱导型增强子E6可提高hTERTp的放射敏感性

目的：构建融合启动子E6.hTERTp,以探讨放射干预后放射敏感启动子片段E6对人端粒酶逆转录酶启动子（hTERTp）启动活性以及对鼻咽癌靶向调控的影响。方法：通过Overlap PCR法合成融合启动子E6.hTERTp,连接至PGL3 basic质粒。构建含EGR-1启动子（EGR-1p）以及hTERTp的PGL3 basic载体做对照。使用Lipo2000将报告载体以及pRL-SV40质粒共转染正常人成纤维细胞HDF以及人鼻咽癌CNE-2细胞,并给予不同剂量放射干预,双荧光素酶法检测其启动活性。t检验分析不同细胞系中不同放射条件下各启动子启动活性差别。结果：在正常HDF细胞系内,无论放射与否,hTERTp组以及E6.hTERTp组的启动活性均很低;而在CNE2细胞系中,三种启动子启动活性均随放射剂量增加而增加,其增长幅度从大到小分别是EGR-1p组、E6.hTERTp组、hTERTp组。在相同放射剂量干预下,EGR-1P组、E6.hTERTp组与hTERTp组三组间的启动活性两两之间均有统计学差别（p〈0.01）。结论：放射诱导型增强子E6能够明显提高hTERTp放射敏感性,且不影响其在鼻咽癌中靶向性调控作用,为该类肿瘤的放射-基因治疗提供了新的思路。     

口腔疣状癌和口腔鳞癌组织中E-cadherin表达的对比研究

目的:研究E-钙粘素(E-cadherin,E-cd)在口腔疣状癌和口腔鳞癌中的表达,探讨E-cd与口腔疣状癌,口腔鳞癌分化程度的关系。方法:采用免疫组织化学和免疫电镜方法检测18例口腔疣状癌、20例口腔鳞癌组织中的E-cd表达。结果:E-cd在正常口腔黏膜、口腔疣状癌、高分化鳞癌和低分化鳞癌中主要位于胞膜及胞浆上。电镜观察显示E-cd在胞膜主要定位于桥粒,胞浆主要定位于粗面内质网和线粒体上。定量检测显示:E-cd在正常口腔黏膜、口腔疣状癌、高分化鳞癌和低分化鳞癌中的阳性表达率分别100%(8/8)、61.1%(11/18)、50.0%(5/10)和30.0%(3/10)。口腔疣状癌E-cd蛋白的平均染色强度与高分化鳞癌间差异无显著性,但明显低于正常黏膜组(P<0.05)而高于低分化鳞癌(P<0.05)。结论:E-cd的表达水平随口腔肿瘤分化程度的降低而降低,且超微结构的表达部位与肿瘤的分化程度存在相关性。     

大鼠鼻粘膜肽能神经末梢分布的研究

用免疫组化技术（ＡＢＣ法）系统研究了大鼠鼻粘膜９种肽能神经末梢分布的特征,这９种神经肽分别是Ｐ物质（ｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ,ＳＰ）,神经激肽Ａ（ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎＡ,ＮＫＡ）,神经激肽Ｂ（ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎＢ,ＮＫＢ）,降钙素基因相关肽（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｇｅｎｅ－ｒｅｌａｔｅｄｐｅｐｔｉｄｅ,ＣＧＲＰ）,血管活性肠多肽（ｖａｓｏａｃｔｉｖｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ,ＶＩＰ）,神经肽Ｙ（ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ,ＮＰＹ）,甘丙肽（ｇａｌａｎｉｎ,ＧＡＬ）,生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ,ＳＯＭ）及神经降压素（ｎｅｕｒｏｔｅｎｓｉｎ,ＮＴ）,同时选择与鼻粘膜神经肽（ＮＰ）作用密切相关的三叉神经节（ＴＧ）细胞进行上述ＮＰ的定位。用重组ＰＳＰ６５质粒（４００ＳＯＭｃＤＮＡ）制备ＳＯＭｍＲＮＡ单链探针,以地高辛精标记,在鼻粘膜及ＴＧ细胞进行ＳＯＭｍＲＮＡ的原位杂交组化研究。结果提示大鼠鼻粘膜有丰富的肽能神经末梢;ＴＧ细胞含有多种ＮＰ并且可以合成ＳＯＭ。该研究结果对重新认识鼻粘膜神经分布规律有一定意义。