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为了探讨在胞浆中表达的PrP的理化特征以及对细胞活性的影响,我们构建了胞浆型PrP(CytoPrP)真核表达质粒,瞬时转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,通过蛋白酶敏感性实验检测CytoPrP及其蛋白酶抗性,利用MTT和Trypan Blue细胞计数检测CytoPrP的细胞毒性作用.结果显示,CytoPrP在胞浆内的存在受蛋白酶抑制剂的控制;与野生型PrP相比,CytoPrP具有相对较强的蛋白酶K(PK)抗性.MTT和细胞计数实验均显示,Cyto-PrP的存在可诱导明显的细胞毒性效应,而CytoPrP的细胞毒性作用受蛋白酶抑制剂含量的影响,呈剂量依赖关系.上述结果为研究CytoPrP在朊病毒病的发病机制中的意义提供了一定的科学数据. 相似文献
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呼吸道和繁殖障碍疾病是猪场最常见的两种疾病,严重影响猪群的健康和正常生产,已经给世界养猪业造成了很大的经济损失。而且这两种疾病的病原复杂多样,不同的猪场病因可能完全不同,从而给疾病的诊断与防治带来了极大的困难。多年的研究表明,呼吸道和繁殖障碍疾病的病原包 相似文献
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噬菌体表面展示技术是一种将外源蛋白或抗体可变区与噬菌体表面特定蛋白质融合并展示于其表面,构建蛋白质或抗体库,并从中筛选特异蛋白质或抗体的基因工程技术。介绍这一技术的原理、相关展示系统以及在蛋白质相互作用的研究,抗体及疫苗的制备、多肽药物的研制等方面的应用潜力和独特的优点。 相似文献
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摘要: 文章使用SSCP和HMA两种基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法对马MHC-I类分子基因多态性进行了分析。在应用SSCP法进行分析时, 尽管经过实验条件优化, 仍未得到对MHC-I基因理想的分离效果, 提示该方法对分离多态性较高的基因有一定局限性。在对HMA法用参考标准DNA对影响DNA分子构象的温度和变性剂浓度等实验条件进行优化后, 获得了对马MHC-I类分子基因较好的分离效果。6、7、8、9和10号马的样本在相对应泳道上分别出现了6、5、6、5和7个条带。从凝胶中进行DNA条带回收后克隆测序的结果表明, 这一方法可以有效地分离高度多态性的MHC-I类分子基因。 相似文献
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大剂量激光与免疫抑制剂对大鼠免疫功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
应用不同剂量的He—Ne激光连续14天照射健康大鼠,分别于照射后7、14,17、21、28、35天监测大鼠白细胞总数各类白细胞数目的变化。照射大鼠内眼角激光日剂量为13.2415J/cm~2以上,照射大鼠耳后凹陷部的激光日剂量为18.5381J/cm~2以上,照射大鼠脊背正中线皮肤的激光日剂量为23.8347J/cm~2以上,均可在照射后一定时期对大鼠上述指标产生不同程度的抑制作用。实验结果表明,各类白细胞对激光抑制效应的敏感性不一,敏感顺序是:嗜酸性白细胞-杆状核白细胞-分叶核白细胞淋巴细胞。作为有效大剂量町选择日剂量18.5318J/cm~2作内眼角照射,26.4830J/cm~2作耳后凹陷照射,39.7245J/cm~2作脊背正中线皮肤照射。 应用日剂量为39.7245J/cm~2的He—Ne激光照射大鼠脊背正中线皮肤,并与环孢霉素A(CsA)和硫唑嘌呤(Aza)两种免疫抑制剂配合应用,以研究大剂量激光和免疫抑制剂两者配合对大鼠白细胞总数、各类白细胞数、T、B淋巴细胞数、淋巴细胞转化刺激指数(S、I)、10~6个淋巴细胞CPM数的影响,大剂量激光和免疫抑制剂(CsA、Aza)及其配合均可在试验后一定时期对大鼠白细胞总数和各类白细胞数具有明显的抑制作用。大剂量激光和Aza可降低大鼠B淋巴细胞数。大剂量激光、CsA、Aza及激光与二者配合均可使淋巴细胞转化刺激指数(S、I)在 相似文献
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用健康雄性Wistar大鼠制备糖尿病模型,以成功的模型大鼠作为受体,健康雄性大鼠为供体,行全胰十二指肠移植术。用移植成功大鼠进行大剂量激光照射、免疫抑制剂及二者配合抗移植排斥反应的实验,于术后隔天监测血糖、尿糖的变化,于术后7天及出现血糖、尿糖持续升高时采取移植胰脏,进行病理组织学观察,以了解排斥反应的发生与程度。结果表明,日剂量为39.7245J/cm^2的激光照射,可推迟排斥反应的发生时间、降 相似文献