解离增强镧系元素荧光免疫分析灵敏度的改进

为提高解离增强镧系荧光免疫分析(DELFIA)的灵敏度或信／噪比,进行了一些重要的方法学研究．观察到了对于不同的铕量,荧光响应和信／噪比都随着增强液体积而明显地变化．对于确定的铕量,存在一个最佳体积,且铕量越小,其最佳体积也越小．实验中选择最佳体积是重要的．研究了增强液制备技术,发展了微滴定板条有效的清洗和干燥方法,使本底荧光明显降低．     

碱性磷酸酶标记链霉亲和素

碱性磷酸酶标记链霉亲和素（AP-SA）是酶放大时间分辨荧光免疫分析（EATRFIA）通用的、最关键的试剂.报告了AP-SA的戊二醛二步标记方法.用自行研制的荧光发展溶液和AP的底物5-氟水杨酸磷酸酯测定了标记物AP-SA的特性,AP的标记回收率为38.7%;AP-SA稀释200～12 800倍时,稀释倍数和Tb的信/噪比呈线性关系;至少在两个月内,AP-SA的酶活性是稳定的.     

酶放大镧系元素发光法测定碱性碱酸酶

报告了应用酶放大镧系元素发光法测定碱性酸酶的方法。应用５－氟水扬酸磷酯作为酶底物,并对方法学中的多种因素进行了最佳化。用甲基硅油（Ｉ）改进了信／噪比的稳定性。方法的灵敏为４Ｕ／Ｌ。精密度为１０％,精密度为１０％的浓度范围是２．００￣３．００×１０＾２Ｕ／Ｌ。测量值的相对误差〈１０％,测定了血清中的碱性磷酸酶浓度,回收率为９３％￣９５％。     

铕标记抗癌胚抗原单克隆抗体C17的研究和应用

用合成的N′-(对-异硫氰基苄基)-二乙三胺-N¹,N²,N³,N³-四乙酸铕钠为螫合剂.用Sephadex G-50凝胶柱层析分离标记C₁₇和过量试剂.分部收集的层析物的光密度图和荧光强度图完全一致.蛋白峰处两管标记C₁₇的比活性分别为5.2和8.9Eu³⁺离子每C₁₇分子,而且C₁₇的标记回收率为64%.标记C₁₇至少在6个月内是稳定的.用铕标记物得到的时间分辨免疫荧光分析的标准曲线具有良好线性和斜率,表明标记物免疫活性良好,而且已用于血清CEA分析.     

酶放大镧系元素发光法测定碱性磷酸酶

报告了应用酶放大镧系元素发光法测定碱性磷酸酶的方法.应用5-氟水杨酸磷酸酯作为酶底物,并对方法学中的多种因素进行了最佳比.用甲基硅油(I)改进了信/噪比的稳定性.方法的灵敏度为4 U/L.精密度为10%.精密度为10%的浓度范围是2.00～3.00×10² U/L.测量值的相对误差＜10%.测定了血清中的碱性磷酸酶浓度,回收率为93%～95%.     

源于Ⅳ型胶原的肿瘤血管生成抑制剂

新血管生成是各种生理和病理过程发生的基础。在胚胎形成和胎盘发育等正常生理过程中,新血管的生成是至关重要的;然而对于一些疾病的产生,特别是肿瘤的生长、进展和转移,同样离不开血管生成的作用。伴随着“抗肿瘤血管生成疗法”的提出,控制血管生成“开关”的血管生成刺激因子和抑制因子成为研究的热点。Arresten、Canstatin、Tumstatin和Hexastatin是近些年发现的内源性的血管生成抑制因子,它们同系Ⅳ型胶原α链的非胶原区NC1,具有相似的结构和分子量大小,现有研究表明,它们能与内皮细胞表面整合素受体相结合,有效地抑制内皮细胞的增殖和迁移,降低肿瘤组织的微血管密度,切断肿瘤的营养和氧气供给,从而抑制肿瘤的生长和转移。对其作用机制的研究,将有助于肿瘤血管生成抑制剂新药的研发。