利用植物体细胞融合在种间传递胞质雄性不育性

美国康奈尔大学Zelcer等人利用正常的Nicotiana sylrestris和经X射线照射的雄性不育普通菸草的原生质体融合,实现了胞质雄性不育性的种间传递。他们利用X射线可以遏止胞质雄性不育“亲本”原生质体的细胞分裂和甘露醇培养基不利于N.sylvestris原生质体生长的特性,选择出融合产物。为了弥补融合产物频率低的缺点,采用了原生质体喂养层技术。结果从7块愈伤组织得到31株变异株。其中,A组20株,具有N.sylvestris的茎、叶、花的形态特     

胡萝卜与烟草原生质体的低温保存

在较长的时间内,可保持正常生理状态与细胞活性的原生质体的制备及保存技术是进行空间细胞融合实验的前提条件。本研究以0.7ml/L的葡萄糖作渗透压,在6-8℃低温条件下经过72小时保存后,供试原生质体的存活率仍可达81%,并保持了其长壁与分裂的特性。 Abstract:Storage duration and acativity of isolated protoplasts are important problem for experiment on plant cell fusion in space.We have achieved preliminary success using glucose as osmotic reagent,The survival protopasts after 72 hour storage in 0.7mol/L glucose at 6~8℃ reached 81% and maintained a very high activity of division.     

普通烟草与黄花烟草体细胞杂种的花粉粒、果实、种子及气孔的观察

长尾照义[97对有性杂交不易成功的普通烟 草(Nicotiana tabacum）粉红花品种和黄花烟草 (N. rustica）利用体细胞融合的方法,获得了 体细胞杂种。我们利用了普通烟草的红花品种 (Copes yusuhe及u No. 4）和黄花烟草的黄花烟 品种进行了体细胞融合,获得了体细胞杂种植 株^[1,2]。对这些植株的花型、花色、叶型等形态 学的特征和根尖染色体进行了观察,并作了过 氧化物酶和细胞色素氧化酶同功酶的酶谱分 析^[3],证明我们获得了真正的体细胞杂种。在 杂种植株开花、结实时,又对体细胞杂种株及 其亲本的花粉粒、果实、种子和气孔进行了观 察和比较,以期找到一种简便易行的鉴定方 法。     

利用原生质体融合获得普通烟草与黄花烟草种间体细胞杂种植株

我们在高国楠方法的基础上,进一步改良。 使用培养皿沉降法,使人工有性杂交很少成功 的普通烟草（Nicotiana. tabacum）和黄花烟草 (N. rustica）的原生质体融合成功。融合处理后 共得到四十三株再生植株。目前（b月23日） 已开花的有7株。其中两株与“亲本”之一普通 烟草品种CYNo.4 (Copus Yeusuheku No.4）的株 型、叶型、花型、花色无差别。推测可能是没有 产生融合的普通烟草CY No. 4的原生质体再生 植株。另外一株从株型、叶型、花型均相似于普 通烟草CY No. 4,但是花色为粉红。估计可能是 普通烟草和黄花烟草两个种的原生质体发生了 部分融合的结果。其余四株,从株型、叶型、花型、花色都介于两“亲本”之间。黄花烟草的叶 型为卵圆型,有叶柄。普通烟草为长卵圆型,有 叶托无叶柄,而这四株的叶型虽近似黄花烟草, 但无叶柄也无叶托,而且叶缘也不整齐（图1)o 从花型来看也是两“亲本”的中间型：花冠小 于普通烟草而大于黄花烟草（图2)。普通烟草 CYNo.4的花色为深红色,黄花烟草为黄绿色。 而这四株花色为淡紫色。明显地与“两亲”本不 同。推测这四株是普通烟草（N. tabacum）和黄 花烟草（N. rustica)的种间体细胞杂种。 过氧化物酶同功酶的初步鉴定,支持了上 述看法。进一步的观察和研究正在进行中。     

烟草种间体细胞杂种及其后代的研究

通过原生质体融合方法,获得了普通烟草与黄花烟草的种间体细胞杂种植株。对体细胞杂种及其后代进行了形态学、细胞学及酶学研究。它们有许多显著不同于两个亲本的性状。例如花的颜色,叶、花及蒴果的形状,气孔的大小,染色体的数目,同功酶谱及花粉育性。实验证明,通过体细胞杂交,可以克服某些种间杂交的困难,可以作为育种工作的有效途径之一。     

普通烟草和黄花烟草及体细胞杂种过氧化物酶同工酶等电聚焦电泳

日本学者长尾照义(1978)用原生质体融合获得普通烟草与黄花烟草的体细胞杂种植株。1980年陈家玉等在国内首先获得普通烟草(Copus Yeusuku No.4)和黄花烟草(Yellow Flower)的体细胞杂种植株。之后,中国农科院烟草所(1981)也得到相同的结果。陈家玉等(1983)对上述杂种进行了形态学、细胞学和同工酶的分析并取得一定的结果。Dlineee等(1975)分析比较了用等电聚焦技术分离的过氧     

通过农杆菌介导法将免防御麦NP—1基因导入毛白杨（P.tomentosa）

采用叶盘法将兔将御素ＮＰ－１基因导入毛白杨后,经ＰＣＲ分析、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测与筛获得了转基因植株,并经体外抑菌实验表明,转ＮＰ－１基因毛白杨植株组织提取物对某些微生物的生长具有明显的抑制作用。     

利用同源重组提高外源GUS基因在植物组织中表达

将１８Ｓ ｒＲＮＡ基因的部分片段,或烟草的核骨架结合序列（ＳＡＲｓ）作为同源序列与外源ＧＵＳ基因作为报告基因构建成用于基因打靶载体,以枪或农杆菌介导转化到拟南芥的根组织中,检测ＧＵＳ基因瞬间表达的结果显示,两种同源基因序列均可提外源ＧＵＳ基因的表达。     

WA型,BT型和D型水稻雄性不育系细胞质基因组翻译产物分析和研究

通过对ＷＡ型、ＢＴ型和Ｄ型水稻雄性不育系细胞质基因即线粒体基因组和叶绿体基因组翻译产物的分析,初步寻找出与雄性不育和育性恢复有关的调控基因产物。根据实验结果,讨论了水稻细胞质雄性不育及育性恢复机制,并提出了两种育性恢复假说。     

烟草种间体细胞杂种的同工酶分析

在稍加修改的Kao^[7]方法的基础上使用培 养皿沉降法成功地进行了普通烟草（Nicotiana tabacum） 品种CY,和黄花烟草（N. rustica) 品种黄花原生质体的融合，并获得了种间体细 胞杂种植株^[1,2].