老龄大鼠内侧隔核BDNF含量的变化及人参皂甙的保护作用

目的探讨老龄大鼠内侧隔核BDNF含量的变化情况及人参皂甙的保护作用,为人参皂甙的临床应用提供实验依据.方法选用Wistar大鼠40只,分成青年组(3个月)、老龄组(26个月)、给药组(自17个月始给予人参皂甙至26个月),采用免疫组织化学方法检测大鼠内侧隔核BDNF含量的变化情况.结果老龄组内侧隔核BDNF阳性反应物的平均灰度值与青年组相比显著增高(P<0.01),而给药组与老龄组相比其平均灰度值显著降低(P<0.01).结论老龄大鼠内侧隔核BDNF含量明显低于青年组,给药组BDNF含量较老龄组明显增加.说明人参皂甙具有保护BDNF,防止神经元退行性改变的作用.     

铝参与神经原纤维缠结形成的实验研究

目的探讨铝与神经原纤维缠结(NFTs)形成之间的相关性。方法选用16只雌性ICR小鼠,分为正常对照组与染铝组(200mg/kg.bw,染铝8个月)。组织荧光双重染色法观察铝与NFTs在小鼠大脑新皮层神经元内的定位。West-ern blot法半定量检测新皮层内tau蛋白及其磷酸化水平。结果组织荧光染色表明NFTs阳性荧光表达随铝阳性荧光增强而增强,两者分布呈对应关系;Western blot结果显示长期铝暴露导致tau蛋白水平下降(P<0.01,与对照组相比),但磷酸化水平升高(P<0.01,与对照组相比)。结论铝参与大脑新皮层神经元内NFTs形成与累积过程,tau蛋白的过度磷酸化可能是其成因之一。     

人参皂甙Rb1对AD大鼠顶叶皮质β-分泌酶及PS-1表达的影响

目的探讨人参皂甙Rb1对AD大鼠顶叶皮质β-分泌酶及PS-1表达的影响。方法30只健康雄性SD大鼠，随机分为对照组、模型组和治疗组。模型组大鼠胃饲氯化铝同时腹腔注射D半乳糖2个月，对照组大鼠给予等剂量生理盐水，治疗组大鼠于造模结束后腹腔注射人参皂甙Rb14周。采用刚果红染色法观察老年斑，镀银染色法观察神经原纤维缠结，Western blot方法、免疫组化方法和图像分析技术对β-分泌酶及PS-1的表达进行检测。结果模型组与对照组相比有明显的老年斑及神经原纤维缠结形成，β-分泌酶及PS-1的表达增多（P〈0．01）；治疗组老年斑及神经原纤维缠结数量减少，β-分泌酶及PS-1的表达与模型组相比明显减少（P〈0．05）。结论AD模型大鼠顶叶皮质神经元β-分泌酶及PS-1表达水平明显上调，人参皂甙Rb1可明显改善模型动物上述蛋白的异常表达，对神经元具有明显保护和营养作用。     

β-淀粉样蛋白通过激活caspase-3诱导PC12细胞凋亡

目的探讨β-淀粉样蛋白25-35片段（Aβ25-35）对体外培养的大鼠嗜铬瘤细胞PC12细胞促凋亡机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察不同浓度的Aβ25-35干预PC12细胞24h后的细胞活性;将细胞分为对照组、实验组（即20 mmol/L Aβ25-35组）,流式细胞技术观察两组PC12细胞凋亡率;免疫细胞化学染色法观察PC12细胞凋亡基因caspase-3的表达。结果PC12细胞活性呈Aβ25-35剂量依赖性降低,且浓度为20 mmol/L时降低最显著;PC12细胞实验组的凋亡率为23.03%±1.22%,对照组为2.42%±0.87%（P〈0.01）;caspase-3实验组的阳性表达较对照组明显增加（P〈0.01）。结论Aβ可通过激活促凋亡基因caspase-3诱导PC12细胞凋亡。     

人参皂甙对老龄大鼠Meynert核TrkB mRNA表达的影响

目的探讨人参皂甙对老龄大鼠Meynert核(NBM)神经元TrkB mRNA表达的影响.方法选40只雌性Wistar大鼠随机分为3组:青年组(3-5月龄)、老龄组(24-27月龄)及给药组(24-27月龄).给药组大鼠自18月始饲以人参皂甙至24-27月龄.对各组NBM神经元进行原位杂交组织化学法染色,采用图象分析法测定各组平均灰度值并作t检验.结果老龄组大鼠NBM神经元TrkB mRNA表达显著低于青年组,而给药组较老龄组大鼠表达增多.结论人参皂甙对NBM神经元TrkB mRNA表达有促进作用,本结果为人参皂甙抗脑衰老及AD的临床治疗提供了形态学依据.     

多奈哌齐对AD大鼠海马结构神经元的保护作用

目的探讨多奈哌齐(DN)对Aβ所致AD大鼠海马结构损伤的保护作用。方法 36只3月龄Wistar大鼠分为对照组、模型组(侧脑室注射10μg Aβ25-35)、治疗组在模型组基础上腹腔注射多奈哌齐1.5mg/kg/d,持续4w,免疫组化方法观察3组大鼠海马结构3个亚区caspase-3的表达;Western blot方法检测3组大鼠海马结构T-Akt和P-Akt的表达。水迷宫行为学测试3组大鼠的逃避潜伏期。结果模型组与对照组相比大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),治疗组较模型组明显缩短(P<0.01)。模型组海马结构3个亚区的caspase-3平均光密度值均较对照组明显增高(P<0.01);而治疗组较模型组减少(P<0.05)。3组之间T-Akt的表达没有差异,但模型组P-Akt的表达量较对照组下调(P<0.05),治疗组P-Akt的表达量较模型组呈上升趋势(P<0.05)。结论多奈哌齐可能是通过上调Akt的磷酸化水平而减少caspase-3的表达,改善大鼠的学习记忆功能。     

人参皂甙Rb1对环磷酰胺所致卵巢早衰大鼠的保护作用

目的探讨人参皂甙Rb1对化疗所致卵巢早衰(Premature ovarian failure,POF)大鼠的Bcl-2及Bax基因表达的影响。方法选用30只2-3月龄具有正常动情周期雌性Wistar大鼠随机分3组,分别为对照组,治疗组和模型组。采用免疫组化和免疫印迹方法分别观察和半定量检测POF大鼠卵巢凋亡调节基因Bcl-2和Bax的蛋白表达情况,同时对比观察人参皂甙Rb1对其表达的影响。结果模型组卵巢颗粒细胞Bax蛋白的平均光密度值较对照组明显增高(P0.05);模型组Bcl-2蛋白的表达量较对照组明显下调(P0.05)。Rb1治疗后Bcl-2蛋白表达明显升高,Bax蛋白表达明显下调(P0.05)。结论 Rb1可能是通过下调bax蛋白水平减少卵巢颗粒细胞的凋亡,对化疗所致卵巢早衰起到治疗的作用,进而延缓卵巢衰老。     

人参皂甙对老龄大鼠海马结构BDNF及Trk B蛋白表达的影响

目的探讨老龄大鼠海马结构BDNF及Trk B蛋白表达的老龄性变化,同时对比观察人参皂甙对其改变的影响。方法雌性Wistar大鼠39只,分为青年组、老龄组、给药组(第17个月始饲以人参皂甙至27月龄)。采用免疫组化及Western blot方法对海马结构BDNF反应产物及Trk B蛋白进行定性、定量分析。结果老龄组CA3、CA1区BDNF含量分别较青年组下降13.3%、10.4%(P<0.05);其给药组和老龄组相比变化不大(P>0.05)。齿状回从青年到老年变化不明显(P>0.05),但给药组比老龄组增加16.7%(P<0.01)。老龄组海马结构Trk B蛋白表达较青年组下调了99.7%;给药组较老龄组上调了78.5%(P<0.01)。结论老龄组海马结构BDNF及Trk B蛋白表达较青年组明显降低,而人参皂甙可明显上调齿状回BDNF含量和海马结构Trk B蛋白的表达。     

老龄大鼠海马CA_3区神经元的酶细胞化学改变及人参茎叶皂甙的抗衰老作用

本实验应用酶细胞化学方法观察了老龄大鼠海马ＣＡ３区神经元的琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）,酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ）的衰老变化,同时对比观察了人参茎叶皂甙的抗衰老作用。实验数据由彩色显微图像分析系统进行定量分析。实验结果提示老龄时海马ＣＡ３区神经元ＳＤＨ酶活性减弱,ＡＣＰａｓｅ活性增强。而人参茎叶皂甙具有促进神经元ＳＤＨ酶活性,降低ＡＣＰａｓｅ活性的作用。本结果为老龄时学习记忆能力下降及人参茎叶皂甙延缓衰老提供了一定的酶细胞化学变化的依据。     

人参皂甙Rb1对阿尔茨海默病大鼠海马结构β-淀粉样蛋白表达的影响

目的观察人参皂甙Rb1对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠学习记忆能力及海马结构β-淀粉样蛋白表达的影响。方法动物分3组：对照组、模型组及治疗组，用D半乳糖联合三氯化铝建立AD大鼠模型，治疗组在造模后给予人参皂甙Rb1腹腔注射4周；采用Morris水迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力，用免疫组织化学方法观察海马结构β-淀粉样蛋白的表达。结果与对照组相比，模型组大鼠各时间段的逃避潜伏期均显著延长（P〈0．01），海马CA1、CA3区及齿状回β-淀粉样蛋白表达的阳性细胞数明显增多（P〈0．01）；治疗组大鼠的逃避潜伏期较模型组明显缩短（P〈0．01），海马CA1、CA3区及齿状回的β-淀粉样蛋白阳性细胞数显著减少（P〈0．01）。结论人参皂甙Rb1对AD模型大鼠学习记忆损害具有明显改善作用，其机制可能与人参皂甙Rb1减少海马结构β-淀粉样蛋白的表达有关。