HBV前S2蛋白单克隆抗体的制备和生物学特性的鉴定

目的克隆表达HBV前S2蛋白,用纯化的重组蛋白GST-S2免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗HBV前S2蛋白的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性.方法利用含双拷贝乙肝病毒adw2亚型基因全序列的质粒pEcob6,经PCR方法扩增出HBV前S2片段,在GST表达系统中表达,表达产物用谷胱甘肽亲和层析纯化后,用于免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗前S2蛋白的mAb,采用间接ELISA方法和Western blot进行mAb特异性鉴定;同时采用间接ELISA方法鉴定mAb相对亲和力.结果获得一株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞7A6;相对亲和力均在107以上.Western blot显示该株mAb能特异识别重组前S2蛋白.结论成功地制备出抗HBV前S2蛋白的一株mAb.     

抗登革病毒2型E蛋白单克隆抗体的制备和生物学特性的鉴定

为了制备可用于胶体金快速检测试纸条的抗登革病毒2型（DEN2）E蛋白单克隆抗体（mAb）,通过基因克隆获得E基因与质粒pET32a（＋）的重组质粒,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21,IPGT诱导表达重组蛋白。以DEN2重组E蛋白免疫BALB／c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗DEN2E蛋白的mAb,以间接ELISA法和Western blot进行mAb特异性鉴定;同时采用间接ELISA法鉴定mAb的Ig亚类。结果表明获得1株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞（7C7）,其抗体亚类为IgG1。Western blot显示该株mAb能特异识别重组pET32a-DEN2E蛋白。因此,成功制备出抗DEN2E的1株mAb,为建立快速特异橙测登革病毒感染的实验方法提供了有力的工具。     

甲状腺功能5 项检测在妊娠期妇女中的应用

目的:分析甲状腺功能5项检测在妊娠期妇女中的应用价值,为制定妊娠期妇女的甲状腺功能指标的参考值范围提供依据。方法:选取2013年8月~2014年12月我院收治的826例健康妊娠妇女(实验组)与794例非妊娠育龄妇女(对照组)为研究对象。采用电化学发光法检测甲状腺功能5项指标,即三碘甲腺原氨酸(TT3)、甲状腺素(TT4)、促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4),比较两组甲状腺功能异常率,并比较5项指标在妊娠早、中、晚期妇女与对照组中的差异。结果:(1)实验组甲状腺功能异常的发生率(39.10%)显著高于对照组(17.63%),差异有统计学意义(P0.05);(2)实验组FT4、TT4水平随着妊娠期的进展逐渐降低,TSH水平逐渐升高,且均低于对照组水平,差异有统计学意义(P0.05);而各妊娠期FT3、TT3水平比较差异无统计学意义,但均略低于对照组(P0.05)。结论:甲状腺功能5项指标检测应作为妊娠期妇女的孕期必查项目之一,且制定早、中、晚期妊娠期妇女的甲状腺功能5项指标参考值范围十分必要。