骨髓干细胞动员对动脉粥样硬化破裂斑块的稳定与修复作用

目的研究自体骨髓干细胞动员对兔动脉粥样硬化（AS）破裂斑块的稳定与修复作用。方法用液氮冻伤术创建兔AS破裂斑块模型,动员组注射重组人粒细胞刺激因子（rhG-CSF）动员自体骨髓干细胞,对照组注射等量生理盐水,连续5 d。动员第5天抽血分离获取单个核细胞,BrdU标记后经静脉注入动物体内;分别于动员后3d和4周末抽血,ELISA法检测兔血清MMP-9、hsC-RP及PAI-1水平;动员后4周处死兔,HE染色和Masson三色染色观察斑块病理形态,免疫组化染色观察BrdU在斑块区表达情况。结果动员5 d后,动员组兔外周血有核细胞计数及单核细胞比例明显增高;动员后4周,动员组新生内皮细胞及胶原纤维明显增多,在斑块区发现有BrdU标记的阳性细胞,动员组血清MMP-9、hsC-RP及PAI-1水平明显降低。结论应用rhG-CSF动员自体骨髓干细胞能通过促进血管内皮细胞和胶原纤维再生,降低炎症因子及凝血纤溶因子而稳定与修复AS破裂斑块。     

秋水仙碱对新西兰兔不稳定斑块形成的影响研究

目的 探究秋水仙碱对新西兰兔动脉粥样硬化不稳定斑块形成的影响及其作用机制。方法 雄性新西兰白兔32只,3月龄,按空白对照组(n=8)、模型组(n=8)、秋水仙碱组(n=8)、匹伐他汀组(n=8)进行分组。实验组高脂饲料诱导2周后行颈动脉液氮冻伤,术后8周和术后12周分别检测兔血清血脂水平及高敏C反应蛋白(high sensitive C-reactive protein, hsCRP)、白介素6(interleukin 6,IL-6)表达水平。术后12周处死,取颈动脉做石蜡切片,HE染色观察血管组织形态,实时定量PCR(RT-qPCR)检测斑块内腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)、沉默信号调节因子1(sirtuin 1,SIRT1)、过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator-1α,PGC-1α)基因表达水平,免疫印迹(Western Blot)检测斑块内p-AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白表达水平,并做...     

液氮冻伤术建立动脉粥样硬化破裂斑块及血栓模型

目的创建一种操作简单、经济实用的动脉粥样硬化（AS）破裂斑块及血栓动物模型。方法21只雄性纯种新西兰白兔随机分为两组：液氮冻伤＋高脂喂养组（A组=11只）和高脂喂养组（B组=10只）。A组实施右颈总动脉内膜液氮冻伤术结合高脂饲料喂养,B组单纯给予高脂饲料喂养。8周末以液氮激发斑块破裂,激发前后分别采血检测血脂、hsC-RP、MMP-9及PAI-1水平;激发48h后处死所有动物,取出右颈总动脉作HE染色及免疫组化染色等,光镜及电镜观察破裂斑块及血栓形成情况。结果8周后兔血脂水平明显升高;激发后血浆hsC-RP、MMP-9及PAI-1均明显升高;所有A组兔子的右颈总动脉均可见AS破裂斑块及血栓形成,而B组兔子未见斑块或血栓形成;所建立的破裂斑块在组织结构、细胞构成、生长特征和脂质沉积方面与人类斑块相似。结论液氮冻伤术能简便、快速、高效地建立AS破裂斑块及血栓模型,从而为研究人类AS破裂斑块及血栓形成的机理和药物干预治疗提供了一种新型动物模型。     

人心脏型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒的临床评价

目的评价人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)检测试剂盒(胶体金法)在急性心肌梗死(AMI)诊断中的价值。方法采用平行、盲法、对照的对比试验设计,比较其试验产品和对比产品对诊断AMI的敏感性、特异性、准确性。结果共测定240份临床血液标本。试验产品和对比产品的阳性符合率为100%,阴性符合率为96.15%,总符合率为97.92%。对比产品和试验产品结果不一致的5例标本以临床诊断结果为标准进行验证后,试验产品与临床诊断结果的阳性符合率为100%,总符合率为100%。采用Kappa检验考核两种产品测定结果的一致性,Kappa指数为0.958。经McNamara's test分析,两产品之间无差异,χ2=3.20,P>0.05。结论试验产品显示出较好的诊断价值,可以作为AMI早期诊断标志物,试验产品与对比产品等效。     

艰难梭菌细胞毒素B功能区的克隆及序列分析

目的克隆艰难梭菌(Clostridium difficile,C.d)细胞毒素B羧基末端功能区(CDB3)基因,并对其进行测序及生物信息学分析。方法利用PCR技术扩增CDB3基因,并将其定向插入pET-22b( )载体中,以DNA自动分析仪进行序列测定,并以生物信息学软件分析其生物学特性。结果成功克隆了艰难梭菌CDB3基因,经测序表明与GenBank中分布的Clostridium difficile VPI10463的ToxinB3基因序列完全一致。DNAstar软件预测其蛋白质的相对分子量(Mr)约为71.3 kD,并显示出良好的抗原性。结论研究获得了序列正确的CDB3基因,为其重组表达及其相关研究奠定了良好基础。     

睾酮对雄兔hs-CRP、MMP-9、HO-1、APN和动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的探讨睾酮对雄兔血高敏C反应蛋白（hs-CRP）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血红素氧化酶-1（HO-1）、脂联素（APN）和动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。方法将66只雄性新西兰纯种兔随机分为4组,其中正常对照组10只（A组）、喂以普通饲料;假去势＋球囊损伤颈动脉组16只（B组）、去势＋球囊损伤颈动脉＋生理剂量睾酮（6mg/（kg.2周））肌注组16只（C组）、去势＋球囊损伤颈动脉＋生理盐水肌注组24只（D组）均喂以高脂饲料。在实验第8周随机抽取处死部分动物,观察颈动脉病变的形态特征,抽血测睾酮、hs-CRP、MMP-9、HO-1、APN水平。结果D组兔血睾酮水平显著降低;B,C组较D组兔血hs-CRP、MMP-9水平显著降低,HO-1、APN水平显著升高;且B,C组较D组兔动脉粥样斑块的面积和内-中膜厚度（IMT）显著减小,斑块纤维帽增厚、胶原含量明显增加。结论生理剂量睾酮可以影响雄兔血hs-CRP、MMP-9、HO-1、APN水平,并能调节动脉粥样硬化斑块进展与斑块的稳定性。     

人心脏型脂肪酸结合蛋白快速检测试剂盒的临床验证性研究

目的评价H-FABP快速检测试剂盒对急性心肌梗死(AMI)的早期诊断效果。方法比较H-FABP、CK、CK-MB和cTnT四种心肌标志物在AMI发作后6 h内的敏感性、准确性和时效性;比较H-FABP快速检测试剂盒对AMI患者和非AMI患者诊断的特异性。结果 H-FABP快速检测试剂盒的检测结果与临床诊断结果符合率为100%;在AMI发作后6 h内,H-FABP的敏感性和准确性优于CK、CK-MB,与cTnT相当。8例肾衰竭患者100%显示阳性,心源性疾病中主动脉关闭不全有1例(2.44%),房间隔缺损有2例(4.88%)显示阳性。结论 AMI发作后6 h内,H-FABP快速检测试剂盒对其具有较好的诊断价值。