人睫状神经营养因子的原核表达,纯化及其生物效应

人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）克隆入ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α菌株中表达，重组蛋白以包含体的形式存在，表达量为菌体总蛋白的５０％左右。经比较发现用２ｍｏｌ／Ｌ脲洗涤包含体可溶解大量可溶性细菌蛋白，且包含体损失较小。在高浓度变性剂条件下进行ｓｅｐｈａｒｃｙｌＳ－２００凝胶过滤，解决了纯化中ｈＣＮＴＦ易聚合的问题，在低浓度变性剂条件下进行ＤＥＡＥ离子交换，有利于蛋白活性的保持。经两步纯化后得到均一性ｈＣＮＴＦ，纯度达９５％以上。在自然状态下使ｈＣＮＴＦ复性。纯化复性后的ｈＣＮＴＦ对无血清培养的鸡胚背根节神经元和脊髓腹角运动神经元有明显的维持存活和促进生长发育的生物效应。     

低氧与神经干细胞

由于氧在能量代谢和内环境稳定中起重要调节作用,所以地球上绝大多数生命都离不开氧（YunZhong,2002）。作为重要的生理病理调节因素,氧浓度改变的影响可以贯穿整个生命过程：从胚胎发育到成体正常功能的维持,多种病变,衰老退变等。NSCs不仅存在于发育中的哺乳动物中枢神经系统中,而且也存在于几乎所有成年哺乳动物,包括人类的神经系统中。     

一种新的成年大鼠成肌细胞体外批量扩增培养方法

目的：建立快速高效的成年大鼠成肌细胞分离、体外批量扩增培养的实验方法。方法：通过混合酶一步消化法从少量成年骨骼肌样品中分离成肌细胞;采用差速贴壁筛选法纯化分离并批量扩增成肌细胞。结果：混合酶一步消化法需要的时间为2.1＋0.52h,较之于传统方法所需要的6.8＋0.67h,分离细胞所需时间显著缩短（P〈0.01）;采用差速贴壁筛选法纯化分离的成肌细胞myf5／desmin阳性率〉97％,同传统分离扩增方法相比,体外批量扩增培养的这些成肌细胞具有典型的成肌细胞生长特性,在生长液中具有更好的增殖潜能,而在分化液中分化为肌管的特性无显著性差异（P〉0.05）。结论：通过采用新建立的成年成肌细胞分离培养和批量扩增的方法,能够快速高效地获取高纯度的成肌细胞。     

阿尔茨海默病核酸疫苗的构建及诱导体液免疫反应的初步研究

近年,内源性蛋白主动免疫预防和治疗阿尔茨海默病(AD)的策略成为AD研究领域的热点,并获得迅猛发展。构建了以β-片层结构的淀粉样蛋白(AB)及其可溶性与病理性突变体为抗原基因的DNA疫苗用于免疫小鼠,经过对免疫方案的探索和调整,结果能够打破其自身耐受,在外周血中诱发出较高滴度的抗-AB抗体。初步探讨了诱导体液免疫学效应的规律。并在原代培养的海马神经元AB毒性模型中验证了免疫后血清的生物学活性。     

低位胆道恶性梗阻性黄疸术前胆红素异常的处理策略探讨(附134例报告)

目的:探讨低位胆道恶性梗阻性黄疸患者术前胆红素异常的处理策略,以提高该类患者的临床疗效。方法:回顾性分析西京医院肝胆外科2008年1月1日-2017年12月31日收治的符合研究条件的134例低位胆道恶性梗阻性黄疸(术前总胆红素≥171μmol/L)患者,按胆红素水平分为中、重度黄疸组,分析和比较两组术前黄疸的处理方法、术后肝功能、并发症情况等。结果:两组患者胆道引流后总胆红素水平均明显低于引流前,而肝功能Child-Pugh分级比较差异均无统计学意义(P0.05);两组行术前胆道引流患者与未行胆道引流患者的围手术期情况比较均无统计学差异(P0.05);两组行术前胆道引流患者与未行胆道引流患者的手术并发症的发生情况比较均无统计学差异(P0.05)。结论:对于低位胆道恶性梗阻性黄疸患者,无论中度黄疸还是重度黄疸,原则上术前不必行胆道引流。对于伴有脏器功能不全、急性炎症或其他暂不宜手术的患者,可先行胆道引流处理,限期手术。若行术前胆道引流,采用PTCD方式,更为简单安全有效。     

Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及荧光共定位研究

目的：观察脑信号蛋白Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及两者的荧光共定位情况,为明确Sema4C和GIPC在亚细胞水平的相互作用提供佐证。方法：将Sema4C的基因编码区全长、胞外段和胞内段分别构建到pEGFPNl和pEGFPCI表达载体中,将GIPC编码区基因构建到pDsRed-C1表达载体中,分别转染HEK293细胞,观察亚细胞定位;将pEGFPNl-Sema4C和pDsRed-GIPC分别共转染HEl（293和COS7细胞,观察两者的荧光共定位情况。结果：酶切鉴定及测序结果表明重组载体构建正确,Sema4C蛋白全长和胞外段呈跨膜分布,而胞内段在全细胞中呈弥散样分布;GIPC在胞浆内呈斑块状聚集分布;pEGFPNl-Sema4C和pDsRed-GIPC存在荧光共定位区域。结论：Sema4C主要在胞膜和胞浆内表达,GIPC主要在胞浆内呈斑块样聚集分布;Sema4C和GIPC之间存在荧光共定位。     

如何提高田菁胶的粘度

田菁胶是我国六十年代末至七十年代初新发现的一种重要工业原料。它广泛用作石油工业(提高石油产量)的压裂剂,选矿工业(提高选矿回收率和品位)的絮凝剂,采矿浆状炸药(增强防水炸药抗水性能)的胶凝剂以及纺织印染工业代粮浆纱浆布、上浆印花……等,特别是作为石油工业(水基冻胶压裂液的压裂剂,具有粘度高,携砂能力强,摩阻低,滤失量低等特点,从而在油井     

神经再生过程中睫状神经营养因子基因表达的变化

神经再生过程中睫状神经营养因子基因表达的变化甘思德,杜方勇,范明（军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０）根据现有资料,在众多的神经因子（ｎｅｕｒｏｋｉｎｅｓ）中,睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）与神经营养素家族（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎｅｓ）完全...     

急性低氧对大鼠脑组织钙调素含量及其依赖性蛋白激酶Ⅱ活性的影响

本实验观察了活性钙调素（ＣａＭ）含量和ＣａＭ依赖性蛋白激酶Ⅱ（ＣａＭｋｉｎａｓｅⅡ）活性在急性低氧（模拟海拔７０００ｍ,５ｈ）和常氧对照大鼠脑子组织中的变化。用流式产胞仪（ＦＡＣＳ）所测两组动物脑皮层细胞的ＣａＭ,平均荧光强度分别为４０．０±４．９和４６．１±５．８,急性低氧组明显低于常氧对照组（Ｐ＜０．０５）;用同位素液闪计数法所测两组动物皮层脑匀浆提取液中ＣａＭｋｉｎａｓｅⅡ活性,分别为１８４．３±８．１和１９８．８±９．４ｐｍｏｌＰｉ·ｍｉｎ－１·ｍｇ－１ｐｒｏ,急性低氧组明显低于常氧对照组（Ｐ＜０．０１）。结果提示ＣａＭ和ＣａＭｋｉｎａｓｅⅡ对低氧较为敏感,急性低氧时中枢神经细胞结构或功能的紊乱可能与活性ＣａＭ的含量减少和ＣａＭｋｉｎａｓｅⅡ活性能下降有关。     

人睫状神经营养因子的基因克隆与高效表达

人睫状神经营养因子的基因克隆与高效表达范明,杜方勇,咸海清,刘淑红,甘思德（军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０）睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＣＮＴＦ）以最早发现于鸡睫状神经节而命名,是目前已知的神经...