微波快速石蜡切片技术及其在肾穿刺活检中的应用

肾穿刺活检技术推动了肾脏病理的迅速发展,使肾脏病理学整体知识不断更新和提高,为临床诊断和治疗提供了大量的依据.由于肾脏活检组织标本小、切片薄,在固定、脱水、透明、浸蜡、切片及染色等方面均与常规石蜡切片有所不同,其技术要求较高.肾穿刺石蜡切片时间较长,相对制约了急性肾功能衰竭、急进性肾炎、肾移植急性排斥反应等急重症的快速诊断.     

用线性梯度平板准确测定药物敏感性和分离抗药性菌株

菌群在药物的最低抑菌浓度附近的动力学过程是抗生素药理学研究的核心问题.建立一种能确定精确的MIC且又能准确分离抗药性菌株的方法,是目前临床对药敏实验新的要求.根据Fick扩散定律制备了线性梯度平板：将15mL含适当浓度恩诺沙星的琼脂培养基在9cm培养皿中倾斜凝固,刚好覆盖整个平板底面,然后水平放置,再在其上层加入同样体积的无药琼脂培养基,凝固12h后,药物浓度达到扩散平衡而呈均匀连续线性梯度.通过实测验证药物浓度在平板表面呈线性梯度分布.将待检E.coli菌群均匀涂布在梯度平板上,培养12h后,随恩诺沙星浓度提高依次形成连续密集小菌落区和离散大菌落区,根据两区域的分界线可以确定菌群自然形成的真实的MIC,与常规药敏实验方法测定结果一致.大菌落重新涂布高梯度平板,分界线显著上升,并检测出抗药性基因突变,表明该方法很容易筛选出菌群中的抗药性菌株.梯度平板可以方便地呈现整个菌群在MIC附近的动力学过程和遗传生理变化,并预警该抗生素使用后可能出现的抗药性,从而指导临床抗菌药物的选择和使用.     

Fascin蛋白在软骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的：分析Fascin蛋白在软骨肉瘤组织中的表达及其与软骨肉瘤临床病理因素的关系。方法：应用免疫组化EnlivionTM法分别检测和比较70例软骨肉瘤和20例软骨瘤中Fascin蛋白的表达情况。结果：（1）Fascin在软骨肉瘤组和软骨瘤组中的阳性表达率分别为64．29％和5．00％,两组相比差异有统计学意义（X2=21．88,P=0．00）;（2）Fascin蛋白的表达与患者的年龄、性别无显著相关性（Xk0．37,P=0．54;X2=-0．29,P=0．59）;Fascin蛋白在肺转移组中的表达为76．32％,显著高于无肺转移组（50．00％）,两组相比差异有统计学意义（XZ=5．24,P=0．02）;Fascin蛋白在间叶性软骨肉瘤、透明细胞软骨肉瘤的中表达分别与普通型软骨肉瘤相比,无统计学意义（P〉0．05）,但去分化软骨肉瘤与普通型软骨肉瘤相比,有统计学意义（P〈0．05）;Fascin在普通型软骨肉瘤的I-III级中的阳性表达率分别为11．1l％、61．90％、75．00％,三者之间的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：Fascin参与了软骨肉瘤恶变的过程,其高表达与软骨肉瘤的分化和转移有关。     

小鼠细胞因子相关基因表达检测寡核苷酸芯片的制备及分析

生物芯片技术用于基因表达谱研究是近年来发展起来的一项新技术 ,该方法本质上是基于对一玻璃片或膜表面上固定的ｃＤＮＡ或寡核苷酸的分子杂交 ,这一新技术可同时测定成千上万个基因的作用方式 ,几周获得的信息用其它方法可能要几年才能得到 ,是以定量方式同时监测大量基因相对表达的强有力的新方法[1 ,2 ] 。国内外目前主要采用ｃＤＮＡ芯片进行基因表达的检测 ,芯片制备所用的ＤＮＡ探针一般为已知基因ｃＤＮＡ克隆的ＰＣＲ扩增产物或ＥＳＴ的扩增产物[3～ 8] 。对基因的表达检测来说 ,ｃＤＮＡ芯片技术是一条非常适用的检测方法 ,但在有…     

CD15抗原高表达的免疫组织化学检测方法探讨

ＣＤ１５抗原是位于细胞表面的一种糖蛋白。越来越多的研究证实,ＣＤ１５表达与许多恶性肿瘤的发生发展、侵袭转移密切相关,被视为肿瘤预后不良的一种标志。常规免疫组织化学方法检测ＣＤ１５抗原表达,常因非特异性背景染色、阳性产物表达甚弱,影响结果正确判断。对此,我们在提高ＣＤ１５抗原检测方法上作了探讨,取得良好效果。材料和方法１．材料：标本取１０％甲醛固定的胃癌、肠癌、乳腺癌、肺癌、肾癌、胆囊癌、前列腺癌及子宫内膜癌等各种肿瘤组织,常规脱水处理及石蜡切片厚４μｍ。２．试剂与器械：鼠抗ＣＤ１５单克隆抗体和Ｓ…     

胃癌组织中溶菌酶的免疫组织化学及其与浸润转移的关系

应用微波－ＳＰ法免疫组化技术,检测了９７例胃癌和３０例手术胃切端正常胃粘膜组织中溶菌酶（ＬＺＭ）表达状况。其阳性率分别为８５．６％和６６．７％,前者显著高于后者（Ｐ＜０．０５）。ＬＺＭ在胃癌中的表达阳性率比较,差分化癌和粘液细胞癌均显著高于分化型腺癌（Ｐ值均＜０．０５）,有淋巴结转移性胃癌显著高于无淋巴结转移者（Ｐ＜０．００５）。在一组原发部位和淋巴结转移性胃癌配对标本中,ＬＺＭ表达无明显差异性,提示胃癌ＬＺＭ活性增高发生在淋巴结转移之前。结果表明,ＬＺＭ表达与胃癌细胞的分化程度及生物学行为密切相关     

高频彩色多普勒超声对乳腺癌腋窝淋巴结性质的鉴别价值

目的:研究高频彩色多普勒超声对乳腺癌腋窝良性淋巴结与腋窝转移性淋巴结的鉴别价值。方法:选择2015年2月~2016年6月在我院进行诊治的乳腺癌患者150例,应用高频二维超声结合彩色多普勒血流显像技术,观察腋窝肿大淋巴结的声像图及血流情况。结果:经二维超声发现,乳腺癌腋窝良性淋巴结的皮质多向心增厚(68.93%)、长短径比L/S多2.0(70.58%)、多不融合(93.14%)、多无钙化斑(97.06%);腋窝转移性淋巴结的皮质多偏心增厚(68.48%)、长短径比L/S多2.0(69.57%)、多融合(68.48%)、多有钙化斑(77.17%);两者相比有明显差异(P0.05);经彩色多普勒血流显像技术发现,乳腺癌腋窝良性淋巴结的血流信号分布多呈门型(63.17%),血流丰富程度多为Ⅱ级(54.35%);腋窝转移性淋巴结的血流信号分布多呈周边型(68.93%),血流丰富程度多为Ⅲ级(72.83%);两者相比有明显差异(P0.05)。结论:乳腺癌腋窝良性淋巴结与腋窝转移性淋巴结在内部回声、形态、血流分布特点等方面有显著的差异,高频彩色多普勒超声对乳腺癌腋窝良性淋巴结与腋窝转移性淋巴结具有较高的鉴别价值。     

浓缩型DAB试剂盒的应用体会

DAB（Diaminobenzidine,3,3-二氨基联苯胺）显色是免疫组织化学染色技术中的关键步骤之一,其显色液的配制方法和浓度十分重要。常规的DAB显色液是临用时新鲜配制,过滤后加适量H2O2在染色缸中进行显色反应,既烦琐又浪费显色液,而且增加污染机会。近年来,一些生物试剂公司销售的浓缩型DAB试剂盒,给免疫组化工作带来了极大的方便,促进了免疫组化技术上的广泛开展和应用,但因DAB的浓度过高和购买时间等诸多因素而使显色结果不尽理想。对此,我们对浓缩型DAB显色液的浓度进行了部分调整,取得了良好效果,现介绍如下：     

失巢凋亡及其在肿瘤侵袭、转移中的调控

作为肿瘤转移的屏障,细胞与邻近细胞或者细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)失去联系后将遭受凋亡,这种细胞死亡方式称为"失巢凋亡"。正常上皮细胞或不具备转移性质的实体瘤细胞从原位脱落进入血液循环后就会引发失巢凋亡,失巢凋亡的意义在于防止这些脱落的细胞种植并生长于其他不适宜的地方。而肿瘤细胞,尤其是一些容易发生远距离转移的恶性肿瘤细胞,具有极强的抗失巢凋亡特性,便于转移侵袭。研究发现肿瘤细胞能通过多种方式抵抗失巢凋亡,比如细胞自分泌生长因子或者由邻近细胞旁分泌,激活促存活信号通路;细胞改变整合蛋白的表达模式,使之能够接收新环境的生存信号;活性氧(Reactive oxygen species,ROS)通过不依赖配体的方式激活生长因子受体,从而逃逸凋亡;上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)激活等。这些方式导致细胞存活信号激活和凋亡途径抑制,最终使肿瘤细胞抗失巢凋亡,促进转移。文章综述了当前研究的肿瘤转移的关键机制,这些策略也将成为肿瘤治疗的重要靶点。     

免疫过氧化物酶显色方法的改进及应用

免疫过氧化物酶显色方法的改进及应用熊正文苏红胡海霞李春光冯骥良张家口解放军二五一医院病理科０７５０００免疫组化染色技术以其敏感性高,特异性强,方法步骤统一等优点能将形态、机能和代谢密切结合起来,已广泛用于临床病理诊断和研究之中。目前较常用的ＰＡＰ、Ａ...