利用抑制差减杂交技术分离三角褐指藻在缺氮条件下上调表达的基因

为了阐明硅藻利用氮源的分子机制, 以三角褐指藻为材料, 利用抑制差减杂交技术, 分离鉴定了16个在缺氮诱导条件下上调表达的基因片段。其中, 与已知功能基因具有较高相似性的有7种, 都是跟氮源的吸收利用相关的。Northern blotting验证其中5个基因, 包括硝酸盐转运蛋白基因、铁氧化还原蛋白亚硝酸还原酶基因、铵盐转运蛋白基因、结合ATP盒的转运蛋白基因和嘌呤透过酶基因, 在缺氮诱导条件下转录水平有明显上调。     

CO2对微拟球藻(Nannochloropsis sp.)利用有机碳和光合作用的影响

CO2浓度提高时,微拟球藻吸收醋酸钠的速率增加2倍。混养生长的藻细胞最大光合作用速率、光合作用效率、无机碳半饱和常数和无机碳饱和的光合作用速率均显著低于光自养条件下生长的。     

测定浮游植物中色素的高效液相色谱与二极管阵列分光光度计联用的方法

建立了高效液相色谱与二极管阵列分光光度计联用分析浮游植物中色素的方法.采用90%的丙酮提取藻类中的类胡萝卜素和叶绿素后在反相C18柱上分离,流动相选用甲醇/醋酸铵/丙酮,流速为2.0 mL*min-1.用可见光检测器检测,波长为440 nm.在线的二极管阵列检测器对色素峰的扫描(400～700 nm)得到各色素峰的吸收光谱的结果显示,保留时间相同的色素峰,吸收光谱可能不同.根据色素峰吸收的光谱特性确定色素的种类,可以避免色素峰保留时间相同而造成的判断误差,从而提高了分辨的准确性.     

利用重测序技术获取转基因植物T-DNA插入位点

T-DNA插入位点的获得对于植物功能基因组学研究及转基因植物的筛选鉴定非常重要,但是目前常用的方法如反向PCR、半随机引物PCR等,除了操作复杂、消耗时间长外,特异性较差,效率也很低。本研究利用全基因组重测序技术,将3份转基因材料基因组DNA打包后进行重测序,利用转基因载体序列作为参考序列进行比对分析,得到4个T-DNA插入位点。对3份转基因材料进行PCR和Southern blot验证分析,成功获得了3份转基因材料全部T-DNA插入位点,其中1份材料为2拷贝插入。本文利用重测序技术建立了一种简单、可靠、高效的获取转基因植物T-DNA插入位点的方法,以期为植物功能基因组学及转基因研究奠定基础。     

利用饵料微藻表达抗菌肽及其初步应用

为了解抗菌肽在饵料微藻中表达后的抗菌特性,构建海洋微拟球藻(Nannochloropsis oceanica)、湖泊微拟球藻(N.limnetica)和三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)的抗菌肽(源自虹鳟,Cath-1a)表达质粒,分别转化相应的微藻,检测转化子中抗菌肽的表达量和体外抑菌效果,将藻株作为鱼饲料添加剂喂食斑马鱼,初步分析了抗菌肽及藻体自身的岩藻黄素和多不饱和脂肪酸对鱼免疫系统的影响。结果表明,外源抗菌肽在3种微藻中均可以成功表达,体外抑菌试验表明,仅三角褐指藻对水产领域常见致病菌爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)有一定的抑菌效果,然而抗菌肽的表达并未使3种藻株的体外抑菌性增加。添加藻粉对斑马鱼的生长无明显影响,通过检测鱼体肝脏中与抗氧化和免疫相关基因的表达水平及丙二醛的含量,表明添加藻粉可增强斑马鱼的抗氧化和抗炎症能力,表达抗菌肽(PtC组)能进一步提高斑马鱼的免疫力。另外,添加Pt6(富含岩藻黄素)藻粉组比添加PtC的抗炎效果更显著,表明三角褐指藻中的岩藻黄素和二十碳五烯酸对增强鱼的抗病能力具有潜在作用。     

产蜡酯聚球藻PCC 7002的构建

蜡酯是由含C16以上偶碳的高级脂肪酸与高级脂肪醇酯化形成的中性酯,是一种重要的经济油脂,被广泛应用于纺织、医药、化妆品和食品等行业.液态不饱和蜡酯还能作为航空航天工业、人工心脏、精密仪器仪表和特种机械等高科技领域专用的润滑剂[1,2].     

氯化铁和聚丙烯酰胺絮凝剂WT652对三角褐指藻的絮凝作用

生物柴油是清洁的可再生能源,是优质的石油柴油 代用品,但生物柴油产业受原料供给和成本的制约.硅藻富含油(占细胞干重40%-60%)~[1],且短链脂肪酸(C14和 C16)占细胞中总脂肪酸的67%-70%左右~[2,3].三角褐指 藻作为硅藻研究的模式种类之一,细胞壁含硅较少,利于破碎,可作为优良的生物柴油生产原料.     

不同氮源及CO_2浓度下湖泊微拟球藻的生长及产油特性分析

<正>工业生产排放的各种废气与污水污染人类赖以生存的环境。化石燃料燃烧除排放出大量CO2外,还释放出含有粉尘、SO[x和NOx等直接危害人类健康的有毒成分1]。其中NO]x与水结合后最终会转化成硝酸盐或亚硝酸盐等[2,导致污水中的含氮化合物氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮和有机氮的含量通常偏高。如何有效去除污水中的氮是防治水体污染最关键的步骤之一,而利用微藻培养去除水体中的氮源是目前研究的热点。尽管生物燃料生产的成本远     

铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiA的自身相互作用研究

蓝藻虽为原核生物,但它也和真核生物一样具有生物 钟,它的固氮作用、光合作用、氨基酸吸收、细胞分裂以及基 因表达等生理代谢过程都受到生物钟的调控,具有昼夜节律 性。虽然蓝藻生物钟和真核生物钟一样,都以近24h的周期 运行,都具有温度补偿效应,光、温等环境因素都能重置生物 钟的时相,但组成蓝藻生物钟的钟蛋白与真核生物钟蛋白间 不具有任何同源性,蓝藻生物钟的计时机制也与真核生物钟 存在差异。蓝藻钟基因为一个基因簇kai,由三个基因 kaiA、kaiB、kaiC以单一拷贝成簇排列,Kai蛋白组成蓝藻生 物钟的核心即中央振荡器,其中KaiC蛋白的磷酸化状态是 中央振荡器产生周期性震荡的关键,它决定中央振荡器的时 相,而KaiC的磷酸化状态则受到KaiA和KaiB的调节。KaiA 是接受和整合环境信息的钟蛋白,具有N-端和C-端两个结 构域,N-端缺乏保守天冬氨酰残基的伪接受域能通过与输入 途径的某种蛋白(目前未知)发生相互作用而感受环境信号