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1.
定点整合抗虫基因到油菜叶绿体基因组并获得转基因植株   总被引:16,自引:1,他引:15  
以基因枪法进行了油菜叶绿体基因组的定点转化,载体pNRAB携带抗壮观霉素的筛选标记基因aadA和抗虫基因cry1Aα10,基因的两侧被添加了可用于同源重组的叶绿体DNA序列,基因枪轰击过的油菜子叶柄经植株再生和壮观霉素筛选,获得了36株抗性植株,PCR检测和Southern杂交显示,其中4株的叶绿体基因组已被转化,外源基因已被定点整合进叶绿体基因组的rps7和ndhB基因之间。用转基因植株的叶片饲喂二龄小菜蛾,1周后幼虫死亡率达33%-47%,存活幼虫的生长明显减慢,转基因油菜的叶片受害较轻。  相似文献   
2.
陈俊达  姚志诚  石锐  高惠  刘振生 《生态学报》2022,42(10):4209-4216
贺兰山因其拥有独特的植物垂直分布带而十分适宜啮齿动物生存,但自保护区生态恢复以来并未见有研究评价啮齿动物在贺兰山的生境适宜性,使得其分布现状未知。使用GIS技术和MAXENT模型对内蒙古贺兰山国家级自然保护区6种主要啮齿动物进行生境适宜性状况评价及预测,探究啮齿动物在贺兰山的分布现状。结果表明:影响6种啮齿动物的主要环境因子为海拔、坡度和距矿区距离,海拔越高、坡度越大及距矿区距离越近均使啮齿动物生存适宜性降低;两两鼠种生境适宜面积叠加发现,大林姬鼠和阿拉善黄鼠适宜生境重叠面积最大(261.37 km~2),短尾仓鼠和子午沙鼠的适宜生境重叠面积最小(19.00 km~2);6种主要鼠种均适宜的生境面积交集仅有17.14 km~2,占贺兰山总面积的0.47%,6种主要鼠种均不适宜的生境面积有2985.23 km~2,占贺兰山总面积的81.21%。研究表明,啮齿动物栖息地距矿区距离仍是影响其适宜生境的重要因素之一,建议相关部门加强对废弃矿区采取措施,改善保护区啮齿动物生境质量。  相似文献   
3.
4.
以普通小麦“中国春”、三个“中国春”具杀配子染色体的二体异附加系及作为三个杀配子基因种源的三种山羊草为材料,用46个10nt随机引物对基因组DNA进行扩增,以筛选杀配子染色体特有的RAPD标记,并检测普遍小麦与三种山羊草之间的RAPD多态性。结果表明:46个引物中有35个扩增出比较稳定的RAPD产物。其中引物OPF-14和OPQ-09分别在普通小麦“中国春”-山羊草附加系间扩增出多态性产物;因而认定OPF-141300与OPQ-09800、OPF-141160与OPQ-09770、OPF-141280分别为三个杀配子染色体3C、Gcl和2C的特异性RAPD标记,可以用于快速跟踪鉴定3C、Gcl、2C杀配子染色体。对三种山羊草与普通小麦“中国春”进行了基因组DNA多态性分析,结果表明,35个引物在“中国春”中共扩增出162个产物,在离果山羊草、拟斯卑尔脱山羊草、柱穗山羊草中分别扩增出140、154和155个产物;三种山羊草与“中国春”之间的共有扩增产物分别为69、87、96个,占总扩增产物的29.61%、37.70%和43.44%。上述结果,从分子水平揭示了山羊草属与普通小麦之间存在着较近的亲缘关系。  相似文献   
5.
聚丙烯酰胺凝胶中DNA的银染方法   总被引:43,自引:0,他引:43  
石锐 《生物技术》1998,8(5):46-48
聚丙烯酰胶凝胶电泳具有极高的分辨率,用于DNA分析时,长度仅差0.2%(即对500bp样品中的1bp长度差异)也可以凝胶上分开,因此被广泛用于对DNA需要进行高分辨率分析的程序之中,直到目前为止它仍是DNA测序工作中DNA片段长度检测的主要手段。由于聚丙烯酰胺凝胶对荧光染料溴化乙锭的荧光有熄灭作用,EB染色法很难检测到少于10纳克的DNA条带,因此在传统的DNA测序工作中经常采用放射性同位素自显影方法来检测DNA带的位置,不但增加了实验成本,而且使操作本来就较为繁琐的聚丙烯酸胶凝胶电泳变得更加麻烦;利用荧光标记的方法虽然…  相似文献   
6.
黑麦1R染色体的显微分离、体外扩增及扩增产物的鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
借助Leitz显微操作器 ,在国产倒置显微镜下 ( 40 0× )用玻璃针对处于有丝分裂中期的黑麦根尖细胞中的 1R染色体成功地进行了分离。分离出来的 1R染色体转入 0 .5ml的Eppendorf管中 ,用蛋白酶K处理 ,把DNA释放出来 ;经Sau3A酶切 ,再与人工合成的Sau3A连接头连接 ;以连接头的一条链的核苷酸顺序片段为引物对DNA酶切片段进行了PCR扩增。琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物的长度大约为 30 0~ 1 0 0 0bp。以生物素分别标记的黑麦总体DNA和小麦rDNA为探针进行斑点杂交 ,结果表明PCR扩增产物确实来源于黑麦的 1R染色体DNA。这个方法为构建黑麦 1R染色体亚基因组文库和筛选 1R染色体特异性探针奠定了基础。  相似文献   
7.
15个不同细胞质“中国春”小麦与八倍体小偃麦杂交 ,杂种F1减数分裂的染色体行为表明 :普通小麦与天蓝偃麦草的F或E组染色体之间存在着部分同源关系 ;D2 型细胞质促进部分同源染色体配对、但却抑制同源染色体配对 ;Sv 型细胞质对同源染色体或部分同源染色体的配对均有抑制作用 ;G型细胞质促进同源染色体配对。1 5个不同细胞质“中国春”小麦与六倍体小偃麦杂交 ,F1结实率很低 ,减数分裂中期的染色体行为混乱 ,单价体过多 ,或许意味着在天蓝偃麦草 (Elytrigiain termedium)与长穗偃麦草 (E .elongatum)的E组染色体之间存在着很大差别。随着回交代数的增加 ,选出G型、D2 型、Mt 型、Mu 型等细胞质雄性不育的八倍体小偃麦品系 ,其中D2 型细胞质八倍体小偃麦具有光周期敏感性雄性不育的特征 ;G型细胞质“远中 3”育性正常 ,表明八倍体小偃麦“远中 3”的E组染色体中存在G型胞质的育性恢复基因。  相似文献   
8.
9.
1 Source ThesequenceoftheatpBgenewasdeter minedfromPCRproductofchloroplastgenomicDNAofPopulustomentosa .2 Nameanddescription ThecodonsequenceoftheatpBgeneofPopulustomentosais 1 497nucleotidelongthatencodes 498aminoacidsofATPasebetasubunitofchloroplast.ItsDNA…  相似文献   
10.
本文利用普通小麦品系“中国春”(对照 )、中国春 ph1b突变体分别与八倍体小黑麦、六倍体小黑麦杂交 ,杂种F1的减数分裂前期Ⅰ染色体行为表现异常 ,中期Ⅰ出现较多的单价体、棒状二价体和多价体 ,在后期和末期出现落后染色体、染色体片断和微核。原因是 ph1b基因的存在造成染色体联会机制紊乱 ,致使一些部分同源染色体配对并发生互换 ,有可能在以后的世代产生染色体易位与基因重组。  相似文献   
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