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1.
抗体融合蛋白是新一代抗肿瘤抗体药物.CD20在约95%的B细胞非霍奇金淋巴瘤表面过度表达,是治疗B细胞淋巴瘤的理想靶点.力达霉素(LDM)是强效烯二炔抗肿瘤抗生素,目前已进入Ⅱ期临床阶段.采用DNA重组技术,利用大肠杆菌表达体系,制备抗CD20单链抗体与力达霉素辅基蛋白LDP的基因工程融合蛋白scFv-LDP.经纯化和...  相似文献   
2.
It was documented that type IV collagenase with two subtypes of 72 ku/MMP-2 and 92 ku/MMP-9 plays an important role in tumor invasion and metastasis. The endoplasmic reticulum (ER)- retained, single chain Fv antibody fragment (scFv) was used to inhibit the function of type IV collagenase. For expression in mammalian cells, the assembled scFv M97 gene with ER retention signal encoding 6 additional amino acids (SEKDEL) was reamplified by PCR. The amplified fragments were cloned into the pcDNA3.1 vector. The resulting plasmid was sequenced and then introduced into PG cells, a highly metastatic human lung cancer cell line, by lipofectAMINE method. The result of intrabody gene therapy showed that type IV collegenase expression was down regulated significantly as measured by ELISA. The biological behavior of PG cell, such as the ability of in vitro invasion through Matrigel, colony formation on soft agar, was also inhibited by scFv M97 transfection. Animal experiments in a xenograft model of human lung cancer  相似文献   
3.
胞内抗体技术及医学应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
胞内抗体技术是近年来随抗体工程技术发展起来的一项新型基因治疗方法.它将单链抗体表达于非淋巴细胞内,并使之定向分布于细胞核、细胞浆或内质网等部位,特异性阻断、干扰分布于该部位的大分子物质生物活性或加工分泌过程.实验证明该技术能抑制生长因子受体的表达,灭活原癌基因蛋白,抑制病毒复制.在生物科学及医学研究中具有很大应用潜力.  相似文献   
4.
Ⅳ型胶原酶与肿瘤的侵袭、转移以及新血管生成等过程密切相关. 以Ⅳ型胶原酶为分子靶点, 利用小鼠抗Ⅳ型胶原酶单抗构建了小型化的Fab'片段与高效抗肿瘤抗生素力达霉素(LDM)的免疫偶联物 (Fab'-LDM). 偶联物的分子量约为65 kD, 偶联分子比为1︰1. 以ELISA方法检测, Fab'-LDM偶联物保留了单抗Fab′片段对肝癌22(H22)细胞的免疫结合活性; 以MTT法测定, Fab'-LDM偶联物对肝癌22细胞显示出更强的细胞毒性. 动物体内试验观察对小鼠移植性肝癌22的疗效, 小鼠皮下接种肿瘤, 24 h后开始给药(静脉注射2次, 分别在接种后1和8天), Fab'-LDM偶联物0.025, 0.05和0.10 mg/kg剂量组的抑瘤率分别为76.7%, 93.3%和94.8%, 而游离LDM 0.05 mg/kg的抑瘤率为76.1%; 另一批实验于接种肿瘤96 h后开始给药(静脉注射2次, 分别在接种后4和11天), Fab'-LDM偶联物0.025和0.05 mg/kg组的抑瘤率分别为74.2%和80.9%, 而LDM 0.05 mg/kg组的抑瘤率为60.5%. Fab'-LDM偶联物0.05 mg/kg可显著延长荷瘤小鼠的生存时间, 与同等剂量的游离LDM相比, 延长生存时间的效果更强(P < 0.05). 以上结果表明, 以Ⅳ型胶原酶为靶点的小型化单抗免疫偶联物在肿瘤的实验治疗中有显著的疗效.  相似文献   
5.
以Ⅳ型胶原酶为靶点的细胞内表达单链抗体的抗肿瘤作用   总被引:5,自引:0,他引:5  
Ⅳ型胶原酶(包括MMP-2和MMP-9)与肿瘤的侵袭转移和恶性进展密切相关. 通过构建可在真核细胞内质网表达抗Ⅳ型胶原酶scFv M97抗体基因的真核表达载体, 应用脂质体LipofectAMINE法对人高转移性肺巨细胞癌PG细胞系进行基因治疗. 研究结果表明, 细胞内表达scFv M97对PG细胞Ⅳ型胶原酶分泌、PG细胞生长及体外侵袭能力具有显著的抑制作用, 并能明显降低PG细胞裸鼠体内成瘤性, 延长动物存活时间. 以上结果提示胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌这一关键步骤从根本上抑制Ⅳ型胶原酶的活性, 在肿瘤基因治疗中具有重要的应用前景.  相似文献   
6.
7.
用电子显微镜观察争光霉素A_5和A_2对小鼠肺的损害作用。除观察形态变化外,还使用病变毛细管计数的方法比较了A_5和A_2引起肺病变的轻重程度。结果表明,A_5引起的肺病变明显的较A_2为轻。目前,国外临床使用的博莱霉素是以A_2为主要组分的复合物,肺毒性是它的主要毒副作用。A(?)的肺病变较A_2轻,这一结果提示了争光霉素A_5临床肺毒性较低的可能性,值得深入研究。  相似文献   
8.
Ⅳ型胶原酶与肿瘤的侵袭、转移及新血管生成等过程密切相关. 单域抗体作为肿瘤靶向性载体有许多传统抗体所无法比拟的优势. 以Ⅳ型胶原酶为靶点, 以单域抗体为载体, 以强效烯二炔抗肿瘤抗生素力达霉素(LDM)为“弹头”, 采用DNA 重组与分子组装相结合的新方法, 制备抗Ⅳ型胶原酶单抗3G11的轻链可变区单域抗体VL与LDM的基因工程强化融合蛋白VL-LDP-AE. MTT结果表明, VL-LDP-AE对体外培养的肿瘤细胞有强烈杀伤作用, 对HT-1080细胞和KB细胞的IC50值分别为8.55×10-12和1.70×10-11 mol/L. VL-LDP-AE还可抑制鸡胚尿囊膜新生血管的生成并可破坏人脐静脉内皮细胞(HUVEC)形成内皮小管. 动物实验观察对小鼠移植性肝癌22(H22)的疗效. 皮下接种肿瘤, 72 h后开始给药(分别在接种后第3和第10天静脉注射2次). 以最大耐受剂量进行比较, VL-LDP-AE 0.375 mg/kg的抑瘤率为89.5%, LDM 0.05 mg/kg组的抑瘤率为69.9%, 丝裂霉素(MMC)1 mg/kg组的抑瘤率为35%. VL-LDP-AE的分子量为25.4 kD, 远小于其他形式的抗体药物分子. 作为小型、高效的抗体药物, VL-LDP-AE在肿瘤靶向治疗中有良好应用前景. 此外, 其独特的制备方法还可作为制备新型抗肿瘤抗体靶向药物的技术平台  相似文献   
9.
用电子显微镜观察争光霉素A_5和A_2对小鼠肺的损害作用。除观察形态变化外,还使用病变毛细管计数的方法比较了A_5和A_2引起肺病变的轻重程度。结果表明,A_5引起的肺病变明显的较A_2为轻。目前,国外临床使用的博莱霉素是以A_2为主要组分的复合物,肺毒性是它的主要毒副作用。A_5的肺病变较A_2轻,这一结果提示了争光霉素A_5临床肺毒性较低的可能性,值得深入研究。  相似文献   
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