用巢式PCR方法制备基因芯片的探针

制备出高纯度的探针,用于诊断基因芯片的打印。采用巢式PCR技术,M13作为外侧引物并自行设计内侧引物,扩增克隆在T载体上的基因片段。可制备出成分单一,上下游仅含19bp和20bp的短载体序列的探针,能使打印出的芯片得到较好的杂交效果。该法充分利用巢式PCR的优点,对制备探针的方法进行改进,且简便快速,能得到更高质量的探针,满足打印芯片的要求。     

霍乱弧菌的致病性与流行性研究进展

综述了近年来霍乱弧菌的致病性和流行性的研究进展,并讨论了流行性和致病性的关系.编码霍乱毒素CT的基因ctxAB并不是霍乱弧菌基因组自身的成分,而是CTXΦ噬菌体基因组的一部分.CTXΦ能特异性地感染并整合至霍乱弧菌的基因组,成为CTX原噬菌体;携带有CTX原噬菌体的霍乱弧菌在环境因素的诱导下,也能向外界分泌CTXΦ噬菌体.RS1基因元件与CTX基因元件在染色体位置上紧邻,它们在功能上也紧密相关,RS1元件能利用CTXΦ的基因形成一个丝状噬菌体RS1Φ,并能向细胞外分泌,进行水平传播;VPI来源于VPIΦ,VPIΦ能在霍乱弧菌的菌株之间传播;VPI是霍乱弧菌获得CTX基因元件的桥梁.最近,又发现了两个与霍乱大流行相关的两个基因区域,VSP-Ⅰ和VSP-Ⅱ.     

一种用于PCR模板制备的电泳产物简易回收方法

为了探索一种简便、有效而且能从琼脂糖凝胶中大量回收用于第2次PCR扩增的DNA电泳条带的方法,采用刀片切胶法和牙签插胶法从琼脂糖中回收DNA,并进行了两种方法的比较．结果显示牙签插胶法回收的DNA用作第2次PCR的模板,获得了清晰、稳定的PCR产物电泳条带,用该法成功地制备了一批DNA微阵列探针．由此可见牙签插胶法是一种简便、快速、有效的用于PCR模板的DNA琼脂糖凝胶回收法．     

2型登革病毒检测基因芯片的研制

利用长片断PCR扩增含几乎全长的2型登革病毒cDNA,酶切PCR扩增产物,通过建立2型登革病毒。DNA文库获取芯片探针用点样仪将探针制备成2型登革病毒检测基因芯片,杂交时采用限制性显示(Restriction Display RD)技术标记样品,Scan Array芯片扫描仪检测杂交信号．杂交结果显示,样品和2型登革病毒基因芯片杂交的敏感性强、特异性高．