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设计和合成特定寡核苷酸引物,TRIZOL提取日本血吸虫成虫RNA,RT-PCR法扩增日本血吸虫32kDa蛋白质(Sj32)基因编码序列,将扩增产物连接pGEM-T克隆载体,再亚克隆到真核表达载体pBKCMV中.结果RT-PCR法特异性扩增出Sj32编码基因片段,其大小约为1270bp,经双酶切、PCR鉴定表明所构建的质粒pGEM-Sj32和pBK-Sj32中含有目的基因.pBK-Sj32重组质粒的成功构建,为进一步表达Sj32及其在血吸虫病免疫诊断、免疫预防中的作用研究提供了条件. 相似文献
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以日本血吸虫成虫RNA为模板逆转录合成cDNA链,设计合成引物,用PCR法扩增谷胱甘肽转移酶(GST) 基因编码序列,将其克隆入pGEM—T载体,并进行初步鉴定。pGEM—T—GST克隆载体的成功构建,为进一步选择在不同表达系统中表达GST及其在血吸虫病免疫诊断、免疫预防中的作用研究提供了条件 相似文献
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