人脐带和骨髓间充质干细胞体外分离培养及生物学特性比较

目的体外分离培养、扩增人脐带间充质干细胞(h UC-MSC)和人骨髓间充质干细胞(h BM-MSC),并对其生物学特性进行比较。方法采用组织块贴壁法从足月胎儿脐带分离、纯化和培养h UC-MSC,健康成人骨髓肝素抗凝后,采用密度梯度离心法分离、纯化和培养h BM-MSC;用倒置显微镜观察两种细胞的形态及细胞生长增殖情况,流式细胞仪分析检测第3代细胞表面标志的表达,Von?Kossa染色及油红O染色检测分化潜能。结果镜下两种细胞均为贴壁生长,形态为均一的成纤维细胞样,取相同数量的细胞传代接种后,h UC-MSC的增殖速率快于h BM-MSC,两种细胞具有均一的细胞表型,均表达CD29、CD44、CD105,不表达CD45、CD34、HLA-DR、HLA-G、CD80、CD86,两种细胞都有成骨、成脂分化潜能,但h UC-MSC的分化潜能更强。结论 h UC-MSC与h BM-MSC具有相似的生物学特性,且前者具有更强的增殖能力和分化潜能,h UC-MSC有望成为h BMMSC理想的替代来源。     

脐带间充质干细胞外泌体的分离和鉴定

目的探讨脐带间充质干细胞的外泌体的获取与鉴定方法。方法通过组织块贴壁法从胎儿脐带分离和培养脐带间充质干细胞并通过RiboTMExosome Isolation Kit收集外泌体,采用电镜和流式细胞仪鉴定外泌体。结果第二代脐带间充质干细胞表面CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达,CD29、CD44和CD105呈阳性表达;在透射电镜下观察到脐带间充质干细胞外泌体呈圆形或椭圆形,大小不均匀,直径30~100 nm,有完整的膜结构,内含低密度物质;流式细胞检测外泌体CD9、CD63、CD81和CD83呈阳性表达。结论在培养脐带间充质干细胞的培养基中可以收集到外泌体,可以通过电镜和流式细胞仪对脐带间充质干细胞的外泌体进行鉴定。     

肾移植后恶性肿瘤患者调节性免疫细胞的变化研究

目的:探讨肾移植后发生恶性肿瘤患者调节性免疫细胞的变化。方法:收集2010年5月-2018年3月来我院进行肾移植手术的患者,肿瘤组共20例患者,病理诊断为肾脏及输尿管恶性肿瘤,对照组共20例患者,移植肾功能稳定;分离各组患者外周血淋巴细胞,流式细胞术检测调节性T细胞(Treg细胞)、调节性B细胞(Breg细胞)和滤泡调节性T细胞(Tfr细胞)的比例。结果:流式细胞学检测的结果发现,淋巴细胞中CD4~+T细胞比例在对照组和肿瘤组之间没有显著的差别(P0.05),肿瘤组中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例显著的高于对照组,增加了1.29倍(P0.05);CD19+B细胞比例在对照组和肿瘤组之间没有显著的差别(P0.05),肿瘤组中CD19+TGF-β+Breg细胞比例显著的高于对照组,增加了2.69倍(P0.05);肿瘤组中CD4+CXCR5+Foxp3+Tfr细胞比例显著的高于对照组,增加了2.74倍(P0.05)。结论:肾移植后发生恶性肿瘤患者外周血中Treg细胞、Tfr细胞和Breg细胞比例均显著升高,我们的研究为肾移植后临床用药和免疫状态的检测提供了一定的理论依据。     

梨小食心虫自动监测识别计数系统研制

针对果园梨小食心虫监测中存在的人工计数调查费力且欠准确的问题,本研究设计了一种基于性诱的害虫自动监测装置,通过构建配套的图像处理系统实现了害虫自动识别计数。应用诱芯与粘虫板相结合进行害虫诱捕;机器视觉定时采集粘虫板图像;基于Visual C#与Matlab混合编程,构建害虫自动识别计数系统。并在桃园应用研制的性诱害虫自动监测系统对梨小食心虫监测结果进行比较。结果显示:自动监测装置的平均诱捕率为89. 58%;梨小食心虫平均识别准确率为94. 11%。表明该自动监测系统的害虫诱捕率和识别准确率均高,提高了害虫监测识别的效率,在害虫监测中具有广阔的应用前景。