用彗星实验技术分析MTX对小鼠细胞DNA的损伤作用

MTX是一种抗叶酸药物 ,作用于增殖细胞 ,为了解其作用机制和探测其遗传毒性靶器官 ,以小鼠为研究对象 ,用彗星实验技术检测了MTX腹腔注射染毒后对脾、骨髓、胸腺、和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用及其与MTX剂量间的相关。 1.2 5～ 5mg/kgMTX可诱发小鼠体内 4种细胞的DNA单链断裂 ,核DNA损伤程度与用药剂量呈正相关。不同种类细胞对MTX的易感性不同 ,脾、骨髓、胸腺、外周血淋巴细胞可能是MTX的遗传毒性靶细胞。外周血淋巴细胞在SCGE分析中的拖尾现象可作为用药后组织器官对药物敏感性反映的生物标志     

山医群体近交系中国地鼠的G-显带核型和自发畸变率的研究

目的　阐明山医群体近交系中国地鼠G 显带核型和自发畸变率 ,完善中国地鼠的背景资料。方法　采用地鼠骨髓制备和G 显带法。结果　从 14只地鼠的 30个G 显带细胞中 ,7个G 显带细胞被选作模型分析。根据特有带型来识别各号染色体 ,绘制了模式图。此外 ,用常规Giemsa染色分析了 80 0个中期细胞 ,发现染色体断裂为 0 2 5 % ,无着丝粒畸变和不平衡易位均为 0 0 5 % ,自发畸变率很低。结论　山医群体近交系中国地鼠G 显带的识别为结构异常和基因作图提供了科学依据。     

盐敏感性高血压大鼠模型的研究进展

高血压是多基因遗传和多个环境因素相互作用的结果，盐的摄入在高血压的形成中起着关键的作用。本文就感觉神经损伤、Dah 1种、醋酸脱氧皮质酮和部分肾切除等方法建立的盐敏感性高血压大鼠模型的特点及其病理生理学变化作一综述，为进一步研究盐敏感性高血压发病的机制提供依据。     

感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠左心室肥厚与血压的关系

目的研究感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠左心室肥厚与血压的关系。方法建立感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠模型,计算左心室相对重量,观察左心室组织病理学形态特点。结果感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠CAP-HS组收缩压明显升高,左心室明显增重,心肌细胞肥大,肌纤维排列紊乱,心肌间质纤维化,其左心室重量指数明显升高（P〈0.01）;CON-HS组大鼠左心室重量指数也有升高（P〈0.05）。结论感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠左心室增重,心肌组织病理学改变与血压升高和摄入高盐有关。     

感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心、肾AT1R的表达

目的对感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠的心肌、肾脏组织中的血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）在mRNA和受体水平的表达进行检测,探讨AT1R与盐敏感性高血压的关系。方法用乳鼠皮下注射辣椒辣素法建立模型。哺乳期后,大鼠被随机分成4组：对照＋正常盐饮食组（CON-NS）;对照＋高盐饮食组（CON-HS）;辣椒辣素＋正常盐饮食组（CAP-NS）;辣椒辣素＋高盐饮食组（CAP-HS）。至7周龄（分组饲养后第4周）处死大鼠,免疫组织化学方法和反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）分别检测大鼠心肌和肾脏AT1R蛋白,以及AT1 R mRNA的表达。结果①Wistar大鼠在给予不同程度的感觉神经损伤和饲料干预后,各组大鼠尾部收缩压均有明显增加,最终CAP-HS组的尾收缩压显著高于其他三组（P〈0.01）。②免疫组织化学结果显示,CAP-HS组组织有显著的AT1R蛋白表达（P〈0.01）;CON-HS组肾脏、心肌组织中AT1R蛋白表达高于CON-NS组（P〈0.05）。③RT-PCR检测基因表达,与对照组CON-NS相比,实验组CAP-HS的AT1R mRNA表达显著升高（P〈0.01）;CON-HS组肾脏、心肌组织中AT1 R mRNA表达有显著性（P〈0.05）。结论感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心、肾AT1R表达升高,AT1R表达水平的差异可能与盐敏感性高血压的形成有关。     

盐敏感性高血压大鼠eNOS、iNOS表达与心肌细胞凋亡关系分析

目的探讨盐敏感性高血压形成和心肌细胞损害产生的机制。方法以辣椒辣索损伤Wistar大鼠感觉神经,饲喂高盐饲料,建立盐敏感性高血压大鼠模型。苏木素～伊红染色观察大鼠组织病理学改变;分光光度法检测心肌组织iNOS活性和NO含量;免疫组织化学方法检测心肌eNOS、iNOS蛋白表达;RT．PCR检测心肌eNOS、iNOSmRNA的表达。单细胞凝胶电泳检测心肌细胞凋亡。结果实验结束时各组比较体重无显著性差异（P〉0．05）。在第2、3、4周时,辣椒辣素高盐组鼠尾收缩压与对照组相比差异显著（P〈0．05）。辣椒辣素高盐组心肌细胞排列紊乱、细胞间隙明显增大,细胞核排列不整齐;心肌iNOS、NO水平升高（P〈0．05）;eNOS蛋白表达减少（P〈0．05）与eNOSmRNA表达减少（P〈0．01）;iNOS蛋白表达和iNOSmRNA表达显著增高（P〈0．01）;凋亡细胞数升高（P〈0．05）。结论eNOSmRNA和蛋白的低表达与感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠形成相关。iNOSmRNA和蛋白的高表达及iNOS活性升高使心肌组织局部产生大量NO。NO可能使得感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心肌细胞凋亡增加,从而加重心肌的损伤。     

感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心、肾ACE和ACE2的表达

目的研究肾素-血管紧张素系统（RAS）基因血管紧张素转换酶（ACE）和血管紧张素转换酶2（ACE2）在感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心肌和肾脏中的表达情况,探讨ACE、ACE2在盐敏感性高血压发生发展中的作用。方法用乳鼠皮下注射辣椒辣素法建立模型。哺乳期后,大鼠被随机分成4组：对照＋正常盐饮食组（CON-NS）、对照＋高盐饮食组（CON-HS）、辣椒辣素＋正常盐饮食组（CAP-NS）、辣椒辣素＋高盐饮食组（CAP-HS）。四组大鼠分别接受4周不同的处理。至7周龄（分组饲养后第4周）处死大鼠,免疫组化检测大鼠心肌和肾脏ACE和ACE2蛋白的表达,反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测大鼠心肌和肾脏ACE和ACE2mRNA的表达。结果①至7周龄（分组饲养后第4周）各组动物体重差异无显著性（P〉0.05）。②各组动物在分组时（0周）鼠尾收缩压差异无显著性（P=0.583）,至7周龄（分组饲养后第4周）,CAP-HS组鼠尾收缩压明显高于其它三组（P〈0.01）。③心肌和肾脏ACE蛋白表达均升高。心肌组织,CAP-HS组与CON-NS比较,P〈0.01,与CON-HS和CAP-NS比较,P〈0.05;肾脏组织,CAP-HS组与其它三组比较,P〈0.01。④心肌和肾脏ACE2蛋白表达均降低。心肌和肾脏组织,CAP-HS组与CON-NS和CAP-NS比较,P〈0.01,与CON-HS比较,P〈0.05。⑤心肌和肾脏ACE mRNA表达均升高。心肌组织,CAP-HS组与CON-NS比较,P〈0.01,与CON-HS和CAP-NS比较,P〈0.05;肾脏组织,CAP-HS组与其它三组比较,P〈0.01。⑥心肌和肾脏ACE2 mRNA表达均降低。心肌和肾脏组织,CAP-HS组与CON-NS和CAP-NS比较,P〈0.01,与CON-HS比较,P〈0.05。结论感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心、肾ACE表达升高的同时有ACE2表达的降低,ACE和ACE2表达水平的差异可能与盐敏感性高血压的形成有关。     

GTW对小鼠骨髓细胞微核和精子畸形的影响

研究了雷公藤多甙(GTW)的抗生育剂量、中间剂量和治疗剂量对昆明种小鼠骨髓细胞微核和精子畸形的影响,并对用药后其体重变化和睾丸/体重的比例进行比较。骨髓微核试验和睾丸/体重比变化分析均显示中间剂量组和治疗剂量组有不同程度的遗传毒性,且存在剂量-效应关系,但小于阳性对照;精子畸形率呈下降趋势,生育力的可复性可能也是下降的;体重变化可见中间剂量组存在较高的代偿能力。     

丙烯酰胺对雄性小鼠生殖细胞遗传损伤的研究

以雄性小鼠的生殖细胞为研究对象,经腹腔注射丙烯酰胺建立动物模型,采用生殖细胞早期精细胞微核和初级精母细胞染色体制作技术联合评价丙烯酰胺对雄性小鼠的生殖毒性及遗传毒性,观察染毒后精子发育的不同阶段对丙烯酰胺的损伤反应,为丙烯酰胺的生殖损伤提供一定依据。     

GPRC6A过表达前列腺癌细胞株构建及EMT相关研究

目的:构建GPRC6A基因过表达的前列腺癌LncapC4-2细胞株,检测细胞迁移和侵袭能力改变及EMT相关基因表达,为研究GPRC6A介导的EMT在前列腺癌发生发展过程中的作用奠定基础。方法:构建过表达GPRC6A的慢病毒载体pCDH-GPRC6A,人胚肾293T细胞包被病毒并感染Lncap C4-2细胞株,Puromycin筛选获得稳定过表达GPRC6A的细胞株。RT-PCR和Western blot验证细胞GPRC6A的过表达情况。划痕和transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,qPCR检测EMT相关基因表达。结果:成功构建GPRC6A表达的慢病毒载体,RT-PCR和Western blot检测LncapC4-2 GPRC6A过表达细胞株中GPRC6A的mRNA和蛋白质表达增高,与对照相比较,在过表达GPRC6A的LncapC4-2细胞中,细胞迁移和侵袭能力增强,并且EMT相关基因E-cadherin表达降低而SNAIL表达增高。结论:成功构建过表达的GPRC6A的前列腺癌细胞株,肿瘤细胞中的GPRC6A可能通过增强细胞迁移和侵袭能力并促进细胞EMT而参与前列腺癌发生发展过程。