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1.
目的:对人胚胎干细胞H9的(磷酸化)蛋白质组进行鉴定和深入分析,探讨维持人胚胎干细胞干性的核心调控网络。方法:利用新近发表的TAFT磷酸化肽段富集策略和高精度质谱鉴定技术,采用无标定量方法对H9细胞(磷酸化)蛋白进行定量分析;结合MOTIFX、iGPS、IPA等多种生物信息学分析软件,分析H9细胞的磷酸化基序-激酶、转录因子-靶基因调控网络。结果:获得了目前高度覆盖的H9细胞(磷酸化)蛋白质组数据集,鉴定到8674种蛋白质,其中3898种能够发生磷酸化修饰,包括13 676条磷酸化肽段,高可信度(class 1)磷酸化位点有11 870种。与已有的H9细胞磷酸化蛋白质组数据相比,其中2247种磷酸化蛋白质和10 025种磷酸化位点是本研究新鉴定到的。基于基序和激酶预测分析,推导出与干性维持相关的已知转录调节因子的新的磷酸化修饰基序以及调控其发生磷酸化的激酶。结合多能性转录因子对靶基因的调控信息,构建了多能性调控分子磷酸化修饰及其转录调控的核心网络。此外,还对特定位点的磷酸化修饰水平及其对应蛋白的总体丰度水平进行了比较及功能分析。基于各自的百分位数,比较磷酸化修饰水平与其对应蛋白的总体丰度,发现具有高丰度但低磷酸化修饰水平的蛋白倾向于参与物质转换或物质运输等生物过程,而低丰度但高磷酸化水平的蛋白质倾向于参与信息转导或调控过程。结论:提供了人胚胎干细胞H9高覆盖的(磷酸化)蛋白质组数据,这些数据有助于深入了解蛋白质磷酸化修饰在胚胎干细胞干性维持中所发挥的重要作用,为胚胎干细胞基础和应用研究提供了宝贵的数据资源。  相似文献   
2.
为寻找一种简单、经济、有效的DNA递送系统用于基因转染和基因治疗,制备了表面电荷为正电的纳米HAP,与表面电荷为负电的DNA结合形成DNA-HAP复合物,采用逆向蒸发法,用卵磷脂、DOPE和胆固醇制备成脂质体包封DNA-HAP复合物形成脂质-HAP-DNA复合体,脂质体和HAP对照,对所形成的脂质-HAP-DNA复合体(LHD)的特性、包封率、转染Hela细胞的效果进行初步检测研究。所获得的脂质-HAP-DNA复合体呈球形、平均粒径为643nm;平均包封率达11.67%,为中性脂质体;能有效转染真核细胞。该方法可作为提高基因转染效果的简单、经济、有效的手段之一,也为进一步提高非病毒载体的转染效率提供了一个思路。  相似文献   
3.
杨冬  姜颖  贺福初 《遗传》2007,29(2):131-136
KAP-1(又称TIF1b, TRIM28等)是一种转录中介因子, 在诸多转录调控复合体中起桥梁作用。它通过其N端RBCC结构域与含KRAB结构域的锌指蛋白、MDM2、MM1、C/EBPb等相互作用; 通过C端的PHD及BrD结构域与SETDB1、Mi-2a等分子相互作用, 参与形成具有组蛋白甲基化酶或组蛋白去乙酰化酶活性的复合体; 通过中间的HP1BD区域与HP1蛋白相互作用, 进而与组蛋白相结合。大量研究表明, KAP-1作为一个桥梁分子, 主要以共抑制因子形式参与转录抑制复合体的形成, 在某些复合体中也可作为共激活因子发挥作用。KAP-1参与形成的复合体在精细胞发育、胚胎早期发育等生理过程中发挥重要的调控作用, 这种调控属于表观遗传调控范畴。  相似文献   
4.
摘要 目的:研究急诊超声心动图联合血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、肌钙蛋白(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)诊断急性心肌梗死(AMI)的临床价值。方法:将2019年12月至2020年6月期间我院收治的82例AMI患者纳入研究,记作病变组。另取同期于我院进行体检的健康者80例作为对照组。比较两组各项超声心动图指标水平,血清NT-proBNP、cTnI和CK-MB水平。分析超声心动图指标与血清NT-proBNP、cTnI和CK-MB的相关性。以受试者工作特征(ROC)曲线分析超声心动图联合血清NT-proBNP、cTnI和CK-MB水平诊断AMI的效能。结果:病变组左心室射血分数(LVEF)低于对照组,而左室舒张末期内径(LVEDD)高于对照组(P<0.05)。病变组血清NT-proBNP、cTnI和CK-MB水平均高于对照组(P<0.05)。Pearson检验显示LVEF与血清NT-proBNP、cTnI和CK-MB均呈负相关(r=-0.514、-0.578、-0.532,均P<0.05),LVEDD与血清NT-proBNP、cTnI和CK-MB均呈正相关(r=0.625、0.594、0.575,均P<0.05)。超声心动图联合血清三项诊断AMI的曲线下面积、灵敏度以及特异度均高于超声心动图、血清三项单独诊断。结论:超声心动图联合血清NT-proBNP、cTnI和CK-MB诊断AMI的价值较高,具有一定的临床应用价值。  相似文献   
5.
目的:探讨喉癌患者围手术期合理的护理措施,为临床治疗与护理提供一定的理论依据。方法:对我院82例喉癌手术患者的临床资料进行回顾性分析,总结其护理经验,并制定相应的护理措施。结果:所实施的术后患者均达到预期的治疗效果,82例喉癌病人均痊愈出院。结论:做好喉癌术后护理,能提高手术成功率,减少术后并发症的发生,提高患者生存质量。  相似文献   
6.
RNA复制子疫苗研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
最近兴起的RNA复制子疫苗,利用源自病毒的能够自主复制的RNA,其结构蛋白基因由外源抗原基因取代,保留了非结构蛋白(RNA复制酶)基因。RNA复制酶可使RNA载体在细胞质中高水平复制,并实现外源抗原基因的高水平表达,可同时诱导细胞免疫和体液免疫应答。大量双链RNA可诱导被感染细胞凋亡,宿主细胞的凋亡有利于免疫系统识别外源抗原。RNA复制子疫苗克服了传统疫苗和普通DNA疫苗存在的缺点,具有抗原表达效率高、安全性好、应用范围广等优点,因而被视为一种发展前景很好的疫苗形式。目前已对一些疾病模型基于复制子的治疗性和预防性疫苗进行了研究(涉及的对象包括病毒、肿瘤以及细菌毒素等),并对某些不足之处进行了改进。  相似文献   
7.
转基因动物反应器是解决目前对重组药用蛋白质日益增长需求的强有力工具之一。转基因动物能以高效而经济的方式在不同组织中表达复杂的、有生物学活性的重组蛋白质。构建动物反应器,最重要的就是构建出能高效表达的载体。该就出现的各种表达重组蛋白质的系统进行了比较,并对转基因动物的产生、转基因的表达、转录区域的优化及其将来的前景作介绍。  相似文献   
8.
非病毒型基因载体研究进展   总被引:7,自引:1,他引:6  
非病毒载体以其安全性、低毒性、低免疫反应、靶向性及易于组装等优点被寄予厚望 ,对非病毒载体的研究人们投入了很大的精力 ,以期在基因治疗方面有所突破。综述了近年来非病毒载体的研究现状 ,分别总结阐述了阳离子脂质体载体、多聚阳离子载体、壳聚糖载体、树状高分子载体以及无机壳类SiO2 纳米粒子载体。提出非病毒载体今后的发展方向及发展的必要性。  相似文献   
9.
杀蜚蠊毒素的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
A cockroachcidal bacterial isolate CW-W-90-3 was selected by egg yolk agar plate. The isolate produced phospholipase C (PLC) which was pathogenic to the nymph of cockroach. The conditions for production of high level PLC indicated that using LB medium supplement Tween-80 or minimal medium could effectively increase the activity of PLC. The optical phase for production of PLC was in the period of 12-18 hours and below pH8.0. The activity of PLC was reduced along with the culture time until 48 hours. The PLC was resistant to heat. The partially purified PLC from the culture supernatant was assayed by using cockroach nymphes and produced 71.74% mortality.  相似文献   
10.
RNA复制子疫苗及其包装系统   总被引:2,自引:0,他引:2  
RNA复制子疫苗是一种基于RNA的复制子,能够进行自我复制的新型疫苗,保留了病毒的复制酶基因,结构基因由外源基因所代替,复制酶可控制载体RNA在胞质中高水平复制和外源基因高水平的表达。RNA复制子疫苗被包装成病毒样颗粒后,大大提高了RNA复制子的稳定性。近几年来,关于RNA复制子的包装系统发展迅速,并且许多包装系统都获得成功,大大提高了复制子疫苗的生物安全性和外源基因的高效表达性,具有很好的应用前景。  相似文献   
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