普通棉耳狨猴仙台病毒感染的报道

仙台病毒在分类上属副粘病毒科、副粘病毒属、副流感病毒 1型。仙台病毒过去的名称包括新生儿肺炎病毒 ,日本血凝病毒和Ｄ型流感病毒等。在国内普通实验小鼠群中仙台病毒感染非常普遍 ,而未见仙台病毒感染普通狨猴的报道。 1999年夏季 ,天津某高校一个狨猴实验室中暴发仙台病毒感染 ,动物发病率达 80 % ,病死率约 10 %。流行大约持续了一个月。狨猴发病初始均表现为精神不振 ,嗜睡 ,惧冷 ,食欲下降。继续发展表现为鼻腔出现分泌物 ,呼吸加快 ,发热 ,气喘 ,呼吸困难 ,多数病狨从发病至死亡在 3- 15ｄ。解剖发现病死狨猴肺叶呈杨梅色 ,切开时…     

关于2215细胞培养条件的探讨

多年来人们试图通过组织培养系统来建立HBV的研究模式,直到1986年Sureau等首次报道了用克隆的HBV-DNA转染人肝癌细胞建立2215细胞系{1,2},使之产生了较高水平的HVsAg,从而建立了HBV体外细胞的增殖系统.     

副粘病毒Tianjin株NP、P、M及L蛋白的生物信息学分析

为了进一步明确副粘病毒Tianjin株的来源和种系进化地位,探讨其高致病性的机制.对Tianjin株NP、P、M及L蛋白进行了生物信息学分析.进化树显示:Tianjin株属于副粘病毒亚科呼吸道病毒属,且很可能为仙台病毒新的基因型.相似性比较表明,P蛋白变异最大.相似性仅为78.7%～91.9%;L蛋白相似性最高,为96.0%～98.0%.序列比对显示:NP蛋白氨基酸序列中存在15个独特的变异位点,P蛋白存在29个,M蛋白存在6个,L蛋白存在29个.这些独特变异位点的存在很可能是导致Tianjin株在宿主来源和致病特点等方面与已知仙台病毒株具有较大差异的原因.     

一株引起普通棉耳狨猴死亡病毒的分离与鉴定

1999年6月,天津医科大学动物中心饲养的珍贵灵长类实验动物--普通棉耳狨猴群体中暴发急性呼吸道传染病,病死率高达33%.在排除细菌感染的基础上,通过死亡狨猴肺组织匀浆接种鸡胚和MDCK细胞的分离培养,分离出一株具有高血凝效价的病毒株.经双份血清试验及动物接种试验,确认该病毒是本次疾病流行的病原体.又进一步通过与常见呼吸道病毒标准毒株及血清进行交叉血凝抑制试验、电镜观察、RT-PCR技术并结合生物信息学方法对该毒株进行鉴定,确认本次疾病流行的病原体是副流感1型病毒中的仙台病毒.     

两种检测抗生素S632A对Vero细胞毒性作用方法的比较

为检测S632A对细胞的毒性作用,比较了CPE法及MTT法检测其效果,结果可见,2种方法均可证明S632A对细胞的毒性较低,MTT法比CPE法敏感性高。     

小圆形病毒样因子引起新生儿急性胃肠炎的研究

33例新生儿急性胃肠炎的粪便标本经EM检测,12份(36.4％)粪便标本中检出了病毒样颗粒,其中11份(33,3％)为SRV样因子(SRV),1份为其他病毒样颗粒。经粪便包埋超薄切片和IEM证实SRV是引起新生儿急性胃肠炎的病原。SRV的直径为26nm,表面结构清晰。在氯化铯(CsCl)中的浮密度为1.36—1.40g/cm~3。应用微量CF试验,5例双份血清中的1例抗体有三倍升高,3例恢复期皿清抗补体,1例为阴性,该病人为其他病毒样颗粒感染。核酸电泳未显带。培养未见细胞病变。5例正常对照新生儿粪便未检出任何病毒样颗粒。     

HSV-1感染大鼠骨髓间充质干细胞及形成潜伏感染的初步研究

在体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察单纯疱疹病毒1型感染骨髓间充质干细胞情况.分离并鉴定BMSCs;HSV-1感染BMSCs,观察细胞病变(CPE);建立BMSCs的HSV-1潜伏感染模型.提取总DNA,PCR法扩增BMSCs内的HSV-1特异性片段,检测HSV-1感染BMSCs及潜伏感染.结果显示骨髓间充质干细胞经14d诱导后,碱性磷酸酶含量增高、形成钙结节,表现出成骨细胞特性.HSV-1感染BMSCs,出现典型的CPE,PCR法证实BMSCs内存在HSV-1的特异性片段.HSV-1潜伏感染的BMSCs,未出现明显的CPE,细胞传至7代,仍可测到HSV-1的基因片段,表明BMSCs有可能形成HSV-1的潜伏感染.大鼠骨髓间充质干细胞在体外可以向成骨细胞方向分化,可作为组织工程学的种子细胞.HSV-1可以在体外感染骨髓间充质干细胞并有形成潜伏感染的趋势.     

新分离的副粘病毒Tianjin株的全基因组序列分析

副粘病毒Tianjin株是一株对普通棉耳狨猴具有高致病性,并可能与人类下呼吸道感染密切相关的毒株.为了明确其基因结构、变异特点及种系进化地位,采用RT PCR、测序和拼接,获得了副粘病毒Tianjin株全基因组序列,与GenBank登录的副粘病毒科7个属和尚未分类的28株病毒及7株仙台病毒代表株,进行同源性比较及系统进化分析.结果表明,副粘病Tianjin株属于副粘病毒科、副粘病毒亚科、呼吸道病毒属,与仙台病毒关系最近.基因组全长及组成规律与仙台病毒相似,只是L基因末尾A15240C变异而使L蛋白增加了一个谷氨酸残基.副粘病毒Tianjin株存在440个独特的核苷酸变异位点,导致110个氨基酸残基的改变,系统进化上构成独立的分支.副粘病毒Tianjin株在基因组序列、宿主亲嗜性和致病性等方面与已知仙台病毒存在较大的差异,可能代表仙台病毒的一个新基因型.