细菌L型医院感染的病原学监测

目的：探讨细菌Ｌ型医院感染的病原菌分布及其耐药性。方法：药敏试验采用ＫＢ法;β－内酰胺酶采用碘测定法;金葡菌采用国际标准化噬菌体分型法;铜绿假单胞菌采用玻片法。结果：１４８株细菌Ｌ型中革兰阴性和阳性菌分别占５３４％和４６６％。金葡菌占２５７％,大肠埃希菌和铜绿假单胞菌各占１６７％。Ｌ型对β－内酰胺类和万古霉素较其返祖菌耐药率高,对红霉素及环丙沙星较敏感。返祖菌中金葡菌和表葡菌对万古霉素均敏感;大肠埃希菌对环丙沙星敏感率为９６０％,对庆大霉素、哌拉西林、头孢哌酮６０％～８４％敏感;铜绿假单胞菌对庆大霉素和环丙沙星敏感率约２０％,对头孢哌酮（８０％）和阿米卡星（６６％）多敏感。返祖菌中,金葡菌８９５％产β－内酰胺酶,ＭＲＳＡ达７８９％;金葡菌和铜绿假单胞菌均无优势型别。结论：医院感染中细菌Ｌ型分布及其耐药性与Ｂ型不同。     

多重耐药黏液型铜绿假单胞菌 氨基糖苷类修饰酶基因检测

摘要：目的 研究多重耐药黏液型铜绿假单胞菌（MDR-mPA）氨基糖苷类修饰酶基因的分布,为合理应用抗生素提供依据。方法 采用纸片扩散（K-B）法对临床分离的MDR-mPA进行药敏试验,用聚合酶链反应（PCR）法检测氨基糖苷类修饰酶。结果 61株MDR-mPA中共有23株检出氨基糖苷类修饰酶,其中aac(3)-Ⅱ阳性12株（48%）,aac(6′)-Ⅱ阳性9株（36%）,aac(6′)-Ⅰ阳性3株（12%）,ant(2″)-Ⅰ阳性1株（4%）。结论 黏液型铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗菌药物的耐药与氨基糖苷类修饰酶基因表达有关。     

应用实时荧光定量PCR方法定量检测双歧杆菌对Caco-2细胞的黏附

【目的】采用实时荧光定量PCR的方法定量分析黏附于Caco-2细胞的双歧杆菌,并建立一种快速有效分离黏附于细胞的细菌的方法。【方法】采用Triton X-100溶液处理黏附于Caco-2细胞上的菌体,确定获得最佳分离效果的处理时间;建立实时荧光定量PCR定量检测双歧杆菌的方法,获得标准曲线,进行特异性、灵敏度、重复性评价;应用建立的方法分析11株双歧杆菌对Caco-2细胞的黏附能力。【结果】Triton X-100处理黏附于Caco-2细胞的双歧杆菌的最佳作用时间为10 min。实时荧光定量PCR定量检测双歧杆菌的方法重复性好、特异性强、灵敏度高;起始模板浓度范围在104?108 CFU/mL之间具有良好的线形关系,相关系数>99%,在该浓度范围线性方程为：y=?3.345 2x+37.637 0。应用建立的方法定量分析双歧杆菌的黏附能力,与直接镜检法相比差异不显著(P>0.05),检测时间由48 h缩短至4 h。【结论】Triton X-100分离处理结合实时荧光定量PCR方法是一种快速、有效的检测双歧杆菌对Caco-2细胞黏附能力的方法。     

金黄色葡萄球菌体外抗菌活性分析

抗生素在临床上已广泛应用了数十年 ,在抗感染疾病中发挥了极其重要的作用 ,特别是金黄色葡萄球菌耐药菌株相继出现 ,给临床治疗带来困难。目前已知这种耐药是由位于染色体外的 DNA上的耐药基因所编码 ,并通过接合、转导和转化等方式在细菌间传播 ,其中以接合为最主要。同时在传播过程中 ,这种耐药基因又可不断重新组成新的耐药基因而产生对多种抗生素同时耐药的多重耐药菌株。因此本文对174株金黄色葡萄球菌的耐药机理及抗生素耐药性进行研究 ,对如何减少耐药菌株的产生控制医院内感染的流行 ,指导临床治疗有着一定的意义。1　材料与方法…     

乳杆菌代谢产物对化脓性链球菌的抑制作用

【目的】分析乳杆菌代谢产物对化脓性链球菌的抑制作用。【方法】基于双层平板打孔法,通过测量抑菌圈大小来检测乳杆菌代谢产物对化脓性链球菌的抑菌作用;然后分别采用高效液相色谱法和4-氨酰安替比林法检测乳杆菌代谢产物中的有机酸和H2O2含量;最后,检测乳酸、乙酸和H2O2对化脓性链球菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)。【结果】对化脓性链球菌的抑菌效果以植物乳杆菌KLDS1.0667最好,副干酪乳杆菌KLDS1.0342-1次之,瑞士乳杆菌KLDS1.0203抑菌效果最差;乳酸和乙酸产量KLDS1.0667>KLDS1.0342-1>KLDS1.0203;H2O2产量KLDS1.0203>KLDS1.0667>KLDS1.0342-1。在抑菌试验中,乳杆菌的发酵上清液经去除H2O2处理后抑菌圈直径都减小;将发酵上清液的p H调至7.0后均检测不到抑菌圈。结果表明,乳杆菌代谢产物中对化脓性链球菌起抑制作用的主要物质为有机酸和H2O2,其中乳酸是产生抑菌作用的最主要物质。乳酸、乙酸和H2O2对化脓性链球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为1.28、0.64和0.008 g/L,对化脓性链球菌的最小杀菌浓度(MBC)分别为5.12、2.56和0.032 g/L。【结论】乳杆菌可利用其代谢产物对化脓性链球菌产生抑制作用,主要抑菌物质为有机酸和H2O2。