抑制前列腺癌的食药用菌醇提物的筛选及灵芝醇提物对癌细胞的抑制机理

比较了灰树花Grifola frondosa、巴氏蘑菇Agaricus blazei、猴头菌Hericium erinaceus、刺芹侧耳Pleurotus eryngii、毛头鬼伞Coprinus comatus、蛹虫草Cordyceps militaris、灵芝Ganoderma lingzhi、香菇Lentinula edodes、桑黄Sanghuangporus sanghuang和桦褐孔菌Inonotus obliquus 10种食用菌醇提物对前列腺癌LNCaP细胞增殖的影响,其中灵芝醇提物对LNCaP细胞增殖及5ɑ-还原酶活性具有良好的抑制效果,对LNCaP细胞释放PSA的抑制效果也好于其他食用菌。进一步研究灵芝醇提物对LNCaP细胞的抑制机理,结果表明,灵芝醇提物通过诱导细胞凋亡、使Caspase-3、Bax、P53活性升高,PARP、Bcl-2活性下降来实现对LNCap细胞的抑制作用。利用自噬抑制剂氯喹和自噬激活剂雷帕霉素观察细胞自噬在灵芝醇提物抗肿瘤过程中的作用,结果表明,体外激活细胞自噬对LNCaP细胞起到保护,从而减弱了灵芝醇提物的抗肿瘤作用。     

益生菌联合肠内营养对 食管癌患者术后胃肠功能的影响

目的探讨益生菌联合肠内营养对食管癌患者术后胃肠功能的影响。方法 50例食管癌患者按随机数字表法被分为对照组(24例)和试验组(26例)。对照组患者采用常规治疗方案,并同时实施肠内营养治疗。试验组患者在对照组治疗的基础上给予鼻饲益生菌。观察并比较两组患者腹胀、腹泻、便秘、胃内容物反流、胃潴留等不良反应的发生情况;留置胃管、留置鼻肠营养管及达到肠内营养目标喂养量的时间;患者入院时和出院时体重的变化以及两组患者住院时间及住院费用。结果试验组患者腹胀、便秘、胃潴留的发生率均明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者腹泻、胃内容物反流的发生率差异无统计学意义(P0.05)。试验组患者达到肠内营养目标喂养量的时间显著短于对照组(P0.05)。试验组患者留置胃管时间和留置鼻肠营养管的时间明显短于对照组(P0.05)。对照组患者出院时体重较入院时明显降低,与试验组相比差异有统计学意义(P0.05)。试验组患者的住院时间和住院费用均低于对照组,但差异无统计学意义(P0.05)。结论肠内营养联合益生菌具有协同治疗作用,可有效降低食管癌患者术后胃肠道不良反应的发生率,促进患者肠内营养的实施,保证患者机体的营养需要。     

高雄山虫草生物学特性及人工驯化条件优化

高雄山虫草Cordyceps tenuipes是一种重要的珍稀野生虫草,无性型为细脚棒束孢Isaria tenuipes。对采集的野生无性型高雄山虫草生物学特性进行了研究,采用小麦和大米为栽培基质,通过添加不同营养成分进行人工驯化和栽培条件优化,对后续提高其孢梗束产量和商业化栽培具有重要意义。试验结果表明,该虫草菌丝在固体和液体培养条件下生长所需的最佳营养组成一致,通过单因素和多因素正交试验得出菌丝在固体和液体条件下生长的最佳培养基配方为蔗糖30g/L、酵母粉15g/L、磷酸二氢钾2g/L、七水硫酸镁2g/L,最佳培养条件为温度25℃,pH 7。以小麦为培养基栽培的孢梗束生物学效率介于(45.750±6.062)%-(67.820±6.018)%,总体优于大米培养基(23.410±5.242)%-(36.880±8.812)%。以添加蚕蛹粉的小麦培养基栽培的孢梗束生物转化率最高,达67.820%,高于已有的报道。通过生物学特性分析和人工驯化条件的优化,为高雄山虫草的规模化人工栽培提供参考。     

嵌合型猪圆环病毒1-2型感染性DNA克隆的构建及其对小鼠的免疫原性

[目的]本研究旨在构建嵌合型猪圆环病毒1-2型感染性DNA克隆.[方法]利用PCR技术扩增PCV2 ORF2,克隆入缺失PCV1 ORF2的pSK-PCV1△ORF2中,得到pSK-sPCV1-2.该重组质粒中包含嵌合型PCV1-2全基因组,通过不完全酶切的方法,将嵌合型PCV1-2全基因组串联入pSK载体中,得到含串联双拷贝的嵌合型PCV1-2感染性DNA克隆.[结果]经序列测定,获得含串联双拷贝的嵌合型PCV1-2感染性DNA克隆.PCV1-2嵌合病毒接种BALB/c小鼠,用间接ELISA方法对接种后7、14、21、28、35、42 d的小鼠进行血清抗体检测.结果显示从接种后14 d开始,即有部分小鼠产生了针对PCV2 Cap蛋白的特异性抗体;至接种后42 d,几乎全部接种小鼠的血清均呈阳性.[结论]构建了PCV1-2型感染性DNA克隆,该嵌合病毒能够激发机体产生体液免疫应答.     

DynaCT对肝转移瘤介入治疗具有指导意义

为了探讨锥形束CT (DynaCT)在肝癌患者实施经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)手术治疗中的指导作用、栓塞效果评估中的价值,本研究选取了2012年3月至2015年5月在本院实施TACE手术治疗的102例原发性肝癌或转移性肝癌患者进行研究。通过对102例患者病灶进行手术前螺旋CT检测、术中数字减影血管造影(DSA)及DynaCT检测,并对比DSA与DynaCT对肝癌病灶、供血动脉、术后栓塞效果的检测结果。本研究发现术前普通螺旋CT共计检出病灶105个,术中DSA检出病灶数目176个,DynaCT术中检出肿瘤病灶285个;DynaCT和DSA的平均检出病灶数目均显著的高于普通螺旋CT (p<0.05),DynaCT平均检出病灶数目均显著的高于DSA (p<0.05);DynaCT的病灶供血动脉检出率为86.67%,显著地高于DSA (55.68%)(p<0.05);DynaCT检出的285个病灶对栓塞效果评估结果与实际栓塞效果一致的有271个病灶(95.09%),DSA评估结果与实际结果一致的有138个病灶(78.41%),DynaCT对于TACE术后效果评估的一致性高于DSA (p<0.05)。本研究表明,DynaCT在肝癌患者实施TACE手术治疗中能够更有效的发现病灶,指导栓塞操作。     

重组人干扰素α2b栓剂稳定性研究

将重组人干扰素α2b栓剂在不同温度下保存不同时间,检验干扰素生物活性、溶出度试验、融变时限、pH值和微生物限度及外观的稳定性。重组人干扰素α2b栓剂在4~8℃条件下放置48个月;在20~25℃条件下放置24个月IFN生物活性未见下降,37℃放置4个月IFN生物活性未见下降。重组人干扰素α2b栓剂的生物学活性及理化性质有较好的稳定性。     

日本七鳃鳗(Lampetra japonica)肝脏ESTs 分析与比较转录组研究

以日本七鳃鳗(Lampetra japonica)肝脏为材料构建cDNA文库, 在文库中随机挑选克隆子进行测序共得到10077条有效ESTs(expressed sequence tags)序列. ESTs序列分析显示, 8515条ESTs拼成648条片段重叠群, 共得到2210条转录本, 其中47.06%的转录本预测为全长序列; 利用BLAST程序在GenBank数据库中进行同源性搜索发现2053条转录本有同源序列匹配, 占总转录本的92.9%. 更进一步对这些基因产物进行Gene Ontology注释, 结果发现, 在日本七鳃鳗肝脏中与有颌类免疫、凝血和代谢相关的基因大量表达, 并预测了8个新基因. 通过对日本七鳃鳗与底鳉(Fundulus heteroclitus)、鼠(Mus musculus)、牛(Bos taurus)和人(Homo sapiens)肝脏转录组的比较分析, 发现日本七鳃鳗肝脏中比其他物种优势表达的是甲壳质酶和多糖代谢等相关的基因, 这些基因可能在日本七鳃鳗免疫中发挥重要作用. 此外, 也利用TargetScan软件对日本七鳃鳗肝脏转录组中3′UTR区进行microRNA靶标识别, 结果发现了与人类癌症基因调控同源的microRNA靶标, 这为研究人类癌症提供了有益的线索. 上述结果将为七鳃鳗功能基因和蛋白组学的研究以及脊椎动物的基因组进化提供重要的理论基础.     

冻干干扰素保护剂(稳定剂)的筛选

取同一批重组人干扰素α2a原液,分别加入A,B,C,D,E五种冻干保护剂,按《中国生物制品规程》方法进行冻干,检测其效价,外观,水分含量,内毒素含量,以现行干扰素生产使用的人血白蛋白C保护剂作为对照,结果显示,使用A,D,E保护剂制品在40℃放置4个月,效价降低了45％－60％,使用B保护剂的制品稳定性最好,在40℃放置4个月,效价仅下降了35％,B保护剂配方为最佳保护剂配方。     

重组人干扰素α1 b滴眼液稳定性的研究

重组人干扰素α 1b滴眼液放置不同温度和不同时间后,定期测定其效价、无菌试验、pH值和外观,在4℃条件下,24个月内pH、无菌试验、外观和0月一致,没有明显变化;生物学活性24个月没有降低;室温（18～25℃）放置12个月活性明显降低,pH、无菌试验、外观和0月一致;37℃放置6个月活性基本丧失,pH、无菌试验、外观和0月一致.重组人干扰素α1b滴眼液在4℃条件下生物活性及其他理化性质稳定性较好.     

灵芝孢子粉中核苷类成分分析

本文利用高效液相色谱方法(HPLC)同时对灵芝孢子粉中的15种核苷类成分的含量进行测定。采用Ultimate AQ-C18(4.6mm×250mm,5?m)色谱柱,以甲醇和水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0m L/min,检测波长259nm,柱温30℃,进样量10μL。方法学考察结果表明,该方法准确度高,稳定性、精密度、重现性好,适用于灵芝孢子粉中核苷类成分的测定分析。运用建立的方法对不同破壁时间、不同采收时期龙泉、奉化、大别山、黄山4个产区的灵芝孢子粉中的15种核苷类成分的含量进行测定。结果表明破壁处理对灵芝孢子粉中核苷类成分提取率的影响不大,不同产地的灵芝孢子粉中核苷类成分的组成和含量具有显著差异,且孢子粉中的核苷含量随着产粉时间的延长有所增加。各待测样品中均含有胞嘧啶、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、腺苷等成分,其中尿苷、鸟苷、腺苷3种核苷的含量占总量的比例在待测样品中均达到70%以上,为灵芝孢子粉中的主要核苷类成分。