家蝇变形期抗菌蛋白的提取

目的:分离纯化家蝇变形期体内抗菌蛋白并分析其抑菌作用。方法:对家蝇（Ｍusca domestica）5日龄幼虫进行针刺诱导,并于24h后挑取变形后的蛹,通过研磨、调酸、加热提取蛹体内的耐热水溶总蛋白,经过两步CM sepharose F.F.离子交换层析分离,以金黄色葡萄球菌作指示菌,检测其抑菌活性,并用SDS PAGE不连续电泳检测蛋白质的分子量。结果:经两步离子交换分离后,得到一种对金黄色葡萄球菌具有较强抑菌活性的蛋白,经SDS PAGE检测为单一条带,其分子量为43kDa。结论:家蝇处于变形期时,经过诱导后体内能产生一种抑菌活力较强的蛋白质。     

硅藻变温发酵生产二十碳五烯酸的研究

本文考察不了同温度（10℃～30℃）对硅藻(Nitzschia laevis)合成二十碳五烯酸(EPA)的影响,对不同温度下的发酵过程进行动力学特性分析。在此基础上,提出了EPA合成的变温培养方法：延滞期及对数期初期温度控制在25℃,从对数期中期开始在20℃条件下进行培养。采用此变温培养进行发酵,EPA的含量和产量分别达到了6.00%和291.60 mg·L-1,较采用单一温度(25℃)发酵的最大值分别提高了24.07%和18.81%。     

家蝇变形期抗菌蛋白的提取及其抑菌活性研究

目的:分离纯化家蝇变形期体内抗菌蛋白并分析其抑菌作用.方法:对家蝇(Muscadomestica)5日龄幼虫进行针刺诱导,并于24h后挑取变形后的蛹,通过研磨、调酸、加热提取蛹体内的耐热水溶总蛋白,经过两步CM-sepharose F.F.离子交换层析分离,以金黄色葡萄球菌作指示菌,检测其抑菌活性,并用SDS-PAGE不连续电泳检测蛋白质的分子量.结果:经两步离子交换分离后,得到一种对金黄色葡萄球菌具有较强抑菌活性的蛋白,经SDS-PAGE检测为单一条带,其分子量为43kDa.结论:家蝇处于变形期时,经过诱导后体内能产生一种抑菌活力较强的蛋白质.     

江浙蝮蛇蛇毒中抗肿瘤蛋白的分离纯化及活性研究

利用离子交换和凝胶过滤层析等分离技术从江浙蝮蛇蛇毒中分离纯化到一种抗肿瘤蛋白,经SDS-聚丙酰胺凝胶电泳检测其分子量为58．2ku。MTT法测定该蛋白对K562细胞的LC50为4．96μg／mL,电子显微镜观察其能引起K562细胞的凋亡,琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯状条带,实验结果表明该蛋白对K562细胞有明显的抑制作用。     

灰树花胞外多糖对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用

四氯化碳可导致小鼠急性肝损伤,采用灰树花胞外多糖(GFP)防治后,对其血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和过氧化氢酶活力(CAT)以及肝组织匀浆中的丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)进行测定,与模型组相比较,灰树花胞外多糖治疗组ALT、AST、MDA、LDH活力明显降低,而CAT活力明显升高。通过组织切片染色可以直观的看出灰树花胞外多糖能显著减轻肝组织病理变化程度。结果显示GFP对CCL4致小鼠急性肝损伤具有保护作用。     

江浙蝮蛇蛇毒蛋白诱导K562细胞调亡的研究

目的：研究江浙蝮蛇蛇毒蛋白诱导K562细胞调亡。方法：通过电镜观察蛇毒蛋白作用后K562细胞的形态变化;MTT检测蛇毒蛋白对细胞增值的影响,同时应用流式细胞仪检测细胞凋亡数及其对细胞周期的影响;采用琼脂糖凝胶电泳观测凋亡片断。结果：蛇毒蛋白作用K562细胞后,能显著抑制细胞增值;LC50为4．96μg／mL,电镜可观察到凋亡形态学改变;电泳呈现典型的阶梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡峰。结论：江浙蝮蛇蛇毒蛋白可诱导K562细胞调亡。     

γ-聚谷氨酸与D-半乳糖酯化衍生物-顺铂复合物的制备及其生物活性

介绍了制备一种γ-聚谷氨酸-D-半乳糖酯化衍生物-顺铂复合物［poly (γ-glutamic acid)-D-galactose esterifiable derivative-cisplatin complex compound,γ-D+-DDP］,并考察其抗肿瘤活性。主要通过生物发酵获得大分子γ-聚谷氨酸［poly (γ-glutamic acid) ,γ-PGA］,利用酸降解得到可以作为药物载体的小分子γ-聚谷氨酸;利用凝胶色谱柱检验小分子γ-聚谷氨酸的分子量;利用MTT法检测该复合物的体外抗肿瘤作用。结果表明：成功获得γ-聚谷氨酸-D-半乳糖酯化衍生物-顺铂复合物,该复合物载药率达9.4% ~10.2%;该复合物对人肝癌细胞BEL-7402具有显著的杀伤作用,能引起细胞凋亡(HE染色观察得到)。因此,γ-聚谷氨酸-D-半乳糖酯化衍生物-顺铂复合物是一种有效的抗肿瘤药物,具有潜在的临床应用价值;生物发酵的γ-聚谷氨酸可用于药物载体,赋予药物新的特点。     

家蝇蛹凝集素的免疫调节作用

本实验研究了从家蝇蛹体内分离的一种凝集素,研究了其免疫调节的性质。首先将收集的家蝇蛹在缓冲液中研磨,得到粗提物,经过亲和吸附、竞争洗脱等步骤得到了纯品。电泳结果表明家蝇蛹凝集素分子量大约为55kD。通过检测巨噬细胞分泌的细胞因子IL-6、IL-12等实验,证明了家蝇蛹凝集素浓度在5μg/mL时对与巨噬细胞分泌IL-6有显著增强作用,家蝇蛹凝集素的浓度在10μg/mL时对巨噬细胞分泌IL-12有显著效果。通过小鼠脾淋巴细胞增殖试验结果可知家蝇蛹凝集素对于混合淋巴细胞增殖有促进作用。以上试验结果说明家蝇蛹凝集素免疫调节作用,为天然免疫增强剂的开发提供了一定的参考依据。     

家蝇蛹凝集素的分离工艺和性质的初步研究

通过缓冲液浸提、戊二醛固定化红细胞吸附、亲和层析和凝胶过滤等方法,从家蝇蛹中分离纯化出一种对半乳糖专一的凝集素.结果表明,亲和层析后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测家蝇蛹凝集素(MPL)分子质量为84 ku.SephadexG-200凝胶过滤后,MPL分子质量为86 ku.家蝇蛹凝集素专一性识别D-半乳糖,其血凝活力对热不稳定,不依赖Ca²⁺,在pH 6～9之间稳定.家蝇蛹凝集素对Escherichia coli, Bacillus subtilis和Salmonella typhi有抑制作用.     

除草剂精喹禾灵用于硅藻过量产生二十碳五烯酸

硅藻itzschia laevis是EPA很好的替代来源。除了对硅藻进行高密度培养外,EPA的产量还能利用除草剂来提高。本文研究了除草剂精喹禾灵对硅藻的生长和产EPA的影响。DMSO作为除草剂的溶剂,会对硅藻的生长造成抑制,DMSO在培养基中的添加量最好不要超过0.2%。除草剂能对硅藻的细胞形态造成损害,随着除草剂浓度的增加,硅藻的产量减低了,但脂质和EPA的含量提高了。当除草剂浓度为0.1mmol/L时,EPA的含量从3.00%增加到3.58%,提高了19.3%,EPA占总脂肪酸的含量也由25.15%提高到了32.88%。实验表明,除草剂精喹禾灵能促进硅藻EPA的积累,因而在筛选过量产生EPA微藻方面有重要用途。