基因枪的使用方法介绍

基因枪法是一种新型的遗传转化手段[1-3]。所谓遗传转化是指通过某种途径或技术将外源基因导入受体细胞的基因组中,并使之在受体细胞中表达。人们可利用一个特定的目的基因,如抗虫、抗病基因等进行转化,使转基因植物在保持原有的各种优良农艺性状的同时,又能增加新的目的基因所控制的性状。一般遗传转化主要有两类：一类是农杆菌介导法,一类是DNA直接转化法。DNA直接转化技术包括化学方法和物理方法,如电击、微注射、超声波和基因枪法。基因枪法,又称生物弹法或微粒枪法、微粒轰击法,是依赖高速度的金属微粒将外源基因引入活细胞…     

抗赖氨酸类似物的烟草愈伤组织突变体

从EMS诱变过的烟草(革新5号)愈伤组织培养,以低的频率选择得到抗赖氨酸类似物(1-4-氧赖氨酸—OL)的突变体。这突变体对OL抑制生长的抗性比亲本高10倍多,它离开选择剂生长12代(10个月)后仍然是稳定的。这突变体比其亲本积累赖氨酸多一倍,过氧化物酶同工酶谱带呈现变异。     

转基因(SAG12-IPT)青菜的迟衰特性

利用根癌农杆菌感染方法将融合基因SAG12 IPT导入青菜 ,转基因植株明显表现出衰老延迟的生理现象。SAG12 IPT的抗衰老作用表现为 :在衰老过程中转基因青菜叶片中叶绿素含量高于未转基因的青菜 ,PCR分析结果表明该融合基因已经转入青菜中。激素检测结果表明转基因青菜叶片中细胞分裂素含量高于未转基因植株 ,说明抗衰老与叶片内细胞分裂素含量提高有关。另外 ,转基因植株不仅表现出活体植株衰老延迟 ,而且长在植株上的与离体的叶片滞绿时间延长。这些为蔬菜的耐储存育种提供了新的思路 ,同时为该融合基因在十字花科经济作物中的应用提供了理论依据。     

青菜的高效再生和农杆菌介导B.t.及CpTI基因的转化

分别对培养基中适宜的激素组成和AgNO3 添加浓度进行研究 ,建立了青菜下胚轴和子叶外植体的高效再生系统 ,青菜品种“矮抗青”的最高芽分化频率下胚轴可达 6 5 % ,子叶为 5 2 %左右。在此基础上 ,对影响转化频率的不同因素进行了探讨 ,共获 94株卡那霉素抗性植株。对转基因植株总DNA的Southernblot ting分析证明 ,B .t .基因和CpTI基因已整合到青菜植株的细胞核基因组中。经过抗虫性筛选试验 ,从转基因植株的T3 代筛选到 7个转B .t.基因的抗虫纯合株系和 5个转CpTI基因的抗虫纯合株系 ,并进入田间小区青菜抗虫新品种试验     

大豆组织培养再生植株

建立从离体培养高效率再生植株的程序是用细胞遗传操作改良农作物的一个先决步骤。从栽培大再组织培养能再生植株的报道,近年日渐增多(可参考文献)。其中,获得再生植株效率比较高的报道,所用的品种材料和     

抗正亮氨酸的单倍体烟草突变细胞系

由花药培养得来的单倍体烟草叶片发生愈伤组织。把悬浮培养5天的细胞团用1%EMS处理2小时。用逐步提高浓度(0.2,0.5,0.8,1.0和1.5毫克分子浓度)的正亮氨酸(NL)选择,建立了抗正亮氨酸的单倍体烟草突变细胞系(W02)。它离开选择剂转移培养29代(经历了23个月)之后,抗性仍然保持。它对4-氧赖氨酸或α-甲基色氨酸不表现交义抗性。它的游离蛋氨酸含量是其野生型的3倍以上。此外,它的过氧化物酶同工酶谱带活性呈现变异。从愈伤组织分化出再生植株,其染色体数目仍属单倍性。     

辐射诱变育成棉花高衣分品系

用60Coγ射线诱变陆地棉辽棉9号,按系谱法选育出品系中沪植PI935(简称PI935),它不仅具有原品种的良好性状(生育期、絮棉色泽、耐旱)而且比原品种衣分增高6个百分点,而纤维长度不减短、强度不降低,皮棉产量较高.在新疆南部经4年9个试验点次鉴定和区域试验,PI935比对照品种(军棉1号或新陆中5号)衣分平均增高10个百分点,皮棉产量多点次持平,生育期比对照品种平均晚近5天.PI935已收入国家作物种质资源库[统一编号ZM114274,品种(系)名称中沪植PI935].     

亚麻原生质体培养及植株再生

试验分别采用四个纤维用亚麻(Linumusitatissimum)品种7309,948,Belinka和Viking的无菌苗的茎尖为材料游离原生质体。以萌发10天的无菌苗茎尖游离获得的原生质体得率和活性最高,分别达到1．8×106／gFW和85．5％。以V-KM为培养基,采用琼脂岛法培养的原生质体,可在培养3天后发生第一次分裂,10天后统计细胞分裂频率为36％,20天后统计植板率达到5．2％。品种7309和Belinka再生的愈伤组织接种在均附加o．6mg/L6-BA和0．1mg／LNAA的B5-1和MS3固体培养基上,都有芽苗分化,并分别获得再生植株。品种Viking和948分别仅分化获得了不定根或叶状体。     

抗4-氧赖氨酸的烟草愈伤组织突变体质体超微结构的初步观察(简报)

用连续光照培养反复选择,从Wo分离出绿色(gy)与白色(W22)两系表现型。对OL的抗性和过氧化物酶同工酶酶谱两系未见显著差异。W22的赖氨酸含量较yg的低。yg的叶绿体含淀粉粒,同一细胞内未见含突变质体。在W22则未见叶绿体,而见造粉质体和突变的质体。