思茅松毛虫肠道真菌分离鉴定及水解酶活性初步研究

肠道微生物在昆虫的食物消化、免疫防御中发挥重要作用,但目前对昆虫肠道真菌了解不多。本研究以重要林业害虫—思茅松毛虫Dendrolimu kikuchii Matsumura为材料,分离鉴定其幼虫中的肠道真菌。采用传统微生物分离纯培养的方法从思茅松毛虫4龄幼虫肠道样品中分离肠道真菌,运用ITS序列分析鉴定,并对其产酶活性初步研究。经同源序列比对分析,思茅松毛虫4龄幼虫肠道中共分离得到12株真菌,分别属于德巴利酵母属Debaryomyces sp.,拟盘多毛孢属Pestalotiopsis sp.,青霉属Penicillium sp.,弯担菌属Curvibasidium sp.。产酶活性研究表明8株菌产纤维素酶,9株菌产淀粉酶,7株菌产脂肪酶,2株菌产蛋白酶。DKF-8产淀粉酶能力最高,酶活力是60.907 U/mL。DKF-10产纤维素酶能力最高,酶活力是14.276 U/g,菌株DKF-6产蛋白酶活力是5.561 U/mL,菌株DKF-8产蛋白酶酶活力是2.918 U/mL。思茅松毛虫4龄幼虫肠道真菌物种丰富度较低。本实验为未来深入研究思茅松毛虫肠道微生物功能提供了菌株材料。     

siRNA下调20S蛋白酶体β5亚基抑制立氏立克次体细胞内增殖

【目的】探究宿主20S蛋白酶体β5亚基(proteasome 20S subunit beta 5,PSMB5)对革兰氏阴性专性胞内寄生菌立氏立克次体胞内生长繁殖的影响。【方法】利用小干扰RNA转染Vero和THP-1宿主细胞,设置未转染细胞为空白对照组、无义小干扰RNA转染组为阴性对照组、PSMB5特异性小干扰RNA转染组为实验组,采用SYBR定量PCR和蛋白印迹法评价宿主细胞PSMB5变化水平;随后利用立氏立克次体以感染复数为0.1感染转染后细胞系,采用光镜观察、荧光显微镜观察和PCR定量方法检测细菌胞内繁殖变化水平。【结果】与si-NC阴性对照和空白对照相比,si-PSMB5能够显著降低宿主细胞PSMB5 mRNA转录水平和蛋白表水平;在随后立氏立克次体感染过程中,能够降低立氏立克次体的胞内细菌载量。【结论】下调宿主PSMB5基因表达能够抑制立氏立克次体胞内生长繁殖。     

他克莫司软膏联合氯雷他定片治疗特应性皮炎的临床疗效及机制研究

目的:研究他克莫司软膏联合氯雷他定片治疗特应性皮炎患者的临床疗效及可能机制。方法:选取2014年9月至2016年7月于我院就诊的特应性皮炎患者共计82例纳入研究,所有患者随机分成观察组(n=41)和对照组(n=41)。对照组患者采取氯雷他定片治疗,观察组患者在此基础上应用他克莫司软膏治疗。观察并比较两组患者的临床治疗效果、SCORAD评分情况、复发情况以及血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-3(IL-13)、干扰素(IFN-γ)及白细胞介素-7(IL-17)水平的变化和不良反应的发生情况。结果:观察组患者治疗后的临床总有效率明显高于对照组(P0.05)。两组患者皮损严重程度、皮肤病变范围、瘙痒和睡眠程度的评分以及总积分较治疗前明显下降,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后血清IL-4、IL-13以及IL-17水平均较治疗前显著下降,且观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);两组患者治疗后血清IFN-γ较治疗前明显升高,且观察组高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。观察组复发率显著低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:他克莫司软膏联合氯雷他定片治疗特应性皮炎能够有效提高其临床疗效,可能与其降低血清IL-4、IL-13、IL-17水平及提高IFN-γ水平,进而改善患者的免疫功能有。     

小麦维生素E基因TaHGGT-7AL的克隆与表达分析

从小麦( Triticum aestivum L.)品种‘科农199’籽粒中克隆出维生素E基因 TaHGGT-7AL 及其另外两个拷贝,通过生物信息学分析,对其序列结构特征及蛋白序列的系统发育关系进行了初步研究。结果显示: TaHGGT- 7AL 基因编码区长1227 bp,共编码408个氨基酸;TaHGGT-7AL与另外两个拷贝的序列一致性为95. 45%。TaHGGT-7AL蛋白序列具有9个α-螺旋,该序列与禾本科HGGT蛋白的同源性在58. 7%~ 98. 5%之间。3个 TaHGGT 基因分别位于小麦基因组的7AL、7BL和7DL染色体上,均具有与膜相关的UbiA异戊烯基转移酶家族的保守结构域和一个转运肽。系统进化分析结果表明,TaHGGT-7AL与禾本科植物的亲缘关系较近。qRT-PCR分析结果显示, TaHGGT-7AL 只在小麦颖壳和籽粒中表达,且在花后13 d籽粒的表达量最高。在ABA、4℃低温、干旱及黑暗胁迫处理下, TaHGGT-7AL 表达量上调;NaCl处理24 h后,该基因表达量升高,表明 TaHGGT-7AL 可以对非生物胁迫产生响应。     

ProEx C 在宫颈癌及其癌前病变中的表达及意义

目的:探讨ProEx C在宫颈癌及其癌前病变中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测ProEx C在不同宫颈病变组织芯片中的表达。结果:ProEx C在宫颈炎、CINI、CINII、CINIII及宫颈癌中的阳性表达率分别是25%,51.7%,77.9%,90%,93.8%,且其表达在宫颈癌及CINIII级病变与宫颈炎及CINI级病变相比较差异具有统计学意义(P<0.05),ProEx C在CINI级组织中表达低于CINII级,差异具有统计学意义(P<0.05),ProEx C在浸润性宫颈癌中的表达与临床病理因素无关(P>0.05)。结论:ProEx C反映了细胞的增殖活性,促进宫颈癌的发生发展,可作为诊断及监测预后的指标。     

石油烃类有机污染物对海洋浮游动物存活力的影响研究

浮游动物是各种经济鱼类的重要饵料,也是人们寻找渔场的标志,对渔业生产有很大的作用。石油等烃类有机物在人类的生产生活中扮演着重要的角色,然而其在开采、运输中发生的泄漏事故,给自然环境带来严重污染,并通过食物网传递、扩大,给生物带来巨大的伤害。本项目以沿岸海域常见浮游桡足类为研究对象,通过分析石油烃类有机污染物对其生殖的影响,来评价有机污染对海洋食物链及生态环境的破坏,为保护海洋环境,维持生态平衡提供理论支持。     

小麦γ-TMT基因的克隆与表达分析

γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是维生素E合成途径的关键酶之一。该研究采用RT-PCR方法,从小麦品种‘中国春’中克隆得到小麦γ-TMT基因的3个同源拷贝,其CDs(codingsequence)序列相似性为99.12%;其中Ta-γ-TMT-6A和Ta-γ-TMT-6B编码区长度为1101bp,编码366个氨基酸,而Ta-γ-TMT-6D因发生无义突变,编码365个氨基酸。生物信息学分析表明,3个蛋白分子量分别为39.58、39.53和39.50kDa,理论等电点分别为6.67、6.41和7.08,都属于亲水性不稳定非分泌型蛋白。系统进化分析表明,小麦Ta-γ-TMT蛋白与糜子Pm-γ-TMT的亲缘关系相对较近。实时定量PCR分析表明,小麦Ta-γ-TMT基因在根、茎、叶、颖壳、种子中均有表达,在叶片中表达量最高;ABA、NaCl、PEG均能诱导Ta-γ-TMT基因的上调表达。该研究结果为进一步探讨小麦γ-TMT基因的功能奠定了基础。     

军队医院聘用人员管理中的法律风险与防范对策

聘用人员是军队医院发展中不可缺少的支持力量,也为军队医院人力资源管理工作带来了一定的法律风险。从招聘录用、纪律管理、人事管理3个环节着手,分析了军队医院聘用人员管理中容易产生的法律风险,并提出了防范的具体措施。     

小麦维生素E基因TaHGGT-7AL的克隆与表达分析

从小麦（Triticum aestivum L.）品种‘科农199’籽粒中克隆出维生素E基因TaHGGT-7AL及其另外两个拷贝,通过生物信息学分析,对其序列结构特征及蛋白序列的系统发育关系进行了初步研究。结果显示：TaHGGT-7AL基因编码区长1227 bp,共编码408个氨基酸;TaHGGT-7AL与另外两个拷贝的序列一致性为95.45%。TaHGGT-7AL蛋白序列具有9个α-螺旋,该序列与禾本科HGGT蛋白的同源性在58.7%~98.5%之间。3个TaHGGT基因分别位于小麦基因组的7AL、7BL和7DL染色体上,均具有与膜相关的UbiA异戊烯基转移酶家族的保守结构域和一个转运肽。系统进化分析结果表明,TaHGGT-7AL与禾本科植物的亲缘关系较近。qRT-PCR分析结果显示,TaHGGT-7AL只在小麦颖壳和籽粒中表达,且在花后13 d籽粒的表达量最高。在ABA、4℃低温、干旱及黑暗胁迫处理下,TaHGGT-7AL表达量上调;NaCl处理24 h后,该基因表达量升高,表明TaHGGT-7AL可以对非生物胁迫产生响应。     

晶体氨基酸替代鱼粉蛋白对半滑舌鳎稚鱼消化酶和代谢酶活力的影响

为研究人工微颗粒饲料中晶体氨基酸替代鱼粉蛋白对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)稚鱼消化酶和代谢酶活力的影响,以晶体氨基酸混合物分别替代0%、25%、50%、75%和100%鱼粉蛋白(0%CAA、25%CAA、50%CAA、75%CAA和100%CAA),在25%替代水平设计棕榈酸甘油酯包被晶体氨基酸混合物组(C-25%CAA),配制实验微颗粒饲料。每种微颗粒饲料随机投喂三组实验鱼[初始体重(0.094±0.02)g,35日龄],每组实验鱼放养150尾,养殖周期28d。研究结果表明,在不包膜条件下,各处理组的胰蛋白酶活力随替代水平的升高显著下降(P0.05),且包膜处理组(C-25%CAA)与全鱼粉组无显著差异(P0.05)。肠段胰蛋白酶活力与胰段胰蛋白酶活力比值随氨基酸替代水平的升高显著下降(P0.05),鱼粉组显著高于75%和100%处理组(P0.05),但与25%处理组、包膜处理组(C-25%CAA)和50%处理组无显著差异(P0.05)。各处理组淀粉酶活力随替代水平的升高显著上升(P0.05)。亮氨酸氨肽酶(LA)和碱性磷酸酶(AP)活力(肠段与刷状缘)均随替代水平的升高显著下降(P0.05),包膜处理组(C-25%CAA)与全鱼粉组无显著差异(P0.05)。谷丙转氨酶(GPT/ALT)和谷草转氨酶(GOT/AST)活力随替代水平的升高显著上升(P0.05),50%、75%和100%处理组显著高于鱼粉组、25%处理组和包膜处理组(C-25%CAA)。研究结果显示,饲料中晶体氨基酸显著影响了半滑舌鳎稚鱼的消化酶和代谢酶活力,而且在25%的替代水平下,与未包膜组相比,包膜处理组能显著促进半滑舌鳎稚鱼消化系统的发育。