靶向survivin的siRNA对胃癌BGC-823细胞增殖和转移能力的影响

目的探讨沉默生存素（survivin）基因表达的干扰RNA对人胃癌BGC-823细胞增殖和成瘤能力的影响。方法应用已经在细胞上验证能够有效沉默survivin的小分子干扰RNA（shRNA-survivin-1）,并在体外实验的基础上,建立稳定表达干扰RNA细胞系,进一步探讨干扰RNA稳定表达对胃癌BGC-823细胞生长和裸鼠移植成瘤的影响。结果 shRNA-survivin-1有效沉默人胃癌BGC-823细胞survivin mRNA的表达,成功筛选shRNA-sur-vivin-1稳定表达细胞株BGC/siRNA-1细胞,实验表明,BGC/siRNA-1细胞的生长曲线缓慢上升,细胞增殖能力下降;BGC/siRNA-1细胞裸鼠移植成瘤体积与对照组相比,明显减小（P〈0.05）。结论 shRNA-survivin-1可以沉默survivin基因的表达,可以显著抑制胃癌BGC-823细胞的增殖,并降低胃癌BGC-823细胞的成瘤能力,本研究为靶向survivin的RNA干扰在胃癌的基因治疗提供了有力的理论依据和技术储备。 更多还原     

靶向survivin的siRNA对胃癌BGC-823细胞增殖的影响

目的探讨干扰RNA沉默生存素（survivin）基因表达对人胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并合成3条靶向survivin的小分子干扰RNA（siRNA）,构建表达性干扰RNA质粒（shRNA）——shRNA-survivin-1、shRNA-survivin-2和shRNA-survivin-3,分别转染胃癌BGC-823细胞,实时定量PCR检测干扰RNA沉默survivin mRNA表达效果,Westernblot观察对胃癌BGC-823细胞survivin蛋白质表达的抑制,MTT（四甲基偶氮唑盐）比色法分析检测细胞生长抑制率,流式细胞计数检测各组细胞周期和凋亡率,探讨干扰RNA对胃癌BGC-823细胞生长的影响。结果在体外,shRNA-survivin-1有效沉默人胃癌BGC-823细胞survivin mRNA的表达,使sur-vivin mRNA相对水平明显降低（P〈0.05）,survivin蛋白质表达抑制,72h细胞生长抑制率达74.92%（P〈0.05）,shRNA-survivin-1使G2/M期细胞百分比明显增加,凋亡率显著增加（P〈0.05）。结论 shRNA-survivin-1可以沉默survivin基因的表达,可以显著抑制胃癌BGC-823细胞的增殖,在一定程度上诱导其自发凋亡。本研究为靶向sur-vivin的RNA干扰在胃癌的基因治疗提供了有力的理论依据和技术储备。