超声提取枸杞叶总黄酮的工艺研究

目的：优选超声辅助提取枸杞叶总黄酮的提取工艺并探讨枸杞叶的合理采收时期。方法：分别研究乙醇浓度、乙醇用量、超声提取时间、超声时温度四个单因素对提取效果的影响,设计正交试验,所得结果采用方差分析。利用优选出的最佳超声提取工艺测定比较不同采收时期枸杞叶中的总黄酮含量。结果：确定了最佳单因素水平,通过正交试验法优选出超声辅助提取枸杞叶总黄酮的最佳工艺条件为乙醇浓度75％、乙醇用量1：40、超声提取时间30min、超声时温度50℃。结论：通过比较不同采收时期枸杞叶总黄酮的含量,发现总黄酮的含量随枸杞叶生长而下降,结合枸杞果园生产探讨得出枸杞叶合理采摘时期为4月上旬和11月中旬。     

洋常春藤HMGS基因克隆与表达分析

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGS)是MVA途径中的关键酶基因,其作用主要是催化乙酰辅酶A和乙酰乙酰辅酶A缩合成3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-Co A)。为分析洋常春藤HMGS基因在常春藤皂苷生物合成途径中的功能及调控机制,本研究利用RACE克隆技术克隆获得了洋常春藤HMGS基因c DNA全长序列并进行了生物信息学分析。结果表明:洋常春藤HMGS基因的c DNA全长1 751bp,命名为Hh HMGS(Gen Bank登录号:KX056075),其包含编码468个氨基酸的开放阅读框。预测该基因编码的蛋白质分子量为52.0 k D,理论等电点为5.99。氨基酸序列比对结果表明,洋常春藤中的HMGS与人参的HMGS同源性最高,达到95%。通过RT-q PCR分析Hh HMGS基因在洋常春藤中的时空表达规律,结果表明Hh HMGS基因与常春藤皂苷含量之间并未呈现出相关性。本研究为探讨HMGS基因在常春藤皂苷生物合成途径中的作用以及深入的研究该基因的分子调控机制奠定基础。