三株牛源亚洲1型口蹄疫病毒聊基因的克隆与序列分析

以3株国内分离的亚洲1型口蹄疫病毒（分别命名为F1、F2、F3）为研究目标,根据GenBank中注册的FMDV VP1基因的序列设计1对引物,采用RT-PCR方法成功地扩增出含有VP1全基因的片段,并测定了3个毒株VP1基因的序列。结果表明,3株亚洲1型FMDV毒株VP1基因长度均为633bp,编码211个氨基酸。3株毒株彼此之间的核苷酸序列同源性在82．8％～99．1％之间,雅导氨基酸序列同源性在89．1％～99．1％之间。从系统发生树看,F1株与我国香港2005年牛毒株序列同源性99．5％,属同一遗传谱系,F2株、F3株与2005年引起河北省万全县、北京市延庆县、甘肃静宁县疫情的毒株分属同一个基因群。     

空肠弯曲菌生物学特性上的一些歧异

对195例不同年龄腹泻患者的粪便、690只健康和腹泻畜禽的直肠和泄殖腔拭子及108份腹泻死亡畜禽的脏器材料进行了空肠弯曲菌培养,共分离鉴定458株弯曲菌(其中空肠弯曲菌445株、结肠弯曲菌13株),就其一些生物学特性进行了观察,采用Lior生物学分型法进行了354株弯曲菌(空肠弯曲菌352株、结肠弯曲菌2株)的分型。虽然表明绝大多数生物学性状符合已有文献描述,但也发现在形态、培养和生理生化特性及抗菌药抗性上存有一些歧异,其中最为主要的是483%(215/445)的空肠弯曲菌和231%(3/13)的结肠弯曲菌有萘啶酮酸抗性,11%(5/445)的空肠弯曲菌和76%(1/13)的结肠弯曲菌有噻孢霉素抗性,抗菌药抗性与菌株来源有关(P<0005)。352株空肠弯曲菌生物学分型结果表明在这些动物体内生物型Ⅰ(409%)和Ⅱ(582%)占优势,同一动物体内可有该菌的2个生物型分布。     

SPF鸡盲肠复合微生态制剂代替抗生素预防肉仔鸡沙门茵感染

目的在雏鸡盲肠尽快建立完整健康菌群,通过“竞争排除（Competitiveexclusion,CE）”抑制病原菌定植感染。方法提取SPF鸡盲肠菌群,排除沙门菌感染的可能,制成复合微生态制剂,在鸡胚孵化19d啄壳时和21d雏鸡全出壳时进行两次喷雾接种,监测鸡群沙门菌抗体和粪便中沙门菌,测定成活率、生产性能。结果进行喷雾接种后的小鸡至12日龄可以完全不使用抗生素,成活率、采食量与体重略高于使用抗生素的对照组,能提高饲料报酬,饲养12、24、35d均未检出粪便沙门菌和血液沙门菌抗体,全程无沙门菌感染。结论SPF鸡盲肠复合微生态制剂能代替抗生素预防肉仔鸡沙门菌感染。     

猪源冠状病毒TGEV中国分离株纤突蛋白生物信息学分析

以猪源冠状病毒(Porcine coronavirus) TGEV 纤突蛋白基因序列为基础,利用生物软件对TGEV中国分离株纤突蛋白进行N-糖基化位点、跨膜螺旋、进化树、二级结构及抗原位点的预测和分析.结果显示所有TGEV毒株可分为3个基因型,4株中国分离株分别归属于以上3个基因型,属于Ⅰ型的中国株TSX在跨膜螺旋的氨基酸及二级结构上与其他中国株有明显的差异,而同属于Ⅲ型中国毒株SC-Y和TH- 98在跨膜螺旋的氨基酸及二级结构上非常接近,而所有中国分离株抗原表位没有明显差别,表明TGEV在中国没有显著的变异.     

解脲和人型支原体定量检测与药敏的临床意义

目的了解解脲和人型支原体定量检测及其药敏的临床意义。方法采用法国生物梅里埃公司支原体鉴定与药敏试剂盒进行解脲和人型支原体的定量检测和药敏试验。结果85例非淋菌性尿道炎患者共检出解脲支原体52例（61．2％）,其中感染数量≥10^4CFU／ml的有30例;人型支原体检出23例（27．1％）,其中感染数量≥10^4CFU／ml的有10例;解脲和人型支原体感染数量≥10^4CFU／ml的患者,90．0％均有临床症状。解脲支原体对临床常用抗支原体抗生素敏感性较好的是强力霉素和四环素,但敏感率仅为60．0％。结论解脲和人型支原体感染数量的高低与其临床症状的有无有明显的相关性,临床上支原体感染的治疗应根据实验室的药敏结果选择合适的抗生素进行。     

猪源冠状病毒聚合酶基因的克隆及特性分析

参照GenBank中Purdue株序列对TGEV TS株聚合酶基因(ORF1)设计特异性引物,经RT-PCR扩增获得了20054bp的片段,与预期大小相符.TS株与Pur46-MAD株的ORF1核苷酸和氨基酸序列同源性分别为98.8%和99.0%,与FIPV、PEDV、HCV299E及SARS氨基酸同源性分别为88%、57%、57%和45%.不同冠状病毒比较结果显示RdRp有很高的保守性而且有重要的作用,序列分析标明TS株在ORF1a和ORF1b重叠区有核糖体剪切位点UUUAAAC,且相应区域RNA二级结构形成3个茎环结构.     

Asia1型口蹄疫病毒受体结合位点多样性

摘要：【目的】产甘油假丝酵母作为一株优良高产甘油菌株,已成功应用于工业生产15年。近年来由于产甘油假丝酵母染色体倍性尚不明确,限制了对其进行遗传改造的研究进展,因而我们对产甘油假丝酵母染色体倍性研究,分析确定其染色体倍性。【方法】选用酿酒酵母细胞进行生孢,制备酿酒酵母单倍体细胞作对照,并选用热带假丝酵母作为二倍体酵母细胞对照,利用血球计数板得到热带假丝酵母、产甘油假丝酵母、单倍体及二倍体酿酒酵母细胞数,提取染色体,通过二苯胺检测法测定DNA含量。由于在相同紫外照射条件下单倍体细胞比二倍体细胞更容易死亡,因     

虎源犬瘟热病毒P基因的遗传进化分析

根据GenBank中犬瘟热病毒基因组(Canine distemper virus,CDV)P基因序列,设计合成一对特异性引物,以虎源犬瘟热病毒的总RNA为模板,RT-PCR扩增P基因,并进行克隆与序列分析.结果显示,CDV虎源犬瘟热病毒P基因序列与GenBank中的10种不同毒株AY466011、AY964113、AF181446、AY386315、AF259549、AJ582385、AB212727、AB212962、AY130857和U53712的同源性分别为93%、95%、93%、91%、91%、95%、94%、96%、98%和93%,经过基因序列分析,发现聚合酶P基因包含了与10个病毒毒株共有序列的6个不同改变(change),其中位点2 243 C和位点2 465 A在虎犬瘟热毒株、AF466011毒株、AY130857毒株中保留,种系进化分析显示,三者的亲缘关系最近.表明位点2 243与2 465的点突变在犬瘟热病毒宿主闻的传播极其重要,P基因结构的稍微变化是导致病毒在不同寄主中增殖的活力改变的重要因素.     

猪源冠状病毒聚合酶基因的克隆及特性分析

参照GenBank中Purdue株序列对TGEVTS株聚合酶基因(ORF1)设计特异性引物,经RT-PCR扩增获得了20054bp的片段,与预期大小相符。TS株与Pur46-MAD株的ORF1核苷酸和氨基酸序列同源性分别为98.8%和99.0%,与FIPV、PEDV、HCV299E及SARS氨基酸同源性分别为88%、57%、57%和45%。不同冠状病毒比较结果显示RdRp有很高的保守性而且有重要的作用,序列分析标明TS株在ORF1a和ORF1b重叠区有核糖体剪切位点UUUAAAC,且相应区域RNA二级结构形成3个茎环结构。     

空肠弯曲菌肠毒素理化特性的研究

经ＳＤＳＰＡＧＥ 分析发现,空肠弯曲菌细胞紧张性肠毒素（Ｃｙｔｏｔｏｎｉｃ ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ ,ＣＥ） 的硫酸胺盐析粗提物除有一条６８ｋＤ 的带外,还有一些未分开的小分子物质,而经神经节苷脂ＧＭ１ 亲和层析后仅有６８ＫＤ 的一条带,即表明６８ｋＤ 的蛋白质为ＣＥ 的主要成分。ＣＥ 不耐热、ｐＨ 依赖和对胰酶有抗性。５６ ℃和６０ ℃加热３０ｍｉｎ 、１００ ℃加热１５ｍｉｎ 即可完全失活。其活性在ｐＨ６－０ 时最高,在ｐＨ３－０ 和９－０ 时均可使其完全丧失活性。在４ ℃保存超过３ｄ 后,其活性迅速降低。抗ＬＴ 血清能完全抑制ＣＥ 的活性。