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骨保护素 (OPG)成熟肽N端D1~D4结构域仅由 2个外显子编码 .以人基因组DNA作为模板 ,采用重叠延伸PCR得到N端D1~D4域编码序列 ,并在其上游引入 2×His密码子序列 ,然后克隆入载体pQE 30进行表达 ,SDS PAGE表明 8×His融合蛋白主要以包涵体形式存在 ,可被抗OPG抗体识别 .变性条件下通过Ni NTA金属螯合亲和层析对表达产物进行纯化后再经梯度透析进行复性 ,采用破骨细胞样细胞 (osteoclast likecell ,OLC)诱导分化实验来检测重组蛋白的生物活性 ,证实单核 巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)和破骨细胞分化因子 (ODF)可协同促进多核OLC的生成 ,但加入重组OPG片段后 ,OLC生成显著减少 . 相似文献
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微球体悬浮芯片技术及其应用 总被引:3,自引:0,他引:3
微球体悬浮芯片技术是继平面芯片(基因芯片,蛋白质芯片)之后的一种新型芯片技术。与平面芯片相比,具有高通量,快速,精确,操作简便等优点,在核酸,蛋白质等生物分子的大规模分析中具有巨大的应用潜力。 相似文献
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