低温保存脐带和胎盘组织的效果研究

目的:建立脐带和胎盘组织的低温保存方法,为自体化基因治疗和细胞治疗提供丰富的细胞储备。方法:取离体的脐带和胎盘,冲洗干净,以体积比20kg/m~3、15kg/m~3、10kg/m~3、5kg/m~3共4组浓度的DMSO作为抗冻剂,采用程序降温,至-80℃后转入液氮中保存,采用细胞培养与电镜扫描进行效果评估。结果:10kg/m3组组织低温保存效果最好,15kg/m~3组次之,5kg/m~3组效果最差,培养所得的胎盘组织来源的基质样细胞具有间充质干细胞的某些生物学特性。结论:低温保存脐带和胎盘组织切实可行,为自体基因治疗和细胞治疗提供了细胞储备。     

低温保存脐带和胎盘组织的效果研究

目的：建立脐带和胎盘组织的低温保存方法,为自体化基因治疗和细胞治疗提供丰富的细胞储备。方法：取离体的脐带和胎盘,冲洗干净,以体积比20kg／m3、15kg／m3、10kg／m3,5kg／m3共4组浓度的DMSO作为抗冻剂,采用程序降温,至-80℃后转入液氮中保存,采用细胞培养与电镜扫描进行效果评估。结果：10kg／m3组组织低温保存效果最好,15kg／m3组次之,5kg／m3组效果最差,培养所得的胎盘组织来源的基质样细胞具有间充质干细胞某些生物学特性。结论：低温保存脐带和胎盘组织切实可行,为自体基因治疗和细胞治疗提供了细胞储备。     

脐血间充质干细胞诱导向神经元样细胞分化的实验研究

目的:研究脐血间充质干细胞生物学特性及向神经元样细胞分化的潜能。方法:采用密度梯度离心结合贴壁培养法自脐血中分离间充质干细胞,观察细胞生长情况,描绘生长曲线,流式细胞仪检测细胞表面标志物,分别向成骨细胞、脂肪细胞、神经元样细胞进行诱导分化,通过茜素红染色、油红O染色检测脐血间充质干细胞成骨、成脂肪细胞诱导分化能力,而以免疫组织化学检测诱导后细胞表面神经标志物的表达。结果:纯化的脐血间充质干细胞贴壁生长,呈均一梭形,生长曲线呈S型,并以P3代增殖能力最强,细胞表面不表达或弱表达CD34、CD35、CD106,高表达CD29、CD44、CD105。成骨诱导2周后,可检测到钙化基质的形成,成脂肪诱导3周后,可检测到脂滴的形成。向神经元样细胞诱导分化后,可观察到典型的神经元样形态改变,且NSE、NF、GFAP阳性表达。结论:分离纯化的脐血间充质干细胞具有较强的增殖能力与分化潜能,并在体外诱导条件下可以向神经元样细胞定向分化。     

促排卵周期中未破裂黄素化卵泡综合征与性激素的关系探讨

目的:对未破裂黄素化卵泡综合征(LUFS)周期及正常排卵周期患者在不同时间性激素进行测定与比较,探讨LUFS的发生与性激素的关系。方法:对自然周期有排卵障碍的患者使用克罗米芬+HCG促排,分别在月经周期的第3天(C3)、第10天(C10)、卵泡成熟日(CM)(卵泡直径≥18mm)、尿LH阳性或注射HCG后48小时(CL)进行性激素测定,根据患者是否有排卵分为:正常排卵组(A组);未排卵出现LUFS组(B组)。选择同期自然周期正常排卵者为对照组(C组),同上法进行性激素测定。对A、B、C组患者不同时间的血清性激素进行比较。结果:1、FSH:在CM日A、B两组的促卵泡成熟激素(FSH)均低于C组(P<0.01)。2、LH:在C3、C10、CL日测定的A、B组LH值均高于C组(P<0.01),在CM日测定的A、B组LH值低于C组(P<0.01)。3、P:在CM日A、B两组的孕酮值低于C组(P<0.01);4、E2:在C3日测定的B组E2值低于C组(P<0.01),在CL日测定的B组E2值高于C组(P<0.01);5、PRL:在不同时间各组的PRL值均无显著性差异(P>0.05)。6、T:在不同时间各组的T值均无显著性差异(P>0.05)。结论:性激素在LUFS的发生中起重要作用,但以C3日E2值与LUFS的发生的关系最大,E2值低者易发生LUFS。     

脐血间充质干细胞诱导向神经元样细胞分化的实验研究

目的：研究脐血间充质干细胞生物学特性及向神经元样细胞分化的潜能。方法：采用密度梯度离心结合贴壁培养法自脐血中分离间充质干细胞,观察细胞生长情况,描绘生长曲线,流式细胞仪检测细胞表面标志物,分别向成骨细胞、脂肪细胞、神经元样细胞进行诱导分化,通过茜素红染色、油红O染色检测脐血间充质干细胞成骨、成脂肪细胞诱导分化能力,而以免疫组织化学检测诱导后细胞表面神经标志物的表达。结果：纯化的脐血间充质干细胞贴壁生长,呈均一梭形,生长曲线呈S型,并以P3代增殖能力最强,细胞表面不表达或弱表达CD34、CD35、CD106,高表达CD29、CD44、CD105。成骨诱导2周后,可检测到钙化基质的形成,成脂肪诱导3周后,可检测到脂滴的形成。向神经元样细胞诱导分化后,可观察到典型的神经元样形态改变,且NSE、NF、GFAP阳性表达。结论：分离纯化的脐血间充质干细胞具有较强的增殖能力与分化潜能,并在体外诱导条件下可以向神经元样细胞定向分化。