应用随机PCR方法鉴定一株真养产碱杆菌

采用随机引物PCR技术从新建细胞培养室空气中获得一段长414bp的片段,通过克隆测序及序列分析,结果表明所测序列与真养产碱杆菌主要参考菌株的同源性分别高达79%-83%,由其推导的氨基酸序列与真养产碱杆菌主要参考菌株的同源性高达86.4%-89.1%,从而确定所分离菌株为真养产碱杆菌。     

应用实时荧光PCR技术检测烟曲霉的初步研究

目的:根据烟曲霉Mtol基因特异位点设计并合成探针及引物,建立应用实时荧光PCR检测烟曲霉的方法.方法:通过对多种病原曲霉Mtol基因序列的比对分析,在烟曲霉特异位点设计引物及探针,并对其进行特异性及敏感性进行验证.结果:通过对曲霉属26株不同曲霉菌及其他属的6株不同病原真菌的特异性验证未发现有交叉反应,敏感性实验显示应用该方法可检出1.08 X 10-6μg/ml的模板DNA.结论:实验建立了应用实时荧光PCR技术检测烟曲霉的方法,该方法具有特异、灵敏、快速等特点并能有效避免普通PCR中的样品间交叉污染问题.     

用整合微流控芯片系统分析黄山松RAPD片段多态性

随机扩增多态DNA（randomly amplified polymorphic DNA,RAPD）标记可快速提供连锁信息,特别是在针叶树单倍体的大配子体中RAPD基因型也能得以确定［3］。在对多态性的RAPD片段进行分析时,传统的平板凝胶电泳分析法因人工操作,其有效的鉴别受到一定程度的限制,只能得到一些有关RAPD片段半定量信息。我们将整合微流控芯片系统作为一种新的工具运用于黄山松的多态性RAPD片段分析中。发现基于芯片的检测方法比琼脂糖凝胶电泳方法灵敏度更高,所需的样品量要少得多,所需的时间仅为其1/4。并且能自动对DNA片段进行定性、定量分析。它是一种高效、灵敏、迅速、重复性好的检测新技术。 Abstract:Randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) markers quickly provide linkage information［1~2］,especially in conifers where haploid megagametophytes can be used for genotyping［3］.Traditionally use of slab gel electrophresis results in qualitative data that can be manually manipulated to gain semiquantitative information about the polymorphic RAPD fragments.We have proposed the use of an integrated microfluidic chip-based system as a new tool in the analysis of polymorphic RAPD fragments.The chip-based method was found to be very sensitive,requiring much less sample and only quarter the time compared to the agarose gel method.The automated data analysis sizes and quantitates the DNA fragments,thus yielding a more thorough,reproducible,sensitive,and rapid analysis.     

新城疫病毒非编码序列的遗传演化趋势

【目的】探讨新城疫病毒全基因序列中非编码序列的分子演化规律。【方法】结合本研究室2012年自产蛋下降鸭群中分离测序的一株鸭源新城疫病毒全序列,从GenBank下载35株不同基因型新城疫病毒全长cDNA序列,获取非编码序列,分别绘制引导序列、尾随序列、F-HN及HN-L基因间隔序列(IGS)的遗传进化树,比较编码基因内5’及3’UTR序列核苷酸序列替代特点。【结果】非编码序列的长度及位置高度保守,而其核苷酸基因序列在不断发生变异,且变异趋势与编码基因序列相一致。【结论】新城疫病毒在整个基因组上编码和非编码序列同步发生变异。     

H9N2亚型禽流感病毒非结构蛋白(NS1)基因的克隆与表达

由于H9N2亚型禽流感对我国的养鸡业已造成了很大的损失,因而在我国许多养鸡场不得不使用H9N2亚型禽流感灭活苗[1],但由于灭活苗的使用,而增加了H9N2亚型禽流感的监测难度.因此,建立一种能区别自然感染鸡和疫苗免疫鸡的鉴别诊断方法已被提到日程上来.     

我国部分鸡源H9N2亚型流感病毒NSl基因序列分析

对1996年至2001年间自我国部分养鸡场发病鸡或死亡鸡分离鉴定的8株H9N2亚型禽流感病毒的非结构蛋白基因(NSl)进行了扩增和序列测定,并分析和比较了其核苷酸和氨基酸的同源性。结果表明：NSI基因核苷酸和氨基酸同源性分别为96．5％-99．5％和94.5-98．6％,说明NSl基因在遗传进化上高度保守,稳定遗传。与中国香港、韩国、巴基斯坦及人源H9N2分离株相比较,发现中国大陆的鸡源H9N2分离株的NSl基因在其羧基端缺少13个氨基酸。系统进化树分析表明,该8株病毒的NSl基因属于相同的进化分支,而且中国的早年分离株A／chicken／Beijing/1／94位于该进化分支的根部,暗示这些分离株的NSl基因是由A/chicken／Beijing/1／94演化而来;尚未发现NSl基因属于A/quail／HongKong／G1／97-1ike分支的分离株。同时,系统进化树也说明了我国的H9N2分离株与韩国、巴基斯坦等地的H9N2分离株隶属于不同的进化分支,H9N2亚型禽流感的发生和流行与地域有一定的相关性。     

N-乙酰半胱氨酸在改善糖尿病心肌病大鼠心功能中的机制研究

本研究以60只清洁级雄性SD大鼠为实验对象,通过分析健康大鼠(对照组)、Ⅱ型糖尿病大鼠(Ⅱ型糖尿病模型组)、不同剂量N-乙酰半胱氨酸治疗的Ⅱ型糖尿病大鼠(N-乙酰半胱氨酸低剂量组、中剂量组和高剂量组)的心功能、CHOP、NLRP3蛋白表达差异,来探讨N-乙酰半胱氨酸在改善糖尿病心肌病大鼠心功能中的作用机制。研究表明,糖尿病大鼠心功能参数及血流动力学参数存在明显的异常,心肌组织中PERK、CHOP、IL2、Bax、Caspase6、NLRP3蛋白表达明显升高而Bcl2的表达减弱非常明显,并且,与对照组以及Ⅱ型糖尿病的模型组相比,差异明显,差异有统计学意义(p0.05);而经N-乙酰半胱氨酸作用后上述异常指标明显恢复(p0.05),该结论表明抗氧剂N-乙酰半胱氨酸能通过抑制CHOP及NLRP3蛋白高表达来促进糖尿病大鼠心功能异常的改善。本研究揭示了N-乙酰半胱氨酸改善糖料病大鼠心功能的作用机理,为寻求有效治疗糖尿病的药物提供了理论支撑和研究方向。     

中国铗蠓属小蠓亚属的新种和新记录(双翅目:蠓科)(英文)

本文报道中国铗蠓属小蠓亚属8种铗蠓,其中长柄铗蠓F．（M.）longurius,相似铗蠓F．（M）similis,南来铗蠓F.（M.）notothena,叶茎铗蠓F.（M.）folipenis,双刺铗蠓F．（M.）bispinula和顶盖铗蠓F．（M）tegula是新种,黄腹铗蠓F．（M）flaviventris是我国新记录。制订了我国铗蠓属小蠓亚属分种检索表。     

海南省库蠓二新种(双翅目:蠓科)(英文)

本文描述在海南省发现的库蠓二新种:尖峰库蠓和开裂库蠓。     

铗蠓属一新亚属及其二新种（双翅目：蠓科）

记述发现于我国的铗蠓属Ｆｏｒｃｉｐｏｍｙｉａ１新亚属－－奇蠓亚属Ａｔｏｐｏｍｙｉａ ｓｕｂｇ．ｎｏｖ．及其２新种：奇异铗蠓Ｆ．（Ａｔｏｐｏｍｙｉａ）ａｔｏｐｉａ,ｓｐ．ｎｏｖ．和山地铗蠓Ｆ．（Ａｔｏｐｏｍｙｉａ）ｉｄａｅｕｓ,ｓｐ．ｎｏｖ．。模式标本保存于北京医学昆早标本馆。