人胎心肌原癌基因c-myc和jun表达的原位杂交研究

应用地高辛配体(digoxigenin)标记探针的原位杂交技术,检测了原癌基因 c-myc 和 jun在12例不同发育阶段的人胎心肌中的表达。根据胎龄,将其中9例分成三组,胎龄分别是16—17、23—24和27—28周,每组各3例。另外有32和36周及足月的大胎龄标本各例。杂交信号用图象分析仪(MIAS 300)分析处理。结果显示:c-myc mRNA 或 jun mRNA 的表达水平在3组心肌样本中的任意2组间的变化有差异显著性(P<0.01)结果表明,在胎儿早期,c-myc 和 jun 的表达都较高,随着胎龄的增加,其表达水平逐渐下降,在足月胎儿表达水平很低。结果提示,在人胎心肌的发育过程中,这两种原癌基因的表达均是一种下行调节方式,反应了 c-myc 和 jun 在心肌细胞的发育过程中与心肌细胞的生长密切相关。可能在心肌细胞的增殖与分化中起着重要调控作用。本研究也表明,地高辛配体标记探针的原位杂交技术具有灵敏度高,分辨力好和实验周期短等优点。对在体正常心肌发育的原癌基因表达的研究,有助于对正常心肌生长以及对心肌肥大发生的分子机制的了解。     

一种从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的简单电洗脱装置

我们设计了一种简单电洗脱装置,从琼脂糖胶中回收ＤＮＡ。该装置由两个带旋盖的小管、两块透析膜和一个凝胶屏障组成。在电场作用下,ＤＮＡ从凝胶中迁移出来,通过凝胶屏障进入由凝胶屏障和透析膜组成的回收小仓。用微量吸样器收集ＤＮＡ,乙醇沉淀和清洗。该法ＤＮＡ的回收率约８５％;回收的ＤＮＡ可用于基因工程常规实验。     

大鼠甲状腺毒症心肌肥大的细胞内钙离子分布的研究

采用人工大鼠腹腔注射Ｌ－甲状腺素３周、４周不等,发现实验组大鼠心肌细胞线粒体内有大量Ｃａ２＋沉淀物积聚,多呈弥漫性散在分布,亦可沿线粒体嵴呈线样排列。结果提示：细胞内Ｃａ２＋积聚和异常分布与细胞损害程度密切相关。     

c－Fos在培养的心肌细胞肥大过程中表达的免疫组织化学研究

实验选用ＳＤ乳鼠,取心尖作心肌细胞培养。实验组加血管紧张素Ⅱ（ＡｕｇⅡ）,对照组加等量生理盐水,加液后于２小时、１天、３天和第７天终止培养。利用ｃ－Ｆｏｓ的免疫组织化学技术检测Ｆｏｓ蛋白在两组中的表达强度。结果表明：①加液后２小时,加ＡｕｇⅡ组和加生理盐水组心肌细胞均呈阳性表达。②加液后１天、３天,实验组弱阳性表达,对照组未见表达。③加液持续作用７天后,加ＡｕｇⅡ组心肌细胞肥大已形成,可见胞体很大的心肌细胞呈强阳性表达,而加生理盐水组无表达、结果提示：ｃ－Ｆｏｓ基因可能参与心肌肥大的病理过程。