苏云金芽胞杆菌V4菌株cry杀虫基因的鉴定、表达及杀虫活性分析

旨在给生物防治提供更多的基因资源,以从本实验室分离的300株苏云金芽胞杆菌基因组为模板,利用cry1类全长通用引物进行PCR cry1类基因鉴定。经过PCR-RFLP鉴定出菌株V4含有cry1Ea基因,进一步研究发现该菌株还含有cry2Aa基因,并成功克隆到了这两个新基因,被Bt国际命名委员会正式命名为cry1Ea12和cry2Aa16。将两种基因在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,表达蛋白进行杀虫活性测定,结果表明两种蛋白杀虫活性不理想,但对试虫存在明显的体重抑制,而V4菌株蛋白具有较高的杀虫活性。     

人工合成根特异启动子SRSP的功能分析

根负责吸收水分和养分,是重要的植物组织,但易受生物及非生物胁迫,影响作物的生长发育和产量。设计合成根特异启动子,可为与胁迫相关的抗性基因在作物根部的功能研究及高效表达提供候选启动子。文中将4拷贝的根特异性顺式作用元件(OSE1ROOTNODULE、OSE2ROOTNODULE、SP8BFIBSP8AIB和ROOTMOTIFAPOX1)以串联排列方式设计合成了一个根特异性模块(pro-SRS),并与来自CaMV35S启动子的最小启动子融合,合成一个人工合成启动子SRSP。通过替换CaMV35S启动子将SRSP启动子克隆到pCAMBIA2300.1中以驱动GUS表达。将携带SRSP启动子的构建体通过农杆菌介导的方法转化到烟草中。GUS组织化学染色分析和实时PCR (RT-PCR)分析显示SRSP启动子在转基因烟草中赋予根特异性表达。说明顺式作用元件重复排列可实现启动子预期功能,本研究为理性设计植物组织特异启动子奠定了理论基础。     

部分国家和地区公立医院单体规模比较研究

目的 分析不同卫生服务体制的部分国家和地区公立医院单体规模状况,为我国公立医院单体规模发展提供借鉴依据。方法 采用文献研究与描述性分析方法比较不同国家和地区公立医院单体规模。结果 服务人口和功能定位对公立医院单体规模影响较大,公立医院的单体床位规模一般不会超过1000张,经济发达国家或地区公立医院的床位规模偏小,人员配备充裕。结论 把控我国公立医院的单体规模,促进医院规模向集约型方式转变。     

苏云金芽胞杆菌Vip3AaAdAa嵌合蛋白的构建及其杀虫活性分析

Vip3A类杀虫蛋白是一类新型杀虫蛋白,在氨基酸序列上与研究较为深入的Cry蛋白没有同源性,且昆虫受体结合位点与Cry蛋白也没有竞争关系。利用同源重组技术针对对甜菜夜蛾具有高活性的Vip3Aa39与无活性的Vip3Ad开展研究,成功构建了三个vip3AaAdAa型嵌合基因,将其转入大肠杆菌中表达嵌合蛋白Vip3AaAdAa1、Vip3AaAdAa2、Vip3AaAdAa3,并将这三种嵌合蛋白对甜菜夜蛾进行了杀虫活性测定。研究表明,三种嵌合蛋白对甜菜夜蛾具有杀虫活性,Vip3AaAdAa3蛋白的LC_(50)值比Vip3Aa39增加了1.4倍,Vip3AaAdAa1蛋白的LC_(50)值比Vip3Aa39增加了2.7倍,嵌合蛋白Vip3AaAdAa1和Vip3AaAdAa3的杀虫活性均低于Vip3Aa39;Vip3AaAdAa2的杀虫活性与Vip3Aa39差异不显著。     

慢性肝病患者会员制管理方法的探讨

探索慢性肝病患者的管理方式,通过肝病患者的管理提高患者治疗的依从性,从而提高患者的治疗效果,改善患者生活质量,降低肝病患者死亡率,为患者提供更完善的医疗管理服务,为慢性疾病的管理提供新的思路。

     

部分国家和地区公立医院社会医疗保险制度比较

通过对法国、德国、日本、韩国和我国台湾地区5个实行社会保险制度的典型国家或地区公立医院基本情况的梳理,总结以上国家及我国台湾地区公立医院规模、布局、结构和功能等现状。提出公立医院改革的建议：医院规模和布局建设应遵循公平、效率与适应性原则,不断优化公立医院布局,严格控制公立医院成本。     

实行全民卫生服务制度国家和地区公立医院功能研究

选取英国、香港、加拿大、印度、巴西五个国民卫生服务制度的国家或地区,梳理归纳这些国家公立医院的医院功能、区域分布、层级结构、总体数量和政府职责等。提出我国公立医院改革的建议：明确各级公立医院的功能,界定各级政府办医责任,建立良好的转诊机制。     

一串红胚胎发育过程中多胺含量的变化

选取发育正常和败育一串红(Saliva splendens)5个不同时期的胚胎,分别提取、测定多胺(精胺、亚精胺、腐胺与尸胺)的含量变化.通过比较一串红胚胎发育不同阶段多胺物质的变化规律,探讨多胺在一串红胚胎发育中的生理作用.结果表明,一串红的胚胎败育和胚珠中较低的多胺含量及其在发育进程中较大的降幅有关;在盛花期,胚胎发育的关键时期,正常胚珠中哑精胺的含量有一个明显的峰值,而败育的胚珠中则无,这表明亚精胺含量变化在胚胎发育中起关键调节作用.     

Bt新型基因sip的克隆、表达和生物信息学分析

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白对农业害虫有特异的杀虫活性,对环境无污染、对人畜无害,成为目前为止研究和应用最为广泛的生物杀虫剂.其中内毒素(insecticidal crystal proteins,ICPs)和营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal protein,VIP)研究范围广、技术成熟,而分泌期杀虫蛋白(Secreted insecticidal protein,Sip)相关报道较少.为进一步发掘我国苏云金芽胞杆菌的菌株资源和新型基因资源,从不同生态环境中分离出400株Bt野生菌株进行sip基因的克隆鉴定,其中Bt野生菌株QZL26扩增得到1 038 bp的碱基的序列,编码345个氨基酸,与Sip1A蛋白氨基酸序列同源性为91.83％.测序结果提交GenBank注册,登录号为JQ965994.     

我国公立医院功能、规模、布局、结构的历史回顾

通过对我国公立医院的规模、结构、布局、功能等方面进行文献研究,收集相关数据,客观呈现我国公立医院规模、结构、布局等发展的历史进程、现状,发现当前公立医院在规模、结构、布局等方面存在的问题,提出相应的建议：明确卫生体制的基本价值取向,合理调整卫生资源布局与结构,提高医疗卫生服务提供的公平与效率,加强政府的宏观调控和统筹规划及监管能力。