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24-脱氢胆固醇还原酶（DHCR24）具有抗氧化应激引起的细胞凋亡的作用,但其机制尚不清楚。先前的实验数据显示在细胞水平DHCR24可能具有清除过氧化氢的作用。在生物信息学方法预测的基础上,构建了以pIVEX2.4a为载体的人DHCR24基因及其两种功能域缺失的突变型重组表达载体pIVEX2.4a-DHCR24（野生型）、pIVEX2.4a-ORD（预测氧化还原功能域保留型）和pIVEX2.4a-CTR（碳端保留型）,通过体外快速翻译表达系统RTS500进行体外大量表达,经提纯得到各种DHCR24纯化蛋白。Fluoro CatalaseTM荧光过氧化氢酶体外检测实验首次证明野生型DHCR24具有较强的过氧化氢清除能力,且DHCR24-ORD突变型具有与野生型同等强度的过氧化氢清除活性,而DHCR24-CTR突变型则失去了此能力,提示DHCR24的氧化还原功能域在其清除过氧化氢作用方面起着重要作用。为了进一步研究其抗氧化应激作用的生理学意义,利用双重免疫荧光染色法对DHCR24在细胞内的定位情况进行了调查。 结果表明,DHCR24定位于内质网,提示其内质网的定位可能与其抗氧化应激作用有关。 相似文献
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首次从长白山温泉土中筛选得到了一株高产耐碱SOD的细菌,通过抑制剂试验确定了该菌所产SOD类型为Mn-SOD。通过形态特征、生理生化特征及16SrDNA基因序列分析,与芽孢杆菌Bacillus sp.MO6同源性高达100%,与地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis同源性为99%。根据地衣芽孢杆菌Mn-SOD序列,并结合GenBank中已发表的多种细菌Mn-SOD基因保守区,分别设计引物,PCR扩增获得600bp的Mn-SOD全基因序列和430bp的核心片段,克隆sodA全基因序列,构建重组质粒pMD18-SOD。 相似文献
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实践教学是生命科学类专业教学的重要组成部分和关键环节,对培养生命科学各专业人才起到至关重要的作用,构建科学、完善的实践教学体系是生命科学类专业人才培养的重要保障。探讨了生命科学类专业实践教学体系的构建,其中包括生命科学类专业实践教学改革的主要内容、实验实践教学平台建立、增强学生科研参与度、加强毕业论文的管理和考核、加强实践教学教师队伍建设等,总结了辽宁大学生命科学类专业实践教学改革的初步成果,为综合性大学生命科学类专业实践教学提供有益的借鉴,为综合型、应用型生命科学人才培养创造条件。 相似文献
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