不同周龄BWEL-SPF种鸡生理生化指标的测定

目的测定不同周龄的BWEL-SPF种鸡生理和生化指标,并对测定值进行t-检验。方法分别采用计数板法、血涂片法、血液全自动分析仪测定法、双缩尿法、溴甲酚绿法、酶比色法和硫氰酸汞比色法等测定了10、40和60周龄的雌、雄BWEL-SPF种鸡的生理生化指标,并对雌、雄差异进行了统计学分析。结果在所测定的生理生化指标中,不同周龄雌雄之间差异显著性表现项目不同,其中在10周龄时,只有总胆固醇（CHO）在雌、雄之间差异极显著（P〈0．01）;40周龄时,甘油三酯（TG）、在雌、雄之间差异极显著（P〈0．01）;总胆固醇（CHO）为雌、雄之间差异显著（P〈0．05）;60周龄时,出血时间（BT）、嗜碱性粒细胞（B）、单核细胞（M）、谷丙转氨酶（ALT）、葡萄糖（Glu）在雌、雄之间差异极显著（P〈0．01）,而凝血时间（CT）和甘油三酯（TG）在雌、雄之间差异显著（P〈0．05）．除此以外,其它生理生化指标在雌雄之间差异不显著。结论BWEL-SPF种鸡的生理和生化指标随周龄不同,在雌、雄之间的差异随之变化。     

变色树蜥消化道5-羟色胺细胞的免疫组织化学定位

用免疫组织化学ABC法,应用5-羟色胺(5-HT)特异性抗血清,对变色树蜥(Calotes versicolor)消化道内含有5-HT的内分泌细胞进行了免疫组织化学的定位研究和形态学观察。结果显示,5-HT细胞在变色树蜥消化道的各个部位均有分布,分布密度近似呈“M”形,其中以空肠分布密度最高,胃体次之,食管最低。5-HT细胞的形态多样,呈圆形、椭圆形、锥体形、长锥体形等,其中胃、幽门和直肠以圆形和椭圆形为主,小肠则以长锥体形为主,其细长突起指向肠腔或固有膜;细胞分布于上皮基部、上皮细胞之间、腺泡上皮细胞之间或固有膜内;多数细胞以内分泌功能为主,少数细胞具有外分泌功能。比较分析表明,5-HT细胞分布型可能与动物的食性有关。     

鸡贫血病毒凋亡素基因的可溶性融合表达及抗肿瘤活性分析

为获得高效可溶表达的鸡贫血病毒凋亡素基因(CAV-Apoptin),根据大肠杆菌密码子偏爱性优化CAV-Apoptin基因序列,将其连接到含msyB伴侣基因的pBCX载体上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,经SDS-PAGE鉴定后应用镍柱亲和层析纯化蛋白质,采用显微镜观察、CCK-8实验与DNA ladders测定其抗肿瘤细胞的活性。结果显示,成功构建大肠杆菌表达载体pBCX-CAV-Apoptin,在37℃正常培养条件下的大肠杆菌中得到大量可溶性表达产物,融合蛋白质分子量大小约为42 kDa,50 ml菌液即可获得1.5 mg左右的纯化重组蛋白,CCK-8实验结果显示纯化后的重组蛋白作用36 h后可对套氏淋巴瘤JEKO-1、REC-1细胞生长产生超过60%的抑制率;显微镜观察与DNA ladder实验证明重组蛋白可诱导JEKO-1、REC-1细胞的凋亡,对HUVEC没有诱导凋亡的作用。免疫印迹分析表明重组凋亡素对JEKO-1细胞诱导了Caspase-3的激活,而对Caspase-8的表达没有影响。研究表明融合蛋白msyB-CAV-Apoptin可达到高效可溶表达,且表达产物具有特异抗肿瘤活性。     

东方铃蟾消化道5-羟色胺免疫活性细胞的免疫组织化学定位

应用5-HT抗血清,以ABC(avidin-biotin-peroxidase complex)免疫组织化学方法,对东方铃蟾(Bombinaorientalis)消化道内的5-HT免疫活性细胞(5-Hydroxytryptamine immunoreactive cell,5-HT cell)进行了免疫组织化学的定位研究和形态学观察,并探讨其分布型的成因及细胞形态与功能的关系。结果表明,5-HT细胞在东方铃蟾消化道的各个部位均有分布,其中以胃贲门部分布密度为最高:(55.73±10.67)个/mm2;胃幽门部次之:(42.99±5.25)个/mm2;直肠部最低:(6.37±4.78)个/mm2。5-HT细胞的形态多样:圆形、椭圆形、锥体形、长锥体形等,其中食管和直肠以圆形和椭圆形为主,小肠部则以长锥体形为主,其细长突起指向肠腔或固有膜。细胞分布于上皮基部、上皮细胞之间、腺泡上皮细胞之间或固有膜内;胃贲门部、胃体及胃幽门部5-HT细胞主要分布于腺泡上皮之间,也有的分布于胃上皮之间;肠部5-HT细胞主要分布于肠上皮之间。提示了东方铃蟾5-HT细胞分布型的形成与各部位消化功能及其食性和食物组成有关;5-HT细胞形态与其内、外、旁分泌功能是相适应的。