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1.
基因组研究中全长cDNA克隆的策略   总被引:16,自引:0,他引:16  
全长cDNA的克隆是上前人类基因组研究中的一个重要方面,与大规模基因组测序相比较,cDNA测序克隆用相对较少费用获得更多的功能基因信息,故也是符合我国国情的基因组研究的主要方向。如何更加高交地获得新的全长cDNA,本文结合作者工作中的经验,对从全长文库的建立到全长cDNA的测序及克隆方法作了较为详细的介绍。  相似文献
2.
微生态调节剂整肠生治疗肝硬化腹泻临床观察   总被引:8,自引:0,他引:8  
肝性腹泻是肝硬化最常见的并发症之一 ,其发病率约为10 %~ 43.86 % [1 ]。腹泻的发作和持续 ,致使消化吸收障碍 ,营养物质的丧失 ,特别是蛋白质与维生素类的缺乏 ,可进一步加重肝脏病损 ;肝脏的病损加重 ,免疫功能下降 ,又常是导致腹泻的根本因素 ,给治疗带来困难。近年来 ,我们应用微生态调节剂整肠生治疗肝硬化性腹泻 32例 ,取得较为满意的临床疗效 ,现总结报告如下。1 材料与方法1.1 诊断依据 有明确肝硬化病史 ,便次增加 3次 /日或次数≥ 5次 /日 ,外观为稀水样黄色便 ,大便常规及培养均阴性。1.2 病例选择 所有病例均为 1997年 5…  相似文献
3.
将绿色荧光蛋白标记的嗜水气单胞菌(Ah4332^GFP)置模拟越冬水体(8-10℃)内,进行饥饿存活试验,用三种计数方法检查水体中的细菌数量变化,在41d后平板计数法(PC)降至0。而细菌总数法(DC)和活菌直接计数法(DVC)结果相似,只是DVC计数结果低于细菌总数1-2个数量级,显示细菌已经变成活的非可培养(Viable but nonculturable,VBNC)状态,复苏试验表明,升高温度、添加鱼血清或新鲜培养的Ah4332^GFP细菌上清及通过兔肠管结扎,均使VBNC状态的Ah4332^GFP得到复苏,荧光显微镜和电镜观察处于可培养的VBNC状态的Ah4332^GFP,后者的细菌细胞比前者体积明显缩小,形态由杆状变成了球形,但细胞膜和细胞壁是完整的,不是细菌L型。  相似文献
4.
长效益生素菌株的筛选及生产工艺的初步研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
益生素是一种能够替代抗生素的绿色饲料添加剂。报道了通过对益生素菌种的初筛和复筛、菌株药敏实验、菌体吸附方法及产品的中试研究 ,确定了生产工艺 :采用筛选的地衣芽孢杆菌YS 0 2 ,在特定的培养基和培养条件下 18~ 2 2h ,通过 10 %CaCO3 吸附、过滤、干燥获得微生态制剂 ,其活菌数≥ 15 0亿 / g。实验证明 ,YS 0 2活菌制剂可替代抗生素防治动物习惯性腹泻。  相似文献
5.
益生素在饲料中的应用   总被引:6,自引:0,他引:6  
1 抗生素的局限性和负面效应自Domagk 1935年发明磺胺类药物、Cliain等194 0年证实青霉素可以作为一有效的化学治疗剂以来 ,抗菌药物的研究、筛选、合成及应用发展迅速 ,随后进入“抗生素时代”。 195 0年 ,美国食品与药物管理局 (FDA)首次批准抗生素用作饲料添加剂后 ,世界各国相继进行抗生素的饲喂试验 ,并用于生产。5 0a来 ,抗生素对防治动物疾病、促进动物生长、提高畜禽产品产量等方面起到了积极作用 ,对饲料工业和畜牧业的发展做出了不可磨灭的贡献。但随着饲用抗生素的普及 ,其副作用也逐渐突出 ,滥用抗生素给人类…  相似文献
6.
用绿色荧光蛋白基因(GFP)标记嗜水气单胞菌4332株(Ah4332^GFP),检测其在温暖水体中的存活及稳定性。在灭菌自然塘水中,Ah4332^GFP存活47d之久,该菌浓度随时间而变化,呈现两个峰值;在非灭菌自然塘水中,Ah4332^GFP存活18d,该菌浓度均随时间延长呈下降趋势。表明Ah4332^GFP和天然细菌之间的相互作用影响其稳定性。用M9培养基检测Ah4332^GFP质粒的稳定性,结果显示在传代培养40、70代后,质粒稳定率分别保持在47.3%和20.5%。可见pGFP是一种相对稳定的质粒,Ah4332^GFP可用于微生物生态的研究。  相似文献
7.
地衣芽孢杆菌对养殖水体氨氮、残饵降解特性研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
试验对从健康养殖大黄鱼肠道中分离筛选到的一株益生地衣芽孢杆菌X3914的氨氮、残饵降解特性进行了研究。结果表明,X3914菌株降解氨氮的最适温度、盐度和pH分别为30℃、2.0%和7.0,在氨氮初始浓度为100 mg/L时,24h内的氨氮降解率达到36.2%。通过向添加1%饲料的大黄鱼养殖用水中接种1%和5%(体积比)的菌量(菌浓度约为9.0×108 cfu/L)来研究地衣芽孢杆菌浓度对降解饲料中蛋白质、淀粉的影响。结果表明,接种5%菌量的降解率均高于1%菌量的降解率,其中,48h内接种5%菌量的蛋白质和淀粉的降解率分别为35.2%和52.6%。X3914菌株具有较好的氨氮、饲料蛋白质和淀粉的降解能力,在水产养殖上具有潜在的应用价值。  相似文献
8.
 为建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的结核分枝杆菌DNA定性定量检测方法 ,以TaqMan探针技术为基础 ,运用TaqMan MGB探针 ,实时检测临床标本中的结核分枝杆菌DNA .用来自临床标本的DNA及克隆于载体的IS6 1 1 0序列检测所建立方法的有效性 .结果显示 ,所建立方法的最低检测限度为 1个基因拷贝 反应 ,在每反应 1 0 0 ~ 1 0 8拷贝范围内 ,Ct 值同DNA量的对数呈线性关系 .同一模板不同时间或同一时间不同管内扩增 ,所得Ct 值恒定 .用该方法检测 37例结核分枝杆菌培养阳性的痰液标本 ,敏感度为 1 0 0 % ;用该方法检测 1 6例TB系列阴性参考品 ,特异性为1 0 0 % .结果表明 ,所建立的方法是用于结核分枝杆菌定性定量检测较理想的方法  相似文献
9.
新型MGB探针在沙眼衣原体实时PCR检测中的应用   总被引:3,自引:0,他引:3       下载免费PDF全文
为建立基于TaqMan-MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测方法,探讨其临床应用价值,用 PCR法扩增沙眼衣原体隐蔽质粒pLVG440 2 464~2 980 nt段,并克隆入pMD18-T载体用作参比模板,设计一对引物和一个TaqMan-MGB探针,优化反应条件,建立沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,并运用该系统同时应用连接酶链式反应(LCR)法对临床标本进行检测.结果显示所建立的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,最低检测限度为1 DNA拷贝每反应;在100~109 DNA拷贝每反应范围内,Ct值(每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数)和DNA拷贝数呈线性关系(r>0.990);对临床标本检测结果同LCR分析结果吻合率为100%.以上结果表明,所建立的基于TaqMan-MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统具有敏感性高、特异性强和线性检测范围广等特点,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选.  相似文献
10.
一株脱色真菌的鉴定及脱色特性的初步探讨   总被引:3,自引:1,他引:2       下载免费PDF全文
从废水环境中分离筛选到一株高效染料脱色真菌, 根据形态学及显微特征初步鉴定为泡盛曲霉(Aspergillus awamori), 命名为Asaw117; 从偶氮类、蒽醌类和氧醌类中选取8种不同染料进行脱色分析表明, 该菌株对0.1 g/L蒽醌类染料还原蓝RSN的脱色率可达100%; 采用不同培养基及不同种类碳氮源进行试验比较, 菌株在查氏培养基中生长慢, 但脱色效果最好, 在马铃薯培养基中生长旺盛, 脱色效果次之。此外, 菌株Asaw117能利用还原蓝RSN作为氮源, 但不能利用其为碳源; 几种碳氮源组合实验中, 菌株在蔗糖、硝酸铵组合的査氏培养基脱色效果为好。因此对处理印染废水具有较好的应用潜力。  相似文献
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