提高农杆菌基因转化率方法的研究

通过甘蓝型油菜带柄子叶转化过程中转化受体是否进行预培处理、转化前菌液的对数浓度确定以及合适的再生筛选体系的摸索,研究了提高农杆菌基因转化效率的方法。试验结果表明：转化受体经过MD培养基3d的预培处理,用处于对数生长期OD600为0．6～0．8的菌液稀释至所需浸染浓度,浸染所需时间共培后,转入降低卡那霉素浓度的初筛分化培养基中,再经过后期较高浓度的卡那霉素继代筛选培养,大大提高了转化后卡那霉素抗性绿苗的得率。此研究不仅优化了油菜的转化体系和提高了油菜的转化效率,而且为农杆菌转化其它不同物种的受体材料提供了可指导的借鉴。     

红花不定芽的诱导研究

目的:对新疆主栽红花品种新红花4号进行组织培养,研究了外植体、植物激素、光照强度及苗龄等因素对红花不定芽诱导的影响。结果:不同的外植体分化能力及对激素要求差异较大。胚根不定芽诱导率高于子叶,胚轴未见不定芽分化,胚根在MS 6-BA 2.0mg·L-1的培养基中不定芽诱导率最高,子叶在MS 6-BA 1.5mg·L-1 NAA 0.5mg·L-1激素组合中不定芽诱导率较好。7日龄胚根诱导不定芽优于3日龄和10日龄不定芽诱导效果,弱光条件对不定芽的诱导略优于强光。结论:优化了新红花4号不定芽培养条件,为其良种快速繁殖、遗传转化等奠定了基础。     

油菜试管苗玻璃化发生机理的研究初探

研究了影响甘蓝型油菜离体下胚轴再生过程中试管苗玻璃化产生的几个因子,试验发现:调整激素6-BA与NAA的浓度、增加蔗糖的浓度提高渗透势对玻璃化无影响;降低培养基中NH4 浓度不仅没有有效地防止玻璃苗的发生反而降低了芽的诱导率;采用牛皮纸代替聚乙烯塑料膜作为封口材料的措施受到了地区的限制,没有得到有效的统计数据;选择1%的琼脂浓度可使玻璃化率显著降低55%,但诱芽率在一定程度上降低了6.9%。