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文章旨在建立一种种子序列介导的可控遗传操作—microRNA靶基因指纹图谱(MicroRNA targets fingerprint,MTFP),用于在基因表达检测中筛选与特定microRNA相关的靶基因。在设定上游种子序列的互补序列和下游锚定序列的基础上添加特殊接头,通过反转录和特殊二步PCR将microRNA的靶基因扩增;扩增后的microRNA靶基因在聚丙烯酰胺凝胶电泳中检测其片段大小和表达丰度,用于筛选在不同生理状态或试验条件下特异表达的基因;特定的靶基因序列通过DNA回收和测序方法得到。以miR-203为例,在不同生理状态的山羊皮肤样品中获得了5条大小分别为718 bp(JN709494)、349 bp(JN709495)、243 bp(JN709496)、156 bp(JN709497)和97 bp(JN709498)的靶基因序列。MTFP经济适用、可操作性强,可用于探索microRNA调节的靶基因,或用来评估靶基因的表达谱特征。 相似文献
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螺旋粉虱产卵分泌物所圈定的叶片范围可阻碍一些植食性昆虫如香蕉网蝽的取食。本文采用叶碟法测定了螺旋粉虱产卵分泌物中的芳香酯类、酚类和烷烃类物质对香蕉网蝽5龄若虫的拒食活性。结果表明:在10mg·mL-1质量浓度下,邻苯二甲酸二丁酯表现出较强的拒食活性,其次为3,5-二(1,1-二甲基乙基)-4-羟基苯丙酸甲酯、邻苯二甲酸正辛酯和正十六烷,4,4’-亚甲基双(2,6-二叔丁基苯酚)则没有拒食活性;浓度梯度试验显示,邻苯二甲酸二丁酯对香蕉网蝽若虫的拒食活性随浓度增大而增强,拒食中浓度为0.929mg·mL-1;表明螺旋粉虱产卵分泌物中的芳香酯对一些植食性昆虫有很强的拒食活性,同时为植食性昆虫种间竞争关系提供了理论依据。 相似文献
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目的 调查皮肤软组织感染病原菌的种类及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据.方法 利用WHONET 5.6对2009年1月至2011年12月皮肤软组织感染患者脓液或分泌物细菌培养及药敏试验结果进行回顾性分析.结果 共分离菌株444株,金黄色葡萄球菌(SAU)分离率居第1位,171株占38.5%;表皮葡萄球菌居第2位,54株占12.2%;铜绿假单胞菌第3位,43株占9.7%;头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、亚胺培南和美罗培南对革兰阴性杆菌有较好的抗菌活性(耐药率≤3.3%);金黄色葡萄球菌对青霉素和红霉素的耐药率为93.6%和65.0%,对呋喃妥因、利奈唑胺、利福平、莫西沙星和左旋氧氟沙星耐药率为0%、0%、1.4%、2.2%和9.3%,未检出万古霉素耐药株;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率25.7% (44/171);MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对氨苄西林/舒巴坦、利福平、莫西沙星三种药物的敏感性差异有统计学意义.结论 引起皮肤软组织感染病原菌以阳性球菌尤其是金黄色葡萄球菌为主,临床上应尽量根据药敏试验结果选用抗生素,合理用药. 相似文献
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MiRNA是真核生物体内约由22个核苷酸组成的内源性非编码单链RNA,可调节基因转录。它通过其5’非翻译区(UTR)与目标mRNA的3’端非翻译区相结合,从而抑制后者的转录后翻译和降解,进而调节一系列生物学过程,包括生物体生长、发育和疾病等。研究表明,miRNA在干细胞分化、肿瘤形成、血管发生、内耳形成等过程中均发挥重要作用,已成为调节生物学过程的核心因子。伤口愈合是一个与多种类型细胞、细胞因子及细胞外基质相关的过程,它受机体多种因素紧密调控。伤口愈合过程一般被分为三个阶段:炎症反应期,肉芽生长期和组织重建期。已有大量证据证实miRNA在皮肤创伤愈合过程中发挥重要作用,并且miRNA在不同的愈合阶段发挥不同的作用。本文就miRNA在皮肤形态、胎儿无痕愈合及成人伤口愈合各环节中的作用做一综述。 相似文献
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报道1例由小孢根霉变种导致的皮肤毛霉病.患者女,30岁.因患急性早幼粒细胞白血病,化疗后继发口腔颌面部小孢根霉变种感染,表现为发热、右侧颊黏膜水肿,皮损中央溃疡、焦痂,周边组织炎性水肿,以面颊部、颌下区为中心明显肿胀,逐渐累及右侧颈部及右下颌,进行性加重.坏死组织涂片镜检显示有粗大、无分隔直角菌丝,真菌学检查鉴定为小孢根霉,分子测序证实为小孢根霉变种.给予两性霉素B、伊曲康唑静脉滴注和手术清创,坏死组织连续3次真菌培养均未培养出小孢根霉变种,患者体温逐渐恢复正常,治疗2周后颔面部肿胀明显减退,浅表淋巴结未触及肿大,4周后额部及右眼睑肿胀已完全消退,伤口结痂愈合.随访2 a,右侧颌下可见长约2 cm手术疤痕,未见皮肤毛霉病复发. 相似文献
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目的建立一种稳定的通过小鼠皮肤移植获得小鼠记忆T细胞的方法。方法以C57BL/6小鼠为受者、DBA/2小鼠为供者行皮肤移植;同时行C57BL/6小鼠行同种同系皮肤移植做对照。术后1-8周,每周取小鼠脾脏,使用流式细胞仪检测所有受体鼠脾单个核细胞悬液中记忆T细胞的比例(n=10)。结果(1)同种异系皮肤移植组:术后第4周的C57BL/6小鼠脾单个核细胞悬液中记忆T细胞的比例较术后1~3周显著增多(P〈0.01);术后5~8周的记忆T细胞比例较术后第4周显著增多(P〈0.01);术后1~3周小鼠记忆T细胞比例无差异(P〉0.05);术后5~8周小鼠记忆T细胞比例无差异(P〉0.05)。(2)同种同系皮肤移植组:术后8周,每周产生的记忆T细胞比例无差异(P〉0.05)。结论接受同种异系皮肤抗原刺激4~5周后,小鼠记忆T细胞发生稳态增殖,此模型可以稳定的获得小鼠记忆T细胞。 相似文献
99.
目的:探讨PTEN和β-cat在尖锐湿疣、Bowen's病和皮肤鳞癌中的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测蛋白PTEN和β-cat在正常皮肤、尖锐湿疣、Bowen's病、皮肤鳞状细胞癌(Scc)中的表达。结果:在正常皮肤、尖锐湿疣、Bowen's病、皮肤鳞状细胞癌(Scc)中PTEN蛋白的高表达率分别为100%,80.95%,46.67%,36.67%;β-cat蛋白的异常表达率分别为16.67%,30.16%,53.33%,70.00%,与正常皮肤组织相比,Bowen's病及Scc中PTEN蛋白的高表达率表达下降(P〈0.05,P〈0.01);β-cat蛋白的异常表达率明显升高(P〈0.05,P〈0.01)。在Scc中两者的表达呈负相关(r=-0.416,P〈0.05)。结论:蛋白PTEN、β-cat在Scc的发生、发展中有重要的意义。 相似文献
100.
水稻化感品种根分泌物中非酚酸类化感物质的鉴定与抑草活性 总被引:41,自引:4,他引:37
水稻化感品种能从根系分泌释放化感作用物质 ,长期以来 ,酚酸类物质被认为是水稻根分泌的主要化感物质 ,但这一结论常常被质疑。利用连续循环和直接树脂吸收两种方法采集典型的水稻化感品种 PI31 2 777幼苗的根分泌物 ,并用液相色谱 /质谱(L C/ MS)联用技术鉴定了根分泌物中的非酚酸类物质。结果显示 ,水稻 PI31 2 777幼苗根系能分泌释放 7-甲氧基羟基肟酸、羟基肟酸、3-异丙基 - 5 -乙酰氧基环己烯酮 - 1、5 ,7,4′-三羟基 - 3′,5′-二甲氧基黄酮、二萜内酯 A和二萜内酯 B6个非酚酸类化合物。经液相色谱 (HPL C)定量分析 ,这些化合物在水稻生长 1 0 d的根分泌物中的浓度为 5~ 1 9μmol/ L。进一步的生测结果显示 ,这些化合物在其释放的浓度范围能对稻田常见的稗草和异型莎草有抑制活性 ,尤其是这些化合物的等摩尔混合物的抑草活性增加 ,同时水稻根分泌物的抑草活性与土壤载体显著相关。表明羟基肟酸、环己烯酮、黄酮和二萜内酯四类非酚酸类物质是水稻的主要化感物质 ,这与近期愈来愈多的研究结果一致 相似文献