细粒棘球蚴AgB8/2基因的原核表达及免疫学鉴定

旨在克隆细粒棘球蚴 AgB8/2基因,优化原核表达体系,鉴定纯化蛋白并初步确定其诊断价值.采用 RT-PCR扩增 AgB8/2基因 cDNA,构建原核表达载体pET-AgB8/2并在大肠杆菌 BL21(DE3)中表达,优化表达条件.纯化的AgB8/2融合蛋白经 Western blot鉴定正确后,采用斑点免疫金渗滤法初步验证其血清学诊断价值.结果显示,克隆的 AgB8/2基因包含了 273 bp的完整ORF,序列分析表明与其它已报道的AgB8/2 cDNA序列的同源性在 99%～100%之间.优化的表达条件为,当菌液 OD600值为0.6时,加入终浓度为0.05 mmol/L的 IPTG,37℃,振荡培养5 h.纯化的蛋白经 Western blot鉴定为目的蛋白.克隆的 AgB8/2基因高度保守,原核表达载体pET-AgB8/2构建正确并高效表达可溶性融合蛋白,可作为特异性抗原应用于斑点免疫金渗滤法检测血清抗体.     

基于圣吉模型的医院学习型组织构建实践研究

以基于圣吉模型构建医院学习型组织为目的，概述学习型组织理论，研究2004—2009年，在北医三院第二门诊部，采用针对管理层的个人深入访谈、针对普通医务人员的小组焦点访谈、查阅科室相关记录等定性调查方法，了解各阶段的现存问题、建立模型并实施、评价。展示基于圣吉模型的学习型组织的构建、实施方法与途径，展示职工工作满意度、门诊量、外聘员工稳定性、医患关系、科室形象等均有所提高。基于圣吉模型的学习型组织建立适合科室发展，并能更好地指导医院或科室在新医改大形势的环境下得以良好发展。