尾巨桉胚状体诱导及愈伤组织差异研究

以尾巨桉优良无性系无菌苗茎段为外植体,通过对多种不同浓度生长调节剂组合的优化,进行胚状体诱导研究;并对胚性与非胚性愈伤组织进行形态解剖学观察、相关生理指标检测以及相关基因荧光定量PCR分析,以揭示尾巨桉胚性愈伤组织非胚性化发生的机理,为建立尾巨桉体细胞胚胎再生体系提供参考。结果表明:(1)胚性愈伤组织在MS+0.1mg/L NAA+0.01mg/L TDZ培养基中诱导得到胚状体,外植体经过0.5mol/L蔗糖处理12h有助于胚性愈伤组织产生胚状体,胚状体最高发生率为16.7%。(2)尾巨桉胚性与非胚性愈伤组织石蜡切片观察发现,两者的细胞形态特征存在明显的差异,胚性愈伤组织细胞体积小,排列紧密,表现出典型的胚性细胞特征,而非胚性细胞比较大,排列疏松,细胞呈不规则形状。(3)生理生化指标检测结果表明,非胚性愈伤组织中蛋白质含量、SOD、PPO及CAT活性均显著低于胚性愈伤组织,非胚性愈伤组织中木质素、可溶性糖含量以及PAL和POD活性要高于胚性愈伤组织,二者的反肉桂酸4-单加氧酶基因、淀粉磷酸化酶基因、谷胱甘肽硫转移酶基因、葡萄糖-1-磷酸腺苷酸转移酶基因、葡萄糖六磷酸异构酶基因、分支酸合酶基因以及苯丙氨酸解氨酶基因表达差异也达到显著水平。     

青海湖裸鲤HIF-2α基因的克隆及其ODD功能域羟化分析

目的：克隆青海湖裸鲤低氧诱导因子-2α（HIF-2α）完整编码区,并分析HIF-2α ODD域与脯氨酸羟化酶3（PHD3）的相互作用。方法：通过RT-PCR与RACE克隆青海湖裸鲤H1F-2α基因序列,GSTpun-down法分析HIF-2α ODD域能否与PHD3相互结合。结果：获得的青海湖裸鲤HIF-2α eDNA序列长为3013bp,其中开放阅读框（0RF）为2502bp。GSTpull-down分析表明,HIF-2α ODD域羟化后能与PHD3形成酶／底物聚合物。结论：青海湖裸鲤HIF-2αODD域没有发生类似HIF-1α的羟化位点变异,能够被PHD3正常识别并结合。     

番茄红素对高糖所致内皮祖细胞功能障碍的保护作用及机制初探

本文阐述了番茄红素对高糖所致人外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能障碍的影响,并探讨了其可能机制。EPCs分为空白对照组、高糖组、番茄红素10、30、50μg/mL低、中、高剂量和信号阻断剂(1μmol/L SB203580)组,用33 mmol/L葡萄糖诱导EPCs损伤,分别采用MTT比色法、黏附能力测定实验、改良的Boyden小室检测EPCs黏附、迁移能力,Matrigel成血管网实验评价体外小管形成能力,Western-blot检测磷酸化和非磷酸化p38 MAPK蛋白表达量。实验表明番茄红素可改善高糖环境下EPCs黏附、迁移和体外小管形成能力,其机制可能与番茄红素抑制EPCs中p38 MAPK激活有关。     

AG490 上调 BATF2 表达抑制淋巴瘤细胞增殖 *

摘要 目的： AG490 作为 JAK2/STAT3 通路的抑制剂, 在对肿瘤细胞的抑制作用上所展现出的高效低毒性, 使其有望成为临床上 治疗肿瘤的一种可能的药物。 然而, AG490 的抗瘤机制尚未明确。因此, 本文拟对 AG490 抑制淋巴瘤细胞增殖的效应及其作用机 制进行进一步探讨,为 AG490 应用于临床提供实验依据。方法： 用不同剂量的 AG490 处理淋巴瘤细胞 （Namalwa 和 JeKo-1 ） 、 JurkatT 淋巴细胞性白血病细胞和 THP-1 单核细胞性白血病细胞 24 小时, CCK-8 法检测 AG490 (0 μM、 2 μM、 20μM、 50μM、 200μM)对上述细胞的增殖抑制作用, 实时定量 PCR 法检测 BATF2 mRNA 的变化, Western blot 法检测其蛋白水平的变化, 细胞转染 siRNA 法抑制 BATF2 表达后 CCK8 法检测 AG490 对 Namalwa 细胞的增殖抑制效应。结果： AG490 呈剂量依赖性地抑制 Namalwa、 JeKo-1、 Jurkat 细胞的增殖(P<0.05), 同时上调其 BATF2 mRNA 水平和蛋白水平的表达(P<0.05)。对于无显著抑制作用的 THP-1 细胞, BATF2 的表达亦未见升高(P>0.05)。siRNA 法抑制 BATF2 基因表达后, AG490 对 Namalwa 细胞的增殖抑制效果明 显降低(P<0.05)。 结论： AG490 杀肿瘤细胞的效率与其诱导的 BATF2 的表达呈正相关, 抑制 BATF2 的表达后 AG490 抑制肿瘤细 胞增殖的效率明显降低。因此, AG490 可能是通过上调 BATF2 表达的方式抑制淋巴瘤细胞增殖。这意味着 BATF2 是 AG490 杀 伤淋巴瘤细胞的作用靶点, 可能为新药的开发做出一定的贡献。     

胆囊癌组织中IL-8表达及TAM计数的临床病理意义

目的:检测胆囊腺癌组织中白细胞介素-8(IL-8)mRNA的表达、肿瘤相关巨噬细胞(TAM)计数并探讨其临床病理意义。方法:收集中南大学湘雅二医院及湖南省人民医院近五年胆囊腺癌手术切除标本36例及慢性胆囊炎手术切除标本10例,采用原位分子杂交方法检测IL-8表达,ABC免疫组化法进行TAM计数。比较胆囊腺癌和慢性胆囊炎标本组织中IL-8 mRNA表达和TAM计数的差异,并分析其与胆囊腺癌临床病理特征之间的关系。结果:胆囊腺癌组织中IL-8 mRNA表达阳性率及其评分均明显高于慢性胆囊炎(P0.01),IL-8 mRNA表达阳性率及其评分与其侵犯胆总管及发生淋巴结转移显著相关(P0.05)。胆囊腺癌组织中TAM计数(24.89±0.84)明显高于慢性胆囊炎组织(16.19±0.66),差异有统计学意义(P0.01);侵犯胆总管、肝脏及发生淋巴结转移的胆囊腺癌组织中TAM计数高于未侵犯胆总管、肝脏及发生淋巴结转移的胆囊腺癌组织TAM计数,其中侵犯胆总管和发生淋巴结转移之间差异显著(P0.01)。IL-8 mRNA阳性病例的TAM计数均明显高于阴性病例(P0.01),TAM计数与IL-8 mRNA评分间也存在显著正相关(r=0.748,P0.001)。结论:IL-8和TAM计数与胆囊癌的发生和发展密切相关,IL-8可能在促进TAM向胆囊癌组织迁移浸润中起作用。     

镍处理对水稻叶片H2O2积累和抗病的诱导效应

2.20mmol/L的硝酸镍处理水稻幼苗后第3天用稻白叶枯菌（Xanthomonas oryzae pv.oryzae）挑战接种,硝酸镍处理的稻苗病情比对照明显减轻,并且叶片中过氧化物酶（POD）活性上升,过氧化氢酶（CAT）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性明显下降,H2O2和丙二醛（MDA）含量显著增加。这些结果表明,H2O2积累与镍诱导的抗病作用密切有关。     

版纳小型猪近交系臂丛神经的解剖学观察

版纳小型猪近交系目前已进入 1 8世代[1] ,近交系数达 97 8% ,是目前最理想的人类异种器官移植供体之一[2 ] ,也是最理想的实验用小型猪之一[3 ,4 ] 。本文旨在提供其臂丛神经的解剖学资料。选取中国版纳小型猪近交系 4头 ,育龄 1 2个月 ,体重 4 5ｋｇ左右。经颈总动脉放血后灌注 1 0 %福尔马林固定 1个月 ,然后对其臂丛神经行解剖观察 (插图见封 4 )。1　臂丛神经的组成　第 5颈神经腹侧支的一部分和第 6颈神经腹侧支共同形成臂丛的前干 ,第 7颈神经腹侧支形成臂丛的中干 ,第 8颈神经腹侧支和第 1胸神经的大部分形成臂丛的后干。在斜角肌深…     

耐高温酿酒酵母单倍体的RAPD分析

采用随机孢子分析的方法 ,从酿酒酵母的耐热菌株HU TY 1中分离了单倍体HZ系列 ,对其进行生长曲线和发酵力的测定。选取HZ-21、HZ-84菌株进行随机扩增多态性DNA片段的分析 ,显示单倍体菌株与它们的二倍体亲株以及原始出发菌株LK的基因组之间确实存在着多态性DNA片段 ,其中有些可能与菌株的耐热性相关     

遗传标记及其在作物品种鉴定中的应用

本文评述了用于作物品种鉴定的形态标记（morphological markers）、细胞标记（cytological markers）、生化标记（biochemical markers）、分子标记（molecular markers）的优缺点。重点评述了分子标记在作物品种鉴定中的应用。文中除对蛋白质电泳指纹图谱——同工酶和贮藏蛋白（包括醇溶性蛋白、清蛋白、谷蛋白、球蛋白等）电泳产生的指纹图谱的应用外,较详细地介绍了近年来DNA指纹图谱技术;包括限制片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism,简称RFLP）、随机扩增多态性DNA (random amplified po lymorphic DNA,简称RAPD)、小卫星DNA（minisatellite DNA）、微卫星DNA（microsatellite DNA）,简单重复序列间扩增（intersimple sequence repeats,简称ISSR）,扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymorphism,简称AFLP）以及CAPS (cleaved amplified polymorphic sequences)和SNPS (single nucleotide polymorphisms)对作物品种鉴定和新品种登记,品种纯度和真实性的检验以及品种间亲缘关系的探讨和在分类研究中的贡献等。