大岩桐花瓣切块离体培养高频率花芽再生

该文报道了大岩桐花瓣切块离体培养再生花现象,花瓣切块再生花有两种方式：一种是仅再生花芽（命名为BF）;另一种是既再生花芽也再生营养芽（命名为BF＋V）。花芽再生的能力与光照、花芽大小及培养基中赤霉素和细胞分裂素浓度紧密相关。当培养基中含有1.0 mg/L GA3时,BA的添加会显著增加总花芽（BF＋BF＋V）的形成率,添加0.5 mg/L BA时,总花芽形成率达100%。在暗中培养时,BF达93.4%。不同大小花芽的花瓣再生花的能力不同,7 mm直径花芽的BF最高,达86.7%。同时,对花芽再生过程中花瓣切块的组织结构形态变化也进行了观察。     

牦牛SRY和TRO基因部分序列克隆与测序分析

对牦牛SRY和TRO的部分基因克隆和序列分析,以期为进一步开展该基因与其性别相关分析,进行性染色体的基因定位、以及分子标记辅助选择等研究提供了理论依据。用特定引物对牦牛和西门塔尔牛的SRY、TRO基因部分序列进行扩增并进行TA克隆和测序。通过测序结果与普通牛的比对分析表明,这两个基因区域在牛种中有极高的保守性。牦牛与普通牛SRY和TRO基因这两个区域的核酸同源性分别达到了99．08％和99．39％。根据对这两个基因序列的研究为精子或者胚胎的性别鉴定提供有力的理论基础。     

食品中沙门氏菌分子检测靶点的筛选与评价

[目的]发掘新的沙门氏菌分子检测靶点,筛选检测性能优秀的引物.[方法]利用BLAST程序比较沙门氏菌属内基因组DNA序列的同源性以及沙门氏菌与非沙门氏菌基因组DNA序列之间的特异性,发掘出100多个检测沙门氏菌属的特异性片段,并从中随机挑选出15个片段作为候选靶点,一共设计了27对引物(FS1～FS27),对它们的特异性、灵敏度加以评价,从中筛选检测性能最好的引物.[结果]在27对引物中,检测性能最优的引物为FS23,采用该引物对供试菌株的相应检测靶点进行PCR扩增,44株沙门氏菌都能扩增到一条492 bp特异性片段,而22株非沙门氏菌则不能扩增出这一特异性片段.以FS23为引物建立PCR方法检测猪霍乱沙门氏菌基因组DNA的灵敏度为11.9 fg/μL,细菌纯培养物灵敏度为4.9×102cfu/mL;用猪霍乱沙门氏菌人工污染牛奶样品,如果接种起始菌量为100 cfu/25 mL时,只需要增菌5 h,采用上述方法即能检测出沙门氏菌.[结论]引物FS23对应的基因序列是一个性能优良的新分子检测靶点,具备很高的特异性和灵敏性,能够广泛应用于食品中沙门氏菌的快速检测.     

布拉酵母对服用抗血小板药物老年幽门螺杆菌阳性患者肠道菌群及消化道出血的影响CSCD

目的评价布拉酵母(Saccharomyces boulardii,S.boulardii)联合四联疗法根除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对服用阿司匹林老年患者的影响,并从免疫炎症及肠道菌群的角度,探讨S.boulardii治疗H.pylori感染的机制。方法选择180例年龄60~75岁且服用阿司匹林的H.pylori阳性患者,随机分为两组,其中四联组应用铋剂四联疗法,S.boulardii组在铋剂四联疗法基础上加用S.boulardii。观察两组患者H.pylori根除率、血清白细胞介素(IL)-8和IL-17水平、临床疗效评分、不良反应、肠道菌群变化。随访12个月,观察H.pylori根除成功者和H.pylori根除失败者消化道出血情况。结果(1)四联组和S.boulardii组患者H.pylori根除率按方案(PP)分析分别为85.4%、86.7%(χ^(2)=0.066,P=0.826),按意向性(ITT)分析分别为77.8%、80.0%(χ^(2)=0.133,P=0.855),差异无统计学意义。(2)S.boulardii组患者不良反应发生率低于四联组(χ^(2)=1.925,P=0.009)。(3)治疗后,两组患者血清IL-8、IL-17水平,临床症状评分均低于治疗前,且S.boulardii组低于四联组(均P<0.05)。(4)治疗后,四联组患者肠道内乳杆菌数量、双歧杆菌数量、双歧杆菌/肠杆菌值(B/E值)较治疗前降低,而S.boulardii组较治疗前增加(均P<0.05);四联组患者肠道内肠杆菌、肠球菌数量较治疗前增加(均P<0.05),而S.boulardii组较治疗前无显著变化(均P>0.05)。(5)随访12个月,H.pylori根除成功患者消化道出血发生率低于H.pylori根除失败者(χ^(2)=3.825,P<0.001)。结论S.boulardii联合四联疗法不能提高服用抗血小板药物老年患者的H.pylori根除率,但可改善患者临床症状,降低不良反应,其机制可能与S.boulardii改善肠道菌群,减轻免疫炎症反应有关。此外,成功根除H.pylori可有效降低服用抗血小板药物老年患者消化道出血的风险。     

不同育性细胞质对水稻叶片中β-淀粉酶活性及同工酶的影响

对水稻雄性不育的生物化学研究,国内外已有不少报道,但一般集中在对花药(粉)的研究上。对不同育性营养体的生化特性的研究则报告甚少。Peterson等对不同育性的玉米苗期营养体的β-淀粉酶进行了研究,发现他们所研究的9个组合中,玉米保持系的β-淀粉酶有比不育系高的趋势,由此认为,β-淀粉酶可以作为苗期鉴定玉米育性的生理指标。在水稻上则有关于保持系和不育系营养体的光呼吸、RNA含量等方面的研究。但通过大量品种的研究来分析不同育性植株在营养时期的某些生化特性及其遗传控制者还不多。本工作的目的,是通过对不育系、保持系、杂种一代幼苗β-淀粉酶活性的比较,     

胞二磷胆碱的发酵合成及其纯化

胞二磷胆碱(Cytidine Diphosphate Choline,简称CDP-Choline,结构式及分子组成见图1),是卵磷脂生物合成的重要中间产物。卵磷脂是细胞膜的重要组成成分。它的代谢正常与否,直接影响细胞的透性、能量代谢及蛋白质生物合成等许多生物学功能。1963年,胞二磷胆碱开始用于临床。实践证明,它对脑损伤引起的意识障碍及其它神经系统疾病都有较好的疗效,国内外已有不少综述。     

猪肾酰化酶作用机制的研究——Ⅰ.金属离子与酶活力的关系

(1)大多数金属絡合剂除EDTA和迭氮化鈉外都能抑制酰化酶的活力,在可逆抑制情况下加入不同金属离子能部分或全部恢复酶活力。在固定絡合剂的浓度下酶活力的恢复程度与所加的金属离子浓度有关,每一金属离子都有一最适浓度。从以上結果推测酰化酶中的金属离子可能是Co~( )或Mn~( )离子。(2)在温和的条件下并有底物存在时,邻二氮菲和巯基乙酸对酰化酶的抑制是属于竞爭性,K_i值分別为1.28×10~(-4)M和1.74×10~(-3)M;一分子酶是与二分子抑制剂相結合。推測酰化酶可能是以二聚体形式存在。当抑制剂的浓度增大或使反应温度升高时都将引起不可逆的抑制。若酶与抑制剂預先一起保温亦得到类似的結果。(3)用电透析或在不同pH緩冲液下透析以除去酰化酶中的金属离子,都将导致酶的不可逆失活,因此酶中金属离子除起与底物結合的作用外,尚与維持蛋白貭的构型有关。     

SARS冠状病毒M蛋白的原核表达及其DNA疫苗构建

为探讨SARS-CoV的M蛋白的免疫学特性以及M蛋白作为SARS-CoV病毒疫苗组分的可行性和必要性.分别用pET-15b和pET-22b在大肠杆菌中表达SARS-CoV的M蛋白,亲和层析纯化后作为抗原应用.同时,将M蛋白的编码基因克隆进分泌型真核表达载体pSecTagB中得到重组质粒pSecM作为DNA疫苗,免疫BALB/c小白鼠、制备SARS-CoV M蛋白的抗血清.并用纯化后的M蛋白建立的SARS-CoV M抗体ELISA检测技术研究所构建的M-DNA疫苗的免疫效果.结果表明:两种重组M蛋白在大肠杆菌中均以可溶性形式得到高效表达,经与华大产的用灭活SARS全病毒制备的SARS-CoV抗体ELISA检测试剂盒比较实验,证明该原核表达的重组M蛋白能与SARS确诊病人血清以及M-DNA免疫鼠血清发生特异性抗原抗体反应.这两种重组M蛋白有可能作为抗原组分用于临床SARS-CoV检测中;所构建的SARS-CoV的M基因核酸疫苗能在小鼠体内产生特异性抗体,提示M蛋白在SARS-CoV疫苗尤其是组分疫苗的研制中应加以考虑,为DNA疫苗的开发提供了依据.     

母牦牛生殖系统中低氧诱导因子基因的表达分析

低氧诱导因子1α(Hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)和2α(Hypoxia-inducible factor 2α,HIF-2α)是诱导低氧基因和修复细胞氧内环境的核心调节因子,为了研究生活在青藏高原牦牛的繁殖机能对低氧环境的适应机制,采集卵泡期的5头成年母牦牛和母黄牛的下丘脑、脑垂体、卵巢、输卵管和子宫组织,利用RT-qPCR技术检测HIF-1α和HIF-2αm RNA的表达量。结果表明:HIF-1αmRNA在牦牛输卵管中表达量最高,牦牛脑垂体和输卵管表达量极显著高于黄牛(P0.01)。HIF-2αmRNA在牦牛脑垂体表达量极显著高于黄牛(P0.01),在输卵管表达量显著高于黄牛(P0.05)。说明在低氧环境条件下,母牦牛可能通过调节生殖生殖系统中HIF-1α和HIF-2α基因的表达维持其繁殖机能。