利用抑制性消减杂交（SSH）技术研究不同毒力的鳗弧菌菌株的基因多样性

[目的和方法]鳗弧菌是一种嗜盐的革兰氏阴性细菌,也是鱼类弧菌病的主要病原.对斑马鱼的半数致死量研究结果表明,鳗弧菌菌株VIB72具有较高的毒力,而菌株CW1的毒力较低.本文利用抑制性消减杂交(SSH)技术对这两个菌株的遗传差异进行了研究.[结果]通过对差减文库筛选,分离到59个对菌株VIB72的阳性克隆,并对这些克隆的DNA序列进行了测定.17个基因片断与其它细菌的已知功能的基因有较高的同源性,其中包括可溶性溶胞壁质转糖基酶、转移蛋白MobA和MobC、转座子IS66、抑制相关蛋白(金属β-内酰胺酶和乙酰转移酶家族)、毒素蛋白(DT-201和alveicin A免疫蛋白)、与OLD家族相似的ATP依赖性核酸内切酶以及SocE和GTP结合蛋白HflX(有高频率的溶原化).这些基因片断有可能是鳗弧菌毒力岛的一部分.其他的基因片断与其它的已知基因没有明显的相关性.[结论]这些结果表明,SSH技术成功地鉴定了不同致病性的鳗弧菌菌株的基因差异及潜在的毒力基因.     

壳聚糖微球分散体系的抑菌性研究

以乳化交联法制备的壳聚糖微米微球(CMs)为试验材料,研究其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌行为,并对其浓度因素、粒径因素和抑菌机理做了探讨。结果表明CMs的抑菌作用随其浓度的增加和粒径的减小而增强。在浓度<0.7 mg/mL时,CMs对细菌的生长具有先抑制后促进的作用;当浓度≥0.7 mg/mL时对细菌有杀灭作用。CMs对两种细菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为0.8、1.4 mg/mL和1.0、1.8 mg/mL,表明壳聚糖微球对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有明显的抑制作用,且金黄色葡萄球菌对微球抑制作用的反应比大肠杆菌更敏感。扫描电子显微镜观察发现,细菌能迅速贴附在CMs表面,并且贴壁后的细菌发生了明显的形态变化,有的甚至完全被破坏。     

低温寡营养条件下副溶血弧菌形成活的非可培养状态及其复苏研究

为研究在低温寡营养条件下副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)能否进入活的非可培养状态(VBNC),将浓度为1×1010CFU/mL的副溶血弧菌HW799在陈海水中4℃保存,每隔5天取样分别用吖啶橙染色荧光显微镜直接计数法(AODC)、活菌直接计数法(DVC)和涂布平板法(PC)测定细菌总数、活细菌数和可培养细菌数.在第30天时总细菌数基本不变,仍保持在109CFU/mL,活菌数为106CFU/mL,比总菌数低了约三个数量级,可培养细菌数为零,表明绝大部分副溶血弧菌HW799进入了VBNC状态;用扫描电镜、流式细胞仪对副溶血弧菌HW799活的非可培养状态、正常状态以及复苏后的细胞形态的研究表明进入VBNC状态后副溶血弧菌HW799形状变为球状,体积比正常状态明显变小,活细胞数也略有减少;采用在培养液中添加营养物质升温培养的方法,使VBNC状态的副溶血弧菌细胞在48h内复苏为可培养状态,复苏后的副溶血弧菌HW799与正常状态的细菌形态相似.     

染病刺参凝集素的分离纯化与性质比较

目的：研究刺参免疫机制,探寻其发病机理。方法：刺参（Apost／chopusjapon／cus）经磷酸盐缓冲溶液抽提、20—75％硫酸铵分级沉淀、DEAE—SepharoseF．F．和SephadexG一100柱层析,得到刺参凝集素（A几）。结果：经SDS—PAGE显示单一条带,亚基相对其分子量为31000。分别提取感染Tenacibaculum属和Vibrionaks属两种刺参烂皮病病原菌的刺参凝集素,感染Temcibaculum属病菌刺参的凝集素产量较大,但凝集兔红细胞的作用均不被所测试的单糖和寡糖所抑制,而仅被牛甲状腺球蛋白所抑制。凝集兔红细胞的作用均不被二价金属离子Ca2＋、Mg2＋、Mn2＋、Zn2＋及EDTA所抑制。在pH4．0。10．14系列缓冲液中均有活性,其中在pH4．0—7．5时活性最大。该凝集活性在90℃加热30min后凝集活性仅损失50％。结论：推断菌株Tenac／bacu／um可诱导刺参体内产生大量的凝集素。     

不同海带品系抗氧化系统活性与耐热性的相关性研究

以山东沿海广泛培育的两个海带品系耐高温海带901(简称901)和热敏感海带荣成1号(简称RC)为实验材料,研究不同温度条件下其抗氧化系统活性与耐热性状的相关性.结果表明,常温条件下(10℃)901与RC抗氧化系统的基础活性与耐热性状间无显著相关.高温胁迫条件下(18℃)RC体内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量快速升高,而901的ROS在整个胁迫过程中变化不大,说明ROS可能对高温氧化胁迫具有重要意义.RC的抗氧化系统对高温胁迫比901敏感,表现为出现活性有效抑制的时间和幅度都强于901.超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和抗坏血酸和维生素E可能在保护海带细胞免受高温胁迫方面具有重要作用.901的叶绿素对高温胁迫的响应明显滞后于RC,叶绿素含量的半伤害时间可作为判定幼苗期901和RC耐热性的灵敏指标.导致不同品系海带耐热性差异的并非其抗氧化系统基础活性的高低,而是该系统对高温胁迫的应激性和敏感性差异.     

胶州湾浮游植物水华期群落结构特征

根据2001年8月对胶州湾海域进行的为期2d的大面积调查资料,对浮游植物的群落结构进行了初步研究,结果表明,浮游植物群落主要由沿岸暖水性种类组成,以硅藻为主,共34种;还有少量的甲藻7种和绿藻1种,湾中央水域出现的物种数最多,为37种;湾边缘最少,仅出现10种,细胞数量的密集区出现在湾东部边缘水域,最高值为6．96×10⁸个cell·m^-3;低值区出现在湾口,最低值仅为3．18×10⁶个cell·m^-3调查期间浮游植物的物种多样性及其均匀度的最低值均出现在湾东部边缘水域;高值区出现在湾口和湾中央水域,胶州湾海域水团运动和水体富营养化程度是影响浮游植物群落分布的主要环境因素。     

湖南大通湖浮游动物群落结构特征与水质评价

浮游动物是湖泊生态系统的重要组成部分,在能量流动和物质循环中发挥着重要作用,同时还是水质评价的良好指示生物。为了解湖南省大通湖浮游动物的群落结构特征,2019年6月对该水域浮游动物的种类组成、多样性以及群落结构进行了调查分析,并利用现存量、指示生物和生物多样性指数法对水质进行了评价。结果表明,共鉴定出浮游动物104种,隶属3门60属。其中原生动物47种,占总种数的45.2%;轮虫23种,占总种数的22.1%;桡足类18种(不包括无节幼虫),占总种数的17.3%;枝角类16种,占总种数的15.4%。调查水域浮游动物平均丰度为19616.47ind.·L^–1,平均生物量为6.43 mg·L^–1。优势种为8种原生动物,分别是美拟砂壳虫(Pseudodifflugia gracilis)、泥炭刺胞虫(Acanthocystis turfacea)、大弹跳虫(Halteria grandinella)、砂表壳虫(Arcella arenaria)、绿急游虫(Strombidium viride)、盖厢壳虫(Pyxidicula operculata)、...     

海洋生态系统服务的产生与实现

在阐述海洋生态系统服务内涵的基础上,分析了海洋生态系统服务的产生过程和实现途径,将海洋生态系统每一组分和(或)功能与其所提供的服务联系起来,给出了从每种组分和(或)功能到相应的服务所经过的生理生态过程.结果表明,海洋生态系统的服务一部分是生物组分和(或)系统整体直接提供,另一部分是通过系统功能产生.系统内的各种生理生态过程不直接产生服务.服务的实现包括海洋生态系统途径和海洋生态经济系统途径两种.     

ycaCR基因在文昌鱼早期胚胎表达研究

文昌鱼作为现存的与脊椎动物最接近的无脊椎动物,一直被作为研究生物进化和胚胎发育的典型材料.利用整体原位杂交方法对从文昌鱼肠cDNA文库克隆到的ycaCR基因进行基因的胚胎表达模式研究,结果显示该基因在早期胚胎发育阶段没有表达,在2天幼虫的原始消化道表达,暗示ycaCR基因可能在原始消化道内发挥生物学作用.     

trp14基因在文昌鱼早期发育阶段的时空表达及免疫活性初步研究

探讨文昌鱼trp14 (thioredoxin-related protein of 14 kD)基因在文昌鱼早期发育阶段的时空表达模式及其免疫活性.利用整体原位杂交技术研究trp14基因在文昌鱼早期发育阶段的时空表达模式;通过半定量RT-PCR方法分析trp14基因在低温胁迫和免疫药物刺激下的mRNA表达变化.trp14基因在文昌鱼2 d幼虫的原始消化道表达,呈现时空特异的表达模式;低温可以增强trp14基因的表达,而免疫刺激药物LPS和LTA则降低trp14基因的表达量.文昌鱼trp14基因在胁迫条件下表达量发生变化,暗示其可能参与氧化压力变化引起的免疫反应.