利用结构多样性的对硝基苯酚羧酸酯和脂肪醇乙酸酯评估7个枯草芽胞杆菌酯水解酶的指纹图谱

基于GenBank公布的枯草芽胞杆菌168基因组序列,克隆表达了30个预测的酯水解酶基因。结果发现:其中7个酶对对硝基苯酚酯表现出明显的酯水解活力。它们在α/β水解酶家族中分属5个不同的亚家族。通过显色底物和pH指示剂进行的高通量筛选,分别绘制了这7个酶的底物指纹谱。考察了酶催化手性酯水解反应的对映选择性,结果表明:对硝基苄基酯酶PnbA和S-脱乙酰化酶Cah对手性醇的乙酸酯具有较广的底物谱,而PnbA和羧酸酯酶Nap分别对DL-薄荷醇乙酸酯和2-氯-1-苯乙醇乙酸酯/2-萘乙醇乙酸酯有极好的对映选择性(E>200)。此外,发现酯酶YitV催化2-氯-1-苯乙醇乙酸酯水解的反应遵循反-Kazlauskas规则。     

长江口潮间带大型底栖动物群落演替

2006年1月在崇明岛西端的潮间带湿地进行了一项生态工程,经过土方工程的区域被选为大型底栖动物群落演替区,因为其中的大型底栖动物群落受到了较大破坏,在其周边未受干扰区设立对照样点。试图通过群落重建群的研究分析3个问题：（1）在群落恢复过程中不同的生态学指标如何变化？（2）群落演替过程中什么先增长,生物量还是复杂性？（3）是否可以选择生态学指标以利于演替过程中3类不同增长模式（生物量、网络结构和信息量）的识别？多变量分析用于检验被干扰区群落是否已经得到恢复。Shannon-Wiener指数、Margalef指数、Pielou均匀度指数、能质（exergy）和结构能质（Specificexergy）用于分析演替过程中群落状态的变化。结果显示物种随时间的更替与群落结构变化密切相关。物种丰富度增长迅速,而且对照区和演替区的物种组成非常相似。演替进行1个月左右之后,演替区的生物多样性已经超过了对照区。能质和结构能质提供了群落结构发展的有用信息,但仍然缺乏鉴别系统所处信息状态的能力。多样性分析结果可以从中度干扰假说（Intermediate Disturbance Hypothesis）得到很好地解释。总体而言,干扰的空间尺度决定了群落的恢复特征,如果干扰区域明显小于周边未受干扰的区域,那么群落的复杂性（信息量和网络结构）将先于生物量得到恢复。     

芦苇收割对震旦鸦雀觅食活动的影响

芦苇(Phragmites australis)湿地具有重要的社会经济价值和特殊的自然保育意义,芦苇收割是芦苇湿地管理的主要手段,往往对栖息于芦苇湿地中的动物群落产生影响,尤其对专食芦苇昆虫的鸟类影响较大。2007年1～4月,在长江口崇明岛崇西湿地科学实验站研究基地芦苇收割前后通过样方法研究了芦苇收割对震旦鸦雀(Paradoxornis heudei)觅食的影响。研究表明,芦苇收割显著减少了震旦鸦雀潜在食物资源,改变了震旦鸦雀觅食分布并使震旦鸦雀提前转移到新生芦苇枝上取食,芦苇收割后残留老芦苇枝对震旦鸦雀取食具有重要影响。芦苇收割时保留一定的斑块状和条带状老芦苇有利于震旦鸦雀利用新芦苇枝上潜在食物资源,可以在一定程度上缓解芦苇收割引起的震旦鸦雀食物短缺。     

细胞松弛素B和低盐诱导长牡蛎“海大3号”四倍体的效果比较

为探索细胞松弛素B(CB)和低盐抑制第一极体诱导长牡蛎“海大3号”四倍体的最佳条件,研究了CB浓度(0.2、0.4、0.6和0.8 mg/L)、低盐(6、8、10和12)及诱导持续时间(10min、15min、20min和25min)对卵裂率、孵化率、四倍体率和诱导效率指数的影响,并分析了幼虫生长和生存情况。结果表明,在CB浓度为0.6 mg/L,诱导持续时间为15min时,四倍体率为(65.69±2.47)%,诱导效率指数最大;在盐度为8,诱导持续时间为15min时,四倍体率为(38.77±2.69)%,诱导效率指数最大。CB和低盐诱导组前期壳高大于对照组,后期小于对照组, CB诱导组壳高显著大于低盐诱导组(P<0.05), CB和低盐诱导组幼虫平均日增长量分别为(14.2±1.08)和(10.49±0.60)μm/d,均小于对照组(15.43±1.08)μm/d; 2个诱导组存活率始终低于对照组,低盐诱导组前期存活率高于CB诱导组,后期低于CB诱导组。综合来看, CB诱导法在四倍体率、诱导效率指数、12d存活率和生长速度等方面效果较好,适用于诱导长牡蛎“海大3号”四倍体。     

一株石油烃降解菌新种Marinobacter sp. PY97S的鉴定

【目的】为了对1株从黄海沉积物中分离到的石油烃降解菌新种PY97S进行分类学鉴定。【方法】采用16S rRNA基因序列同源性分析、生理生化指标测定、抗生素抗性实验、DNA G+C含量测定、全细胞脂肪酸组成测定、碳源利用实验、呼吸醌测定以及DNA杂交实验等多种方法对该菌株进行鉴定,并通过降解实验测定其对烷烃的利用情况。【结果】菌株PY97S为海杆菌(Marinobacter),革兰氏阴性,接触酶阳性,氧化酶阳性,主要呼吸醌为Q-9。在GenBank中与其16S rRNA基因序列相似度最高的模式株为Marinobacter koreensisDD-M3T(96.93%),两者DNA-DNA同源性仅为46.7%。菌株PY97S的温度生长范围为15℃-35℃(最适为30℃),NaCl浓度生长范围是0%-10%(最适为0%),初始pH生长范围为pH 6.0-9.0(最适为初始pH7.0)。该菌株可以利用多种糖类和有机酸类的碳源,并对氨苄青霉素、氧哌嗪青霉素等多种抗生素敏感。其DNA G+C含量为48.2 mol%。其主要脂肪酸组成为2-methyl C15∶0(29.97%)、C16∶1ω7c(27.22%)、C12∶0(22.22%)和C16∶1ω9c(5.73%)。【结论】菌株PY97S是1株能够降解多种多环芳烃和烷烃的海洋石油烃降解菌新种,具有应用到溢油污染海洋环境生物修复的潜力。     

蚓激酶基因F238在大肠杆菌中的可溶性表达

应用PCR技术扩增获得蚓激酶成熟肽基因F238,并将其克隆至大肠杆菌质粒pET22b-TrxA中,构建双顺反子表达载体p17rx-F238.重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),1.0 mmol/LIPTG、30℃条件下诱导6 h,经SDS-PAGE证实蚓激酶成熟肽蛋白获得了高效表达,所表达的蛋白产物相对分子量与预期...     

NGI重组DNA疫苗对转基因AD小鼠的治疗作用

目的研究NGI对转基因阿尔茨海默病小鼠的治疗作用。方法构建包含小鼠OMgp细胞外8LRP重复序列,人Tenascin-R的EGF-L结构域,以及人Nogo-A的氨基端和66个氨基酸细胞外域的重组质粒,肌肉注射AD小鼠,空载体组和空白对照组为对照组。水迷宫检测小鼠行为学差别,免疫组化检测其病理差别。结果4.5月龄AD小鼠经过水迷宫隐蔽平台实验,2d后疫苗组小鼠潜伏期比对照组缩短30%（P〈0.05）。探索实验显示3月龄疫苗组比空载体组和空白对照组小鼠穿越目标象限的次数分别增加48%和44%（P〈0.05）。结论NGI重组DNA疫苗能够提高转基因AD小鼠的学习与记忆能力。     

异戊烯基焦磷酸转运对雷公藤甲素生物合成的影响

雷公藤甲素是一种具有显著抗炎、抗肿瘤和免疫抑制活性的天然产物,市场需求量大,临床应用前景广阔。文中以雷公藤悬浮细胞为实验材料,通过对不同培养时期(7 d、14 d)的细胞外源性添加D,L-甘油醛(DLG)以阻断异戊烯基焦磷酸(IPP)转运,分析诱导前后的细胞活性及生物量、雷公藤甲素累积量及其生物合成上游途径关键酶基因的变化规律,探究IPP转运在雷公藤甲素生物合成过程中的时空特点及其影响机制。通过实验结果可知:IPP转运参与雷公藤甲素的生物合成;在细胞培养早期,IPP转运主要经由质体(MEP途径)转运到细胞质(MVA途径)中,而细胞培养晚期则相反;阻断IPP转运,可反馈调节雷公藤甲素生物合成上游途径关键酶基因的表达,进而影响雷公藤甲素的累积。上述研究填补了雷公藤甲素生物合成过程中IPP转运特点和机制方面的空白,为雷公藤甲素合成生物学关键技术的开发奠定了理论基础,具有重要的现实意义。     

应用奥曲肽预防胰十二指肠切除术后胰漏作用的研究

目的：预防性使用奥曲肽是否能减少胰十二指肠切除术后胰漏发生率存在着争议。本研究旨在研究奥曲肽在不同胰腺情况下预防胰十二指肠切除术后胰漏发生的作用。方法：本研究将＂软胰腺＂、＂细胰管＂作为术后胰漏发生的高危险因素,将184例胰十二指肠切除术病例分为4组：低危险/非奥曲肽组、低危险/奥曲肽组、高危险/非奥曲肽组、高危险/奥曲肽组。观察术后胰漏等术后并发症情况。结果：共发生术后胰漏35例（19%）,其中高危险组胰漏发生率是低危险组2倍以上（27%versus 10%,P〈0.01）。在胰漏发生低危险胰腺情况下,奥曲肽组与非奥曲肽组术后胰漏发生无显著差别;在胰漏发生高危险胰腺情况下,奥曲肽能显著降低术后胰漏发生率。结论：在胰十二指肠切除术围手术期应根据胰腺的具体情况选择性使用奥曲肽既能有效预防术后胰漏的发生,又能避免不必要的浪费。     

核因子-κB 在腹部火器伤肠管穿透后肺组织细胞凋亡中的作用*

目的:探讨腹部火器伤肠管穿透后核因子-κB在肺组织细胞凋亡中的作用,了解腹部火器伤肠管穿透后继发性肺损伤机制。方法:健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h组,实验组建立腹部火器伤肠管穿透模型后,用免疫组化图像分析法测定各组肺组织内NF-κB活性,同时用TUNEL测定肺组织细胞凋亡变化情况。结果:伤后各组肺组织内NF-κB活性明显高于对照组,并于伤后8h出现高峰。肺组织细胞凋亡指数伤后显著增高(P<0.05),并与NF-κB活性变化基本一致。结论:腹部火器伤肠管穿透后肺组织内NF-κB活性增强,肺细胞凋亡增多,从而继发导致肺损伤。