凡纳滨对虾低温差异表达miRNA的分析鉴定及靶基因的验证

为了解析miRNA及靶基因在凡纳滨对虾低温适应过程中的分子调控机制, 研究开展了凡纳滨对虾常温(28℃)及低温锻炼(16℃, 6d)下肝胰腺小RNA文库的测序和分析。从常温对虾的小RNA文库测序获得18—32 nt的高质量序列10690259条, 鉴定出已知的成熟miRNAs 57条; 而从低温锻炼对虾的小RNA文库获得18—32 nt的高质量序列序列8587144条, 鉴定出已知的成熟miRNAs 48条。分析获得25个在低温锻炼下呈显著差异表达的miRNAs。运用qRT-PCR验证了3条低温下差异极显著的miRNAs的表达模式。结果显示, 3条miRNAs的表达模式与高通量测序结果基本一致。预测低温差异表达miRNAs的靶基因, 并与转录组分析获得的低温显著差异表达基因进行比对, 从二者重合的基因集中挑选出4个基因, 即nuclear export mediator factor Nemf-lik、synapse-associated protein、seleno proteins 以及DEAD-box RNA helicase Variant 1, 运用qRT-PCR验证其在不同条件低温锻炼凡纳滨对虾肝胰腺中的表达规律, 为解析miRNAs及其靶基因在对虾低温适应过程中的分子调控机制提供了基础数据。     

欧文氏弧菌毒力蛋白PirAB的原核表达与纯化

对虾肝胰腺坏死病的爆发造成了对虾养殖产业的严重亏损。从上海地区凡纳滨对虾中分离出1株欧文氏弧菌(Vibrio owensii SH-14),该菌株可导致凡纳滨对虾死亡,且死虾出现对虾肝胰腺坏死病的典型症状。经PCR扩增欧文氏弧菌毒力蛋白PirA与PirB对应基因序列,并将其连接到表达质粒pET-21b(pirA)和pGEX-4t-1(pirB)。通过优化诱导表达和亲和层析纯化条件,最终获得大量高纯度的目的蛋白。经冷冻干燥保存为后期抗体合成以及进一步毒力效应研究提供参考。     

TP与GP方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效比较

目的:观察多西紫杉醇联合顺铂(TP)与吉西他滨联合顺铂(GP)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效和毒副反应。方法:选取晚期NSCLC60例,随机分为TP组和GP组,每组30例,均完成两个周期化疗。结果:TP组治疗有效率(CR PR)为43．3%,GP组为40．0%,两组比较无显著性差异(P＞0．05)。不良反应主要为骨髓抑制和恶心呕吐;TP组主要为白细胞的下降和末梢神经炎,GP组主要表现为血小板的下降。两组病人毒副反应均可耐受。结论:西紫杉醇或吉西他滨联合顺铂治疗晚期NSCLC均有较好的疗效,毒性反应可以耐受,但应注意不良反应的处理。     

长春西汀联合巴曲酶治疗老年突发性耳聋的疗效

目的:探讨长春西汀联合巴曲酶治疗老年突发性耳聋的疗效及对血液指标的影响。方法:选择我院140例老年突发性耳聋患者,随机分为两组,每组各70例。研究组患者给予长春西汀联合巴曲酶治疗,对照组患者仅给予巴曲酶治疗。观察并比较两组患者的临床疗效、血液流变学指标及纯音听阈值的变化情况。结果:研究组患者治疗有效率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后血浆黏度、全血黏度高切、全血黏度低切及红细胞压积明显改善,研究组改善程度优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);两组患者治疗后纯音听阈(PTA)值均较治疗前降低,研究组低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:长春西汀联合巴曲酶治疗老年突发性耳聋的疗效显著,可有效改善患者血液流变学指标及血管微循环,抑制血栓形成,值得临床推广应用。     

紫杉醇联合卡培他滨治疗Ⅳ期肺腺癌临床疗效及毒理研究

目的:探究紫杉醇联合卡培他滨方案治疗Ⅳ期肺腺癌的临床疗效及毒理研究。方法:选取我院肿瘤科收治的Ⅳ期肺腺癌患者62例,随机分为两组,其中对照组30例,给予卡培他滨口服常规治疗;实验组32例,在常规治疗的基础上加用紫杉醇治疗。对比两组有效率(RR)、疾病控制率(DCR)、中位进展时间(TTP)、中位生存期(MST)、血细胞分析情况、毒副作用发生率。结果:1实验组DCR高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);2实验组TTP、MST明显优于对照组,结果有统计学意义(P0.05);3两组患者血细胞各项指标无明显差异(P0.05);两组患者脱发、肝损害、恶心呕吐的发生率无明显差异(P0.05)。结论:紫杉醇联合卡培他滨方案可明显改善Ⅳ期肺腺癌患者的临床症状,延长患者的生存期,且毒副作用与单药治疗相比无差异,对临床具有指导意义,值得临床推广。     

放疗与吉西他滨治疗对肺癌A549细胞自噬相关基因Beclin1表达的影响

目的:探讨放疗与吉西他滨(Gemcitabine,GEM)治疗对人肺腺癌A549细胞中自噬相关基因Beclin1表达的影响。方法:使用60Coγ照射(6Gy)人肺腺癌A549细胞,细胞继续培养6、12和24h。使用人剂量吉西他滨处理人肺腺癌A549细胞,细胞继续培养24 h后,以未处理的A549细胞为对照,用RT-PCR和Western blotting法检测A549细胞中Beclin1 m RNA和蛋白的表达。结果:经过放射线照射后,三组A549细胞内Beclin1 m RNA和蛋白的表达量均增加,且在24小时末表达量达到最大。经过吉西他滨处理后,吉西他滨处理组A549细胞内Beclin1 m RNA和蛋白的表达量均增加。结论:放射治疗与吉西他滨治疗均可导致A549细胞内自噬相关基因Beclin1表达上调。     

滨梅2个肌动蛋白cDNA片段的克隆与表达

目的:克隆耐盐碱果树滨梅的肌动蛋白基因actin,为该物种优异性状基因的功能鉴定提供内参.方法:利用一对actin简并引物克隆滨梅actin cDNA片段,对其进行序列和表达分析.结果:得到2条743 bp的cDNA片段,两条核苷酸序列相似性为82％,命名为PmAct1和PmAct2并在GenBank登录(分别为JX855160和JX855161);序列比对发现2条actin片段氨基酸序列与其他植物同源性均在96％以上;根据不同果树Actin相似性构建进化树,表明2个滨梅actin明显分为两种类型,但均与蔷薇科果树亲缘关系较密切;半定量RT-PCR表达谱发现PmAct1可能为组成型表达类型,而PmAct2特异地在根和叶组织中表达量较高.结论:首次获得了2个滨梅actin基因,为该物种其他功能基因的挖掘和表达分析奠定了基础.     

北京市河流滨岸带植被调查

采用样地样方调查法,通过Margalef指数、Shannon-weiner指数和Pielou指数综合分析了北京市3条主要河流(潮白河、拒马河、清水河)的滨岸带植被物种丰富度、多样性及均匀度。结果表明:在11个样地中共记录植物74科248种,其中蕨类植物3科7种,双子叶植物56科166种,单子叶植物15科75种。清水河滨岸带的植物Mar-galef指数、Shannon-weiner指数和Pielou指数均高于潮白河与拒马河,植被状况保持较好。     

渤海湾地区红腹滨鹬迁徙动态的初步研究

红腹滨鹬(Calidris canutus)繁殖于环北极地区,属长距离迁徙鸟类,我国黄渤海地区是其在东亚-澳大利西亚迁徙路线上重要的停歇地。2003~2004年,通过对渤海湾北部双龙河口(东经118°21′,北纬37°2′)及其附近地区红腹滨鹬的种群调查,发现其迁徙高峰期出现在4月底到6月初,峰值为2004年5月15日的3 814只;2004年北迁时期,记录到佩戴有澳大利亚和新西兰脚旗的红腹滨鹬17只次,证实在澳大利亚西北部、东南部以及新西兰等3个地区越冬的2个红腹滨鹬亚种都在北迁时使用渤海湾作为其停歇地。