基于质谱和生物信息学分析的小菜蛾蛋白质鉴定

本研究以非模式昆虫小菜蛾Plutella xylostella为材料, 对比2, 3, 4龄幼虫的蛋白质组双向电泳图谱, 得到24个蛋白质差异点, 从中选取了编号为1111的差异表达蛋白质点进行质谱鉴定和生物信息学分析. 采用胶内酶解的多肽进行MALDI-TOF/TOF分析, 获得该点的肽质量指纹图谱（PMF）及串联质谱（MS/MS）图谱。将获得的PMF分别用MASCOT和ProFound等常用软件在NCBInr的Metazoa蛋白质数据库进行搜索, 匹配结果不理想. 进一步用PMF+MS/MS谱图搜索NCBInr的Metazoa蛋白质数据库, 以及小菜蛾EST数据库。 在NCBInr库中匹配结果为拟暗果蝇Drosophila pseudoobscura中的一种假定蛋白GA18218-PA, 而用EST库搜索的结果为家蚕Bombyx mori的ATP合酶的亚基。为验证搜索结果, 将该蛋白质点进行磺基异硫氰酸苯酯（SPITC）化学衍生后de novo测序, 最后确认该点可能为ATP合酶的一个亚基。最后着重讨论了蛋白质的质谱鉴定与生物信息学分析的联合使用, 希望据此选择出最适合于非模式昆虫蛋白质组学鉴定的方法。     

非嗜食植物次生物质对小菜蛾产卵驱避和拒食作用的研究

基于植物与昆虫的协同进化理论,利用25科37种小菜蛾非嗜食植物的茎、叶、花或根的乙醇提取物,研究其对小菜蛾成虫的产卵驱避作用和对幼虫的拒食作用。结果表明,供试植物提取物对小菜蛾有不同程度的产卵驱避和拒食效果,羊蹄甲、细叶桉、飞扬草、假连翘、花椒、荷花玉兰、烟草的乙醇提取物对小菜蛾成虫产卵有较好的驱避效果,驱避率均达80％以上,一品红、构树、艾蒿、茶枯、垂柳、飞扬草、羊蹄甲、狗尾草的乙醇提取物对小菜蛾幼虫有较好的拒食作用,48h的拒食率达80％以上。     

网粒体超疏水性在茶小绿叶蝉防杀虫剂渗透中的屏障效应

【目的】茶小绿叶蝉Empoasca onukii体表覆盖的网粒体具有超疏水性，杀虫剂喷雾触碰虫体后药滴动态是否受网粒体影响尚未完全清楚。本研究旨在明确网粒体在茶小绿叶蝉成虫抵御杀虫剂雾滴渗透的屏障作用。【方法】以罗丹明B(RhB)作为指示剂添加到测试的杀虫剂(联苯菊酯和茚虫威)中，利用可拍照显微镜观察记录联苯菊酯(1.25 mg/L和0.05 mg/L)和茚虫威(0.006 mg/L和0.0009 mg/L)喷雾处理后24 h，茶小绿叶蝉成虫翅面药滴滚落、蒸发、被抖动扫除等行为动态，分析翅面药滴大小与蒸发后固化形态的关系；测定网粒体移除前后药滴与翅面的接触角，统计不同疏水性翅面上的网粒体分布密度；收集并利用扫描电镜分析叶蝉体表抖落的药滴及药剂颗粒是否含有网粒体，同时观察网粒体与翅面残留溶质接触的显微形态。【结果】药滴动态观察显示，圆球状药滴在茶小绿叶蝉成虫翅面不会自行滚落，72.0%成虫静止等待翅面药滴蒸发，蒸发后形成药剂颗粒或不规则药斑与药滴大小无关，而与虫体翅面的疏水类型有关，蒸发后24 h内翅面的药剂颗粒都被叶蝉抖动扫除；在叶蝉疏水性强翅面上，药滴的静态接触角为141.63±8.06°，药滴蒸发后形成药剂颗粒，网粒体分布密度为6.1±1.2粒/μm²，而疏水性弱的翅面上药滴蒸发形成药斑，网粒体分布密度为2.2±0.9粒/μm²；SEM图片显示被茶小绿叶蝉抖落的药滴和药剂颗粒表面均带有网粒体，药斑和药剂颗粒的显微结构显示网粒体出现聚集并与残留溶质相融合。【结论】超疏水性网粒体的均匀分布决定药滴触碰茶小绿叶蝉成虫翅面后形成圆球状，网粒体的亲油性及团聚性促使药滴蒸发后形成药剂颗粒，网粒体的脱落性使药剂颗粒可被茶小绿叶蝉成虫抖动扫除。