我国6个地方绵羊品种微卫星DNA多态性研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究了我国蒙古羊、乌珠穆沁羊、哈萨克羊、阿勒泰羊、滩羊和藏绵羊 6个地方绵羊品种 17个微卫星标记的多态性 ,以探讨其遗传多样性、起源分化及群体间的遗传亲缘关系。结果表明微卫星标记不同位点间遗传多样性差异极显著 (P <0 0 1) ,群体间多态信息含量 (PIC)、近交程度 (Fis)和观察杂合度 (Obs .Het)差异不显著 ,但基因多样性 (genediversity)和期望杂合度 (Exp .Het)差异显著 (P <0 0 5 )。所研究的我国 6个地方绵羊品种与欧洲品种具有相似的遗传多样性 ,但具有较高的近交系数。个体和群体的聚类分析结果提示我国地方绵羊品种可能起源于两类祖先。群体间的聚类分析结果还表明 ,蒙古羊与乌珠穆沁羊分化不明显且具有较近的遗传亲缘关系 ,蒙古羊与藏绵羊间分化明显且具有较远的遗传亲缘关系。滩羊、阿勒泰羊以及藏绵羊间也具有较近的遗传亲缘关系。所研究的我国 6个地方绵羊品种的遗传分化 (Fst)与西班牙绵羊品种接近 ,但明显小于欧洲其他绵羊品种     

半天然杉阔混交林优势种群的增长规律

采用有限空间种群增长的逻辑斯谛模型,研究半天然杉阔混交林群落中主要种群（杉木,米槠）氏面积增长规律,指出杉木,米槠在不同类型群落中的底面积的最大增长速度的径级范围。     

食管癌前细胞DNA、端粒酶含量及多基因表达产物的定量检测

为探讨食管癌高发区人群食管上皮癌变过程中的早期分子改变及早期癌变机理.应用流式细胞术和免疫荧光技术及碘化丙啶DNA荧光染色方法,对食管上皮癌前细胞的DNA含量、端粒酶含量和多个基因p53、p16、cyclin D1蛋白质表达进行了定量检测.检测结果发现,DNA含量在癌变形成时明显增加,异倍体率为87.9%;p53蛋白积聚发生在癌变早期,在癌细胞组的阳性率为100%（5/5）;抑癌基因p16在癌变早期有明显缺失;癌基因cyclin D1及端粒酶阳性率在癌细胞组都为100%（分别为6/6,7/7）.研究结果表明：在癌变早期,DNA含量及异倍体率增加,癌基因cyclin D1表达增高,抑癌基因p16缺失及p53蛋白积聚,端粒酶含量也明显增高,在癌形成时已有多个分子事件发生.     

一种安全制备活化琼脂糖树脂的方法

溴化氰是常用载体(树脂)活化剂,但其毒性很强,具有挥发性,活化后树脂带较强的电荷而导致非特异性吸附.羰基二咪唑(1,1′-carboxyl-diimidazole, CDI)近年来被用于树脂的活化,具有毒性低、相对安全、方便、活化效率高、活化后树脂所带电荷相对较少等优点.由于国内同行很少采用CDI活化树脂制备亲和层析柱或固定化酶,在此介绍该方法的一些关键步骤供同行参考.     

杨树无性系PV曲线水分参数的研究

采用PV技术对8个杨树无性系(3、6、7、8、9、10、11、12号)的水分参数ψstlp、ψssat、RWCtlp、ROWCtlp、AWC、ξmax和b值等进行了研究,并采用抗旱性指数(DI)和模糊数学反隶属函数两种方法对各个无性系的抗旱性进行了综合评价.结果显示:8个无性系的ψstlp、ψssat、ROWCtlp、ξmax、b值不同,抗旱性也存在一定的差异.其中,11、7和8号维持膨压和渗透调节的能力比其余无性系强;11号具有很强的保持最大膨压和维持低水势的能力;7~9号无性系具有较强的忍耐水分胁迫和抗脱水的能力;3和6号细胞弹性最大,主要依靠其坚硬厚实的细胞保持体内的水分.结果表明,8个无性系分为3个类群:第一类群为无性系7、8、9、11、12号,抗旱性最强;第二类群为无性系10号,抗旱性居中;第三类群为无性系3号和6号,抗旱性最弱.     

超临界CO2萃取刺葡萄籽原花青素的工艺研究

刺葡萄(Vitis davidii Foex．)是属于葡萄属东亚种群的一个种,在湖南西部和南部的山区分布广泛,资源丰富,其果实酸甜、风味浓,但其果粒小,种子多,从种子中提取天然活性物质——原花青素的前景可能更为广阔。目前关于刺葡萄的研究报道少,为此本文以“紫秋”刺葡萄种子为原料,采用单因素试验和正交试验,探讨了超临界CO2萃取刺葡萄籽原花青素的工艺。研究结果表明,超临界CO2萃取刺葡萄籽原花青素的适宜工艺条件为:萃取压力30MPa,萃取温度55℃,料液比1:0．8,60％的乙醇为夹带剂,在此条件下,原花青素的产率为17．58 mg/100g,纯度可达89．7％。     

不同发育阶段尖头斜齿鲨肝油脂酸组成的变化

采用气相色谱仪分析测定了不同发育阶段尖头斜齿鲨肝油的脂肪酸组成与含量。在尖头斜齿鲨肝油总脂肪酸组成中 ,饱和脂肪酸占 15 3%～ 34 6 % ,单不饱和脂肪酸占 13 8%～ 2 5 6 % ,多不饱和脂肪酸 (PUFA)占 38 8%～ 6 8 1%。其中 ,最主要的脂肪酸为 16 :0 ,18:0 ,18:1ω9,2 0 :4ω6和 2 2 :6ω3。尖头斜齿鲨肝油脂肪酸组成与个体的发育状况关系密切。雄性尖头斜齿鲨 ,胚胎阶段肝油的脂肪酸主要由16 :0、 16 :1和 18:1(ω9+ω7)组成 ,2 2 :6ω3的含量很低 (3 8± 1 34 ,n =3) ;雄性幼鱼肝油 2 2 :6ω3的含量较胚胎阶段有了显著的提高 (2 7 1± 2 47,n =3) (P <0 0 5 ) ;性成熟个体肝油 2 2 :6ω3的含量达到最高值 (5 1 0± 7 42 ,n =5 ) ,退化期 2 2 :6ω3的含量明显降低 (34 4± 2 40 ,n =3)。雌性尖头斜齿鲨肝油 2 2 :6ω3的含量随着性腺的发育而逐渐增加 ,妊娠早期达到最高值 (49 7± 4 0 4,n =5 ) ,显著高于未成熟期个体 (2 5 7± 0 6 4,n =3)和卵巢发育期个体 (33 3± 3 46 ,n =4) ,妊娠结束期肝油 2 2 :6ω3的含量显著下降 (2 5 6± 8 0 8,n =3) ,提示 2 2 :6ω3在尖头斜齿鲨胚胎的生长发育中可能起了重要作用。     

木黄酮对人催乳素瘤细胞增殖及其凋亡影响的实验研究

目的观察木黄酮(genistein,GST)对培养的人垂体催乳素瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法将GST、β-雌二醇(E2)作用于体外培养的人催乳素瘤细胞,测定MTT值及3H-TdR掺入量,流式细胞仪测定细胞周期,并用TUNEL法观察细胞凋亡情况。结果不同浓度的GST可抑制催乳素瘤细胞的增殖,并存在着剂量效应,10-5mol*L-1GST可使G1期的细胞比例从对照组的55.3%上升为90.3%;不同浓度的E2以剂量依赖方式刺激催乳素瘤细胞的增殖,并使G2期的细胞比例从对照组的15.6%上升为41.8%。GST和E2的共同作用仍可抑制催乳素瘤细胞的增殖,但抑制程度降低。不同浓度的GST均明显促进催乳素瘤细胞的凋亡,E2对GST的促凋亡作用无明显影响。结论GST在体外能明显抑制培养人催乳素瘤细胞的增殖,并促进其凋亡。E2可部分拮抗GST的抑制增殖作用,但对其促凋亡作用无明显影响。     

福建漳浦前湖湾海底古森林木材解剖

福建漳浦前期湖湾海底古森林（推定有6000a以上历史）木材显微观察和鉴定结构表明;该海底森林的主要组成树种为侧柏[Platycladus orientalis (Linn.)Franco]、柏林(Cupressus funebris Endl.)水松[Glyptostrobus pensilis (Staunt.)Koch]、杉木[Cunninghamia lanceolata (Lamb.)Hook.]、木荷(Schima superba Gardn. et Champ.)、枫香（Liquidambar formosana Hance)、黄樟[Cunnamomum porrectrm (Roxb.)Kosterm.]、桢楠属一种(Phoebe sp.),是由原始森林被火山喷发物覆盖形成的。海底古森林木材研究对沿海防护林体系建设、木材保护、矿产资源勘探以及旅游资源开发等都有重要价值。     

两种新型L-苏氨酸醛缩酶的鉴定及活性检测方法

为了实现重要医药中间体β-羟基-α-氨基酸的生物酶法合成,挖掘验证新型的L-苏氨酸醛缩酶。以pET-28a(+)作为表达载体,通过蛋白表达纯化、薄层层析色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)技术分析L-苏氨酸醛缩酶及其催化产物的性质。基于4-氨基-3-肼基-5-巯基-1,2,4-三氮唑(Purpald)显色试剂开发检测醛缩酶的新方法。Streptomyces coelicolor SCO1844(天蓝色链霉菌,S.coelicolor SCO1844)和Streptomyces xinghaiensis SFR7A(星海链霉菌,S.xinghaiensis SFR7A)来源的醛缩酶被证明能够成功地合成β-羟基-α-氨基酸,且均为L-苏氨酸醛缩酶,实现了以苯甲醛和甘氨酸为底物合成l-threo/erythron-苯基丝氨酸的醇醛缩合反应。开发的可视化活性检测方法可以实现醛缩酶的快速鉴定和高通量筛选。两种新型L-苏氨酸醛缩酶的鉴定以及活性检测方法的开发,不仅丰富了生物法合成β-羟基-α-氨基酸的酶库,也为下一步对L-苏氨酸醛缩酶进行分子改造提高其催化活性和选择性奠定了研究基础。