拮抗植物病原真菌链霉菌菌株ZH-356的鉴定及其生防评价

[目的]对实验室分离到的菌株ZH-356进行鉴定并评价其对植物病原真菌的生物防治效果,为研发针对植物真菌病害的生防菌剂提供理论指导。[方法]通过平板对峙法确定菌株ZH-356抗菌谱,并通过16S rRNA基因序列分析确定其种属,利用离体枝条的苹果树腐烂病菌感染预防试验和患腐烂病苹果树的防治试验评价其生防效果。[结果]菌株ZH-356鉴定为链霉菌属,与直丝紫链霉菌(Streptomyces rectiviolaceus)相似性最高,为99.71%。抗菌谱试验表明,菌株ZH-356对苹果树腐烂病菌、小麦赤霉病菌、小麦根腐病菌和番茄早疫病菌等多种植物病原真菌均具有较强的抑制作用,这种抑制作用可导致苹果树腐烂病菌菌丝变粗、交叉扭曲、分支变少且容易断裂。此外,ZH-356产生的抑菌活性物质对温度和酸碱度具有高度稳定性,并且该活性物质只存在于其胞内,只有当ZH-356遇到植物病原真菌时才会被分泌出来以抑制它们的生长。在离体枝条的苹果树腐烂病菌感染预防试验中,ZH-356对苹果树腐烂病防效可达94%以上,而在患腐烂病苹果树的防治试验中,ZH-356菌制剂对苹果树腐烂病的防效高达100%。[结论]链霉菌ZH-356抑菌谱广,对多种植物病原真菌均具有良好的拮抗活性,可作为防治植物真菌病害的生防菌株,为基于ZH-356菌株的生防菌剂的开发和防治苹果树腐烂病等植物真菌病害奠定了基础。     

北京龙形水系三种沉水植物根际及叶际微生物群落特征

水生植物及植物表面附着微生物在人工湿地水体净化过程中发挥着重要的作用。以北京奥林匹克公园龙形水系为研究对象,通过高通量测序技术,对其底泥、水体及3种沉水植物——苦草Vallisneria natans、狐尾藻Myriophyllum verticillatum、龙须眼子菜Potamogeton pectinatus——的根际及叶际微生物群落的结构及功能进行了研究。结果表明,微生物多样性从高到低分别为底泥样品、植物根际样品、植物叶际样品和水体样品,植物叶际微生物种类要显著高于水体中微生物种类。LEfSe分析结果显示不同生境富集不同的微生物类群,其中底泥主要富集厌氧微生物类群,水体及植物叶际主要富集好氧微生物类群,植物根际则两者兼具。功能预测结果显示植物叶际样品的反硝化标志基因丰度要高于根际样品及底泥和水体样品,且狐尾藻和龙须眼子菜叶际样品反硝化标志基因丰度要高于苦草叶际样品。本研究可以为人工湿地构建时对沉水植物及功能微生物的选择提供指导意义。     

糖苷酶耐热性改造策略与应用

糖苷酶作为绿色温和的生物催化剂,能够水解包含糖苷、寡糖、多糖等在内的各种含糖化合物的糖苷键生成具有高生理和药理活性的衍生物,在食品、医药等工业领域应用广泛。而工业应用的糖苷酶经常需在高温条件下进行催化,以提高反应效率并减少污染,但大多数糖苷酶属于中温酶,在实际生产条件下的活性较低且损失较快,因此,提高糖苷酶在高温下的稳定性非常重要。本文综述了近年来利用定向进化、理性设计和半理性设计等策略改造糖苷酶耐热性的研究进展与应用,比较了不同策略之间的优势与不足,并对未来糖苷酶耐热性的改造方向进行了展望。     

基于Cytb和COⅡ基因序列的网翅蝗科(直翅目:蝗总科)部分种类的分子系统学研究

采用PCR产物直接测序法测定了2亚科31种网翅蝗科昆虫及1种癞蝗(外群)的线粒体基因Cyt b和COⅡ全序列,使用MEGA V4.1进行序列组成分析,对线粒体基因Cyt b、COⅡ数据集按照蛋白质基因密码子第一、二、三位点划分子集,并组成联合数据集COⅡ&Cyt b,对各数据集其子集进行了数据探索研究.在PAUP中应用NJ法、MP法、ML法以及在MrBayes V3.1中应用贝叶斯系统发育推论(BI)法进行系统发育关系重建,结果表明所研究的网翅蝗科部分种类的系统发育关系基本与中国的传统形态学分类体系没有差别,竹蝗亚科为较早分化出来的类群,其次为网翅蝗亚科;竹蝗新种和黄脊雷篦蝗聚为一支和其它竹蝗属类群形成姊妹群,因此建议将雷篾蝗属并入竹蝗属;隆额网翅蝗和宽翅曲背蝗聚为另一支,故建议将曲背蝗属并入网翅蝗属.雏蝗属的四个亚属中黑翅亚属、曲隆亚属和直隆亚属这三个亚属的单系性均得到稳健的支持,而短翅亚属的单系性在各种分析中皆得不到支持,它很可能是多系起源.     

PCR构建融合基因方法的建立

以聚合酶链式反应为基础的片段拼接技术——融合PCR技术是一种新的基因片段融合技术。以含有马铃薯块茎两种淀粉合成关键酶ssⅡ和ssⅢ基因为模板,利用融合PCR对其进行融合拼接,初步建立以PCR产物(不回收)及一步PCR法融合基因的构建方法,并对融合基因构建时PCR产物(不回收)的使用量及一步PCR法构建融合基因的中间引物浓度等条件进行优化。结果表明,以不回收的PCR产物为模板构建融合基因时PCR产物(不回收)的使用量在10-20 ng范围内为佳;一步PCR法构建融合基因的中间引物浓度在25-1 000 nmol/L为宜。     

不同发育阶段短期低温对小菜蛾生存和繁殖的影响

【目的】本研究通过不同低温时长和低温所处发育阶段对小菜蛾Plutellaxylostella生存和繁殖能力的影响,为冬季蔬菜大棚中小菜蛾的发生及防治提供理论参考。【方法】在相对湿度为55%±10%,12L∶12D的光周期条件下,观察小菜蛾4龄幼虫、蛹和成虫分别经低温（8℃）处理24、48和96h后幼虫的化蛹率、成虫的羽化率、成虫寿命、产卵前期、产卵期及产卵量等指标,以温度为（26±1）℃的处理为对照组。【结果】8℃处理不同时长对小菜蛾幼虫化蛹率的影响差异不显著（χ²=1.58,P=0.664）,但低温所处的不同发育阶段（χ2=1.58,P=0.664）,但低温所处的不同发育阶段（χ²=202.52,P <0.001和低温处理时长（χ2=202.52,P <0.001和低温处理时长（χ²=141.83,P <0.001）显著影响成虫的羽化率;4龄幼虫低温处理后的羽化率均高于蛹期低温处理的（4龄幼虫低温：87.40%;蛹期低温：66.97%）。成虫寿命受低温处理时长（χ2=141.83,P <0.001）显著影响成虫的羽化率;4龄幼虫低温处理后的羽化率均高于蛹期低温处理的（4龄幼虫低温：87.40%;蛹期低温：66.97%）。成虫寿命受低温处理时长（χ²=39.3,P <0.001）和低温所处发育阶段（χ2=39.3,P <0.001）和低温所处发育阶段（χ²=43.0,P <0.001）影响。一定范围内,4龄幼虫低温处理时长对雌雄成虫寿命无显著影响（雌虫：χ2=43.0,P <0.001）影响。一定范围内,4龄幼虫低温处理时长对雌雄成虫寿命无显著影响（雌虫：χ²=41.86,df=3,P=0.330;雄虫：χ2=41.86,df=3,P=0.330;雄虫：χ²=4.55,df=3,P=0.210）,而蛹期（雌虫：χ2=4.55,df=3,P=0.210）,而蛹期（雌虫：χ²=41.86,df=3,P <0.001;雄虫：χ2=41.86,df=3,P <0.001;雄虫：χ²=14.30,df=3,P <0.001）和成虫期雄虫寿命（χ2=14.30,df=3,P <0.001）和成虫期雄虫寿命（χ²=19.32,df=3,P <0.001）随低温处理时长的延长而逐渐延长;雄成虫寿命普遍长于雌成虫寿命（未成熟阶段低温：χ2=19.32,df=3,P <0.001）随低温处理时长的延长而逐渐延长;雄成虫寿命普遍长于雌成虫寿命（未成熟阶段低温：χ²=﹣3.88,P <0.001;成熟阶段低温：χ2=﹣3.88,P <0.001;成熟阶段低温：χ²=﹣5.72,P <0.001）;产卵前期随低温处理时长的延长而延长（未成熟期处理：χ2=﹣5.72,P <0.001）;产卵前期随低温处理时长的延长而延长（未成熟期处理：χ²=14.40,df=3,P=0.002;成熟期处理：χ2=14.40,df=3,P=0.002;成熟期处理：χ²=60.04, df=2, P <0.001）。单雌产卵量除蛹期8℃处理96 h(40.9粒/雌)外,其余处理与对照组（87.3粒/雌）相比无显著性降低。【结论】不同低温处理时长对蛹的生存和繁殖的影响比对4龄幼虫的影响更为明显,且随低温处理时长的延长,对小菜蛾的生存和繁殖的抑制程度加深。     

中国树甲族一新纪录属二新种及二新名(鞘翅目,拟步甲科)

记述我国树甲族1新纪录属和2新种并提出2种新名。模式标本均保存在河北大学博物馆。 Eucrossoscelis Nakane,1963中国新纪录 梭形真树甲,新种Eucrossoscelis hastatus sp．nov．（图1～8,20） 正模♀,贵州省道真县程家山,2004—05—24,于洋采。新种与分布于日本的E．araneiformis相似,但前者的头部和前胸背板的刻点不同,前胸背板光滑,刻点细小,侧缘饰边完整,端部钝尖;而后者的这几点都与之不同。种名来自它的梭形身体。 武夷山树甲,新种Strongylium wuyishanense sp．nov．（图9-19,21） 正模♂,福建省武夷山黄岗山,2004—05—21,苑彩霞、李静采。新种与云南鸡足山的细长树甲S．jizushanense Masumoto,1999相似,与后者的主要区别是：复眼较小、眼间距较宽,前胸背板的刻点小而稀疏,鞘翅刻点行上有较稀疏的刻点。这几点与后一种均有不同。种名来自模式标本产地。 Strongylium masumotoi Yuan et Ren,2005 nom．nov．Yuan et Ren,2005.Acta Zootaxonomica Sinica,30（2）：401．[nec Maeiklin,1864] Strongylium obscuratum Yuan et Ren,2005 nom．nov．Yuan et Ren,2005．Acta Zootaxonomica Sinica,30（2）：402．[nec Maeiklin,1864]     

模拟干旱胁迫对枣树幼苗的抗氧化系统和渗透调节的影响

用不同浓度的PEG-6000对抗旱性不同的1年生枣树(Zizyphus jujuba)幼苗进行渗透胁迫处理后,研究了不同抗旱性品种枣树幼苗的抗氧化酶活性和渗透调节物质含量的变化.结果显示,干旱胁迫下3种枣苗叶片的相对含水量(RWC)均降低,丙二醛(MDA)含量和细胞质膜相对透性均增加.在30%PEG胁迫下除骏枣1号的SOD活性降低外,3个品种枣苗在干旱胁迫下SOD和POD活性都增加;狗头枣2号的过氧化氢酶(CAT)活性在胁迫下明显增加,而木枣1号和骏枣1号的CAT活性均随着胁迫程度的增加而逐渐下降;木枣1号和骏枣1号的APX活性随着胁迫程度的增加先增加后降低,而狗头枣2号明显增加.干旱胁迫下,除骏枣1号的脯氨酸(Pro)含量和木枣1号的可溶性糖含量在30%的胁迫水平下降低(P>0.05)外,3种干旱胁迫水平下3个品种枣苗的Pro和可溶性糖含量均增加.总之,干旱胁迫下,枣苗叶片相对含水量、抗氧化酶(SOD、POD、CAT和APX)活性、渗透调节物质Pro和可溶性糖含量均为:狗头枣2号>木枣1号>骏枣1号,而MDA含量和膜透性均为骏枣1号>木枣1号>狗头枣2号,表明3个品种的抗旱性为:狗头枣2号>木枣1号>骏枣1号,研究结果与其品种的实际抗旱性一致.     

间苯二酚与邻苯二酚对泥鳅血清卵黄蛋白原的诱导作用

为探讨间苯二酚(m-dihydroxybenzene)与邻苯二酚(o-dihydroxybenzene)对雄性泥鳅Misgurnus anguillicau-datus血清卵黄蛋白原(Vitellogenin,Vtg)的诱导作用,将雄性泥鳅分别暴露于4种不同质量浓度间苯二酚(5.287mg/L、6.531mg/L、8.072mg/L、10.000mg/L)和邻苯二酚(16.708mg/L、17.742mg/L、18.836mg/L、20.00mg/L)中持续7d、14d、21d和28d,采用碱不稳定性蛋白结合磷法检测血清Vtg水平的变化。结果显示,与对照组相比,泥鳅在低质量浓度间苯二酚(5.287mg/L)和邻苯二酚(16.708mg/L)中暴露7d时,血清Vtg水平均有极显著升高,并且随着暴露浓度的增加,Vtg水平逐渐升高;在同一暴露浓度下,Vtg水平随暴露时间的延长逐渐升高;2种酚类化合物相比,暴露在间苯二酚中的泥鳅血清Vtg水平高于邻苯二酚。上述结果说明,2种化合物均可诱导雄性泥鳅肝脏合成Vtg,具有一定的环境雌激素效应,其诱导作用随着暴露剂量的增大和时间的延长逐渐增强。     

中国铜轴甲属分类研究及一新种记述（鞘翅目：拟步甲科）

对中国铜轴甲属进行了分类总结,记述1新种——四川铜轴甲Ainu sichuanus sp.nov.,编制了已知种检索表,绘制了中国种的地理分布图。